Médicaments dérivés

du sang

Pr Moussa Seck
Maître de Conférences Agrégé
Service d’Hématologie UCAD
 Objectifs
1- Citer les différents médicaments dérivés du sang

2- Citer les différentes étapes du fractionnement du plasma

3- Décrire les techniques d’inactivation virale des MDS

4- Citer 2 formes de solution d’albumine et 3 types

d’immunoglobulines spécifiques

5- Décrire les indications des MDS

 Plan
• Introduction
I. Fractionnement du plasma
II. Concentrés de facteurs de la coagulation
III. Immunoglobulines
IV. Solutions d’albumine
V. Indications des MDS
• Conclusion
 Introduction

• Produits dérivés de pools de plasma subissant un

fractionnement physico-chimique.

• Médicaments dérivés du sang ↔ Produits sanguins

stables, bien que d’origine humaine.
PFC
• Différents types :
• Albumine
• Immunoglobulines humaines
• Facteurs de la coagulation
• Caractéristiques communes :

– Produits obtenus à partir de pools de donneurs de

sang à partir du plasma uniquement

– Durée de conservation longue (01 an à 03 ans)

– Inactivation virale durant tout le processus de

fabrication
 I. Fractionnement du plasma
I.1. Collecte du plasma :
– Stockage avant congélation:
- ≤ 6 h à partir du don de sang pour le plasma issu
d’aphérèse
- ≤ 18 h avec système isotherme à +20 °C pour le
plasma issu de sang total

– Congélation rapide:
- Température ≤ -30 °C
- Temps ≤ 60 min.
I.2. Contrôle des unités de plasma :

– Contrôle de qualité:
- Facteur VIII (marqueur du respect de la chaine de
froid)
- Hémoglobine (marqueur d’une bonne séparation
des éléments figurés du sang)
- Protéines totales (marqueur d’un bon rendement)
- Anticorps spécifiques (pour la fabrication des
Immunoglobulines spécifiques)
I.2. Contrôle des unités de plasma :

– Contrôle visuel afin d’éliminer :

- toute poche cassée
- Poches présentant des signes macroscopiques
de contamination cellulaire
- Poches présentant des signes d’hémolyse
I.3. Mise en quarantaine des unités de plasma:
- Température : ≤ - 25 °C
- Durée : minimum 60 jours
- Stratégie des « mini-, midi- et maxi-pools »
- mini-pools : 8 échantillons
- midi-pools : 96 échantillons (12 mini-pools)
- maxi-pools : 576 échantillons (6 midi-pools)
I.4. Constitution des pools de plasma :

- Taille des lots: 2.750 litres de plasma

- Nombre de dons:
- 4.000 dons (plasma d’aphérèse, volume
moyen d’une poche 580 ml)
- 11.000 dons (plasma de dons de sang
total, volume moyen d’une poche 280 ml)
I.5. Technique de fractionnement

Premier mélange homogène

Ethanol 11%
Ethanol 9%

Ethanol 20%
Ethanol 25%

Ethanol 40%

Ethanol 40%
Ethanol 40%
 Le cryoprécipité :
- Température : environ de +2°C
- Centrifugation
- Précipité à froid : cryoprécipité riche en facteur VIII, en
facteur Von Willebrand et fibrinogène
- Solution restante : cryosurnageant (premier mélange
homogène)

 Technique de chromatographie :
• Eluât d’un mélange de 4 facteurs de coagulation
- Facteur II ou prothrombine
- Facteur VII ou proconvertine
- Facteur IX ou facteur anti hémophilique B
- Facteur X ou facteur Stuart
Fraction I :
- Ajout d’alcool éthylique : 9% éthanol
- Diminution progressive de la T°: - 2,5°C
- Contrôle du pH de la solution : 7,2
→ fibrinogène

Fraction II/III :
- Ajout d’alcool éthylique : 20% éthanol
- Diminution progressive de la T° : - 6°C
- Contrôle du pH de la solution : 5,8
- Précipitation, Centrifugation, Congélation : ≤ - 25 °C
→ Gammaglobulines (+ 40%)
• Fraction I/II/III:
- Ajout d’alcool éthylique : 20% éthanol
- Diminution progressive de la température : - 5°C
- Contrôle du pH de la solution : 5,9
- Précipitation, Filtration, Congélation : ≤ - 25 °C
→ Gammaglobulines (+ 40%)

• Fraction IV :
- Ajout d’alcool éthylique : 40% éthanol
- Diminution progressive de la température : - 6°C
- Contrôle du pH de la solution : 6,1
- En présence de diatomite (aide à la filtration)
- Précipitation, Filtration
→ Transferrine et Alpha-1 antitrypsine
• Fraction V:
- Ajout d’alcool éthylique : 40% éthanol
- Diminution progressive de la température : -
9°C
- Contrôle du pH de la solution : 4.8
- Précipitation, Centrifugation
- Congélation et stockage à ≤ - 25 °C
→ Albumine (≥ 95%)
Fraction II/III remise en suspension ( T°+5°C) :

• Frac on III : → Pentaglobine

- Ajout d’alcool éthylique : 11% éthanol
- Diminution progressive de la température : -2,5 °C
- Contrôle du pH de la solution : 5,1
- Précipitation

• Frac on II : → Immunoglobulines
- Ajout d’alcool éthylique : 25% éthanol
- Diminution progressive de la T° : -7 °C
- Contrôle du pH de la solution : 7,2
 II. Facteurs de la coagulation

• Inactivation des virus :

1→Traitement au solvant détergent (SD):
- Mélanger la solution avec un solvant organique (tri-n-
butyl phosphate) et un détergent (polysorbate 80).

- Chromatographie d'échange d'ions (élimine ces agents

chimiques)

- Efficacité spécifique sur les virus à enveloppe lipidique

(VIH, VHB, VHC).
2→ La nanofiltra on :
• Elimination selon la taille des agents pathogènes

• utilise un filtre en fibres creuses permettant d'atteindre

des porosités de 35 ou 15 nm.

• Les protéines passent le maillage constitué par les fibres

• capacité de retenir les virus et les agents transmissibles

non conventionnels.
Nanofiltration
3→ Le chauffage à sec :
• Chauffer le produit après lyophilisation à + 80°C
pendant au moins 72 heures

• En complément de la nanofiltration sur filtre de 35

nm pour la sécurisation virale des facteurs de la
coagulation vis-à-vis des petits virus (non
enveloppés).

• Efficace vis-à-vis des virus enveloppés

Facteurs de la coagulation
 III. Immunoglobulines
 Selon le type de plasma mis en œuvre :

1– Immunoglobulines polyvalentes:
- extraites du plasma non-spécifique
- spectre complet des anticorps retrouvés dans une
population normale

2– Immunoglobulines spécifiques:
- extraites de plasma avec des titres d’anticorps élevés
- ces titres élevés en Ac spécifiques se retrouvent dans le
produit fini
Selon la voie d’injection :

1- Immunoglobulines intramusculaires (IMIG):

- prophylaxie d’infections telle que l’hépatite A
- prévention de la maladie hémolytique du nouveau-
né
- immunoglobulines antitétaniques utilisées en
l’absence de preuve d’une vaccination efficace

2- Immunoglobulines intraveineuses (IVIG): dérivés

plasmatique stable le plus utilisé à l’heure actuelle
Inactivation des virus:

1– Traitement à pH acide (pH4 - pepsine) à 37°C:

• appliqué aux IVIG
• double objectifs:
- inhiber le pouvoir anti-complémentaire spontané
des IgG en dissociant les éventuels agrégats
- inactiver les virus

2– Traitement à l’acide octanoïque:

• appliqué IVIG
• efficace pour l’inactivation des virus enveloppés
Immunoglobulines
 IV. Solutions d’albumine
- protéine la plus importante du plasma : 38 à 44 g/l
- 60 à 80% de la pression oncotique plasmatique
- 1 g d'albumine retient environ 18 ml d'eau
- Pouvoir d'expansion volémique (albumine 20% est de
400%, albumine 4% est de 100%)
- injection d'albumine provoque une expansion
volémique d'une durée de 6 à 8 heures
- demi-vie d'élimination : 19 jours
 Inactivation des virus:

1- Pasteurisation :
- Traitement de 10h à + 60°C en milieu liquide
réalisé en présence de stabilisant des protéines.

- Efficace dans l'inactivation des virus pathogènes

majeurs (VIH, VHC, VHB).

- Inactivation de certains virus non enveloppés

(VHA, parvovirus B19)
 Deux types de solutions:
- Solutions hypertoniques à 20%
- Solutions isotoniques à 4%
 V. Indications
• Facteurs de la coagulation :
- Déficits congénitaux en facteur de la coagulation
(hémophilie etc..)

• Solutions d’albumine :
- Etat d’hypovolémie ++

• Immunoglobulines :
- Ig spécifiques : Vaccination ++
- Ig polyvalentes : déficit immunitaire ++, PTAI
 Conclusion
• Produits d’origine humaine (don de sang total +++)

• Nécessité de grande quantité de plasma (collecte de pool

de plasma)

• Risque de transmission virale moindre (inactivation virale

+++)

• Conservation à longue durée (règles de conservation +++)

• Respect des règles d’utilisation et de transport