INTRODUCTION

A LA BIOCHIMIE CLINIQUE
Thème VI-BIOCHIMIE

Pr Ag Bouzid Kahena
Laboratoire de Biochimie Clinique
Hôpital Charles Nicolle
 INTRODUCTION
LA BIOCHIMIE CLINIQUE

Le domaine de la biologie médicale

concerné par:
• l’analyse des molécules contenues
dans les fluides corporels (sang, liquide
céphalo-rachidien, urines etc..)
• et l’interprétation des résultats de
ces analyses outils pour la prise en
charge des malades.
 INTRODUCTION
LA BIOCHIMIE CLINIQUE: branche de la médecine de laboratoire

Antécédents

Examen clinique

Services de diagnostic

Services de laboratoire

(hématologie, microbiologie, parasitologie,

immunologie, biochimie clinique)

dépistage, diagnostic, pronostic, et suivi (réponse au

TTT) des patients
REPERTOIRE DES EXAMENS BIOCHIMIQUES

Milieux biologiques:
Sang veineux
Sang artériel
Sang capillaire
Urine
Fèces
Liquide céphalo-rachidien (LCR)
Crachat et salive
Tissus et cellules
Liquide d’aspiration (pleural, ascite, articulaire,
intestinal..)
Calculs
Majorité+++: sang veineux, urines
REPERTOIRE DES EXAMENS BIOCHIMIQUES
Paramètres biochimiques analysés: >400
1/ analyses courantes:
Glucose,Glycémie post prandiale,Hémoglobine glyquée
Urée,Créatinine,Clearance créatinine
Ionogramme,Protides
Calcium,Phosphore,Magnésium
Cholestérol,Triglycerides,HDL cholesterol,LDL cholesterol
Amylase
Acide urique
Fer sérique
Enzymes sériques : aminnotransférases, phosphatases..
Bilirubine totale et directe
C-Réactive Protéine
Microalbumine
 par tous les laboratoires de biochimie
 utilité pour un grand nombre de patients.
REPERTOIRE DES EXAMENS BIOCHIMIQUES
Paramètres biochimiques analysés: >400
2/ analyses spécialisées:
Hormones
Protéines spécifiques
Oligoéléments
Vitamines
Drogues (médicaments ou toxiques)
Analyses de l’ADN

par les laboratoires spécialisés (coût, fiabilité)

3/ examens dynamiques:
Epreuve d’hyperglycémie provoquée (HGPO)
diagnostic du diabète sucré.
DOMAINE D’APPLICATION MEDICALE
DES PRAMETRES BIOCHIMIQUES
 LA PRESCRIPTION MEDICALE
-par une personne habilitée à le faire.
-doit comporter les éléments suivants:

1/ Nom du patient, sexe et date de naissance,

2/ Numéro d’identification propre à l’établissement
hospitalier, le cas échéant, service/clinique/adresse,
3/ Nom du médecin demandeur (n° téléphone pour les
demandes urgentes),
4/ Diagnostic ou renseignements cliniques,
5/ Examen(s) demandé(s),
6/ Nature du prélèvement,
7/ Traitements médicaux en cours,
8/ La notion d’urgence est importante à préciser.
 LES PRELEVEMENTS
Prélèvements sanguins veineux
-Tube sec sans anticoagulant (dosage sur sérum)
-ou tube avec anticoagulant (dosage sur plasma)
.
 LES PRELEVEMENTS
Prélèvements sanguins veineux
Différents anticoagulants en biochimie et différents mécanismes
d’action: (analyse sur plasma)
-L’héparine+++ :favorise l’inhibition du facteur Xa par l’antithrombine III.

-Le fluorure de sodium et monoiodacétate: inhibiteurs de la

glycolyse: la glycémie (si le recueil du prélèvement dépasse une heure)
L’ion fluorure inhibe une enzyme de la glycolyse, l’énolase, et le
monoiodacétate agit sur la glycéaldéhyde 3 phosphate déshydrogénase.

-L’éthylène diamine tétra acétique (EDTA) et le citrate: (dans des

cas particuliers)
Leur action anticoagulante: leur pouvoir complexant du Ca.
 LES PRELEVEMENTS
Prélèvements sanguins veineux
Avantages des anticoagulants
- gain de temps,
- volume du plasma récupéré > à celui du sérum (5 à 20 %)
- risques d’hémolyse et de thrombocytolyse réduits.
Inconvénient des anticoagulants
Le plasma ne peut pas être utilisé pour les électrophorèses des protéines,
(pic supplémentaire du fibrinogène entre la zone des bêta et des
gammaglobulines).
De routine:
L’héparine est l’anticoagulant le plus répandu pour les analyses de
biochimie.
Cependant :
- il ne protège pas de la dégradation du glucose,
- présenté sous forme de solution, il introduit un facteur de dilution non
maitrisé,
- les sels de sodium sont à proscrire pour les dosages du sodium.
 LES PRELEVEMENTS
Prélèvements sanguins veineux
Conditions de prélèvement
-Le jeûne:strict (métab.glucidique et lipidique). Tabagisme récent !
-La position du patient: repos, assis en position semi allongée. (le
rassurer, lui expliquer la procédure du prélèvement).
-Le personnel: qualifié; GDS: médecins.
-L’horaire:7h-10h du matin
-Le matériel: préparé (aiguille, garrot, antiseptique..)
-Le garrot: pose <1mn :but faciliter la recherche de la veine.
-La technique: au pli du coude, une veine non perfusée, après désinfection.
- volume: indiqué sur le tube.
- tube: fermé avec le bouchon correspondant ;mélangé doucement .
- Tous les prélèvements :considérés potentiellement contaminants  l’usage
de gants est indispensable.
- Les prélèvements: correctement identifiés et transportés au laboratoire dans
les plus brefs délais.
 LES PRELEVEMENTS
Prélèvements sanguins veineux
Conditions de prélèvement
-Le jeûne:strict (métab.glucidique et lipidique). Tabagisme récent !
-La position du patient: repos, assis en position semi allongée. (le
rassurer, lui expliquer la procédure du prélèvement).
-Le personnel: qualifié; GDS: médecins.
-L’horaire:7h-10h du matin
-Le matériel: préparé (aiguille, garrot, antiseptique..)
-Le garrot: pose <1mn :but faciliter la recherche de la veine.
-La technique: au pli du coude, une veine non perfusée, après désinfection.
- volume: indiqué sur le tube.
- tube: fermé avec le bouchon correspondant ;mélangé doucement .
- Tous les prélèvements :considérés potentiellement contaminants  l’usage
de gants est indispensable.
- Les prélèvements: correctement identifiés et transportés au laboratoire dans
les plus brefs délais.
 LES PRELEVEMENTS
Recueils urinaires
-Urines de 24 heures: vidange de la vessie à une heure
déterminée; totalité des urines émises est recueillie dans un
récipient propre jusqu’au lendemain à la même heure;
conservées à + 4 °C.

-Echantillon d’urines fraîches: Le sujet vide sa vessie à

n’importe quel moment de la journée et recueille la totalité de
l’urine qu’il transmet au laboratoire.
 LES PRELEVEMENTS
Transport de l’échantillon

-Dans les délais (au maximum 4 heures), avec respect des

conditions d’acheminement.
-Dans un emballage étanche et résistant en position verticale.
-Pour certaines analyses: maintien du prélèvement à + 4°C
pendant toute la phase pré-analytique est impératif afin de
limiter l’activité du métabolisme cellulaire qui modifie certains
constituants; ex: les gaz du sang, l’ammoniac, les acides
aminés, les hormones peptidiques, etc..
-A l’abri de la lumière (dosage bilirubine) et à température
ambiante sauf exception.
 LES PRELEVEMENTS
Sources d’erreur (1)
Les principales sources d’erreur sont :
- Récipient incorrect
La nature du tube de prélèvement est importante à considérer, pour éviter une
erreur pré analytique et un faux résultat rendu au clinicien. Ex: une glycémie
prélevée sur un tube sec  glycémie très basse si analyse après 1 h.
-un tube contenant l’héparinate de lithium rebouchonné par le bouchon d’un tube
contenant l’EDTA  potassium élevé.
-Site de prélèvement inadapté
Ex:à partir d’une perfusion intraveineuse utiliser le bras opposé pour éviter
toute interférence.
- Stase prolongée pendant la ponction veineuse
Un garrot > 1mn, un prélèvement difficile, modifications du taux de plusieurs
paramètres sanguins.
-Technique de prélèvement sanguin incorrecte.
La difficulté à obtenir un échantillon sanguin/ son agitation vigoureuse
hémolyse. Les constituants présents en forte concentration dans les hématies se
répandent dans le sérum ou le plasma une erreur par excès de potassium,
LDH, transaminases, etc..).
 LES PRELEVEMENTS
Sources d’erreur (2)
-Erreur de temps: pour le recueil des urines de 24h.
- Modalités de transport et de conservation incorrects.
Le contact prolongé du plasma ou sérum avec les éléments figurés du sang 
modification du taux de certains paramètres.
Les raisons principales sont :
-La diffusion du contenu des cellules dans le plasma : potassium, phosphore,
LDH.
-L’utilisation par le métabolisme cellulaire : glucose, oxygène, acide pyruvique.
-La production par le métabolisme cellulaire : ammoniac acide lactique..
-La dégradation ou transformation par les enzymes cellulaires.
- Exposition à la lumière
Certaines substances sont photosensibles tels que les porphyrines, la bilirubine
et de nombreuses vitamines. L’exposition à la lumière entraîne des erreurs par
défaut, de leur concentration.
 EXPRESSION DES RESULTATS
-Les résultats sous forme de concentrations.
-Les unités du système international (SI): en mol/l à l’exclusion des anciennes
unités pondérales (g/l).
-La quantité d’une substance quelconque s’exprime en mol = ensemble de 6.1023
particules matérielles.
-La concentration d’une substance dans un compartiment organique=rapport de
quantité de substance dissoute dans un volume connu.
-Les enzymes sont exprimées en unité d’activité enzymatique (L’activité
mesurée est directement proportionnelle à la quantité d’enzyme présente).

Paramètre (mol/l) Conversion (g/l)

Glucose X 0.18=g/l Tableau : Facteur de conversion des

concentrations molaires (mol) en
Urée X 0.06=g/l
concentrations pondérales (g)
Créatinine X 0.113=mg/l

Sodium, Potassium,Chlorures X1= meq/l

Calcium x 40 = mg/l

Phosphore x 31 = mg/l

Cholestérol X 0.387= g/l

 INTERPRETATION DES RESULTATS
Notion d’intervalle de référence
-Les résultats: comparés à un intervalle de référence.
-Pour définir l’intervalle de référence d’un paramètre, on établit la distribution des
valeurs du paramètre dans une population en bonne santé (l’échantillon doit être
représentatif et de taille suffisante).
-Si la distribution est normale, la théorie statistique prédit qu’environ 95 % des
valeurs de la population se situeront dans un intervalle donné par la moyenne ±2
écart-types (2ET).

-Plus le résultat est loin des limites de la

fourchette de référence, plus il a des
chances d’indiquer la présence d’une
maladie.
-Définir des « limites d’action »
auxquelles une intervention appropriée
doit être faite en réponse à un résultat;
ex: le cholestérol plasmatique.

Figure: Distribution normale des valeurs d’un paramètre biochimique

 INTERPRETATION DES RESULTATS
Facteurs biologiques affectant l’interprétation (1)
Les facteurs suivants doivent être pris en compte avant d’interpréter tout
résultat:

- Le sexe: pour les paramètres sous la dépendance de mécanismes

hormonaux, ou liés à la masse musculaire du sujet (créatinine).
Ex: la ferritinémie des femmes en période d’activité génitale < (de 2 à 4 fois)
par rapport à celle de l’homme du même âge.
-L’âge: Bien connaître les variations de chaque analyse chez le nouveau né, le
nourrisson, …, l’enfant en période de croissance, ...
Ex: la phosphatase alcaline sérique d’un enfant en période de croissance est 3
à 7 fois plus élevée que celle de l’adulte.
- Les variations nycthémérales et rythme circadien: tenir compte de ces
variations pour interpréter certains résultats chez les sujets dont le rythme
nycthéméral est inversé.
Il existe des variations saisonnières. Les principales sont celles du 25 OH
cholécalciférol qui augmente en été et celle de la tri-iodothyronine qui au
contraire diminue l’été d’environ 20%.
 INTERPRETATION DES RESULTATS
Facteurs biologiques affectant l’interprétation (2)
- Le cycle menstruel: Le profil hormonal varie au cours du cycle
menstruel. Ex: [aldostéronep] =2x plus élevée avant l’ovulation que
pendant la phase folliculaire.
- La grossesse: Pendant la grossesse normale, le volume
plasmatique s’élève de 2600 ml à 3900 ml. La filtration glomérulaire
augmente d’un taux pouvant atteindre 50 % au cours du 3ème
trimestre.
-hémodilution : protéines totales, albumine
-situation carentielle liée à une augmentation des besoins: fer, ferritine
- La ménopause: une augmentation des concentrations plasmatiques
de: cholestérol, phosphates, acide urique, calcium, phosphatases
alcalines, ferritine et diminution de la progestérone puis oestrogènes.
- Le stress: sécrétion d’hormones surrénaliennes et thyroïdiennes.
 INTERPRETATION DES RESULTATS
Facteurs biologiques affectant l’interprétation (3)
-L’exercice musculaire: changements de concentration des
catécholamines, cortisol, glucagon et diminution de l’insuline  stimulent la
production de glucose.
- Le régime: une alimentation riche en viande et protéines élévation de
l’urée et de l’uricémie. Certains sujets ont des habitudes alimentaires
particulières (végétariens), qu’il convient de connaître pour interpréter le statut
en fer.
-Le tabagisme chronique: Il modifie, hormis le nombre de leucocytes
circulants, la concentration des lipoprotéines plasmatiques, l’activité de
nombreuses enzymes, les hormones, vitamines, marqueurs tumoraux et
métaux lourds.
-Les traitements: Un grand nombre de médicaments influence les résultats
des analyses biologiques, soit de façon directe (mécanisme métabolique), soit
indirectement (interférences pendant le dosage proprement dit).
le biologiste doit être informé des traitements en cours ainsi que de leur
mode d’administration. Dans certains cas, il sera préférable de réaliser le
prélèvement avant l’instauration du traitement, ou après observation d’une
fenêtre thérapeutique d’une durée appropriée.
 CONCLUSION

L’analyse des molécules contenues dans les

fluides corporels permet de répondre à
différentes questions que le médecin se pose
par rapport à son malade et constitue un outil
parmi plusieurs autres pour le diagnostic et
la prise en charge thérapeutique.
Merci de votre attention