Cytologie sanguine

Examens complémentaires à l'hémogramme –Fiche 1

V itesse de sédimentation
(Méthode de Westergren)

1 - Définition
La méthode standart de Westergren est définie par le Comité International de Normalisation en
hématologie.
C’est la vitesse à laquelle sédimentent les hématies d’un sang :
- recueilli sur citrate, à raison d’un volume de citrate pour 4 volumes de sang.
- déposé dans des tubes calibrés et verticaux, maintenus à température ambiante
(20 à 27°C).

On mesure la hauteur de plasma surnageant 1 h après le dépôt, grâce aux graduations du tube.
Le résultat s’exprime en mm de plasma surnageant après 1h de sédimentation.

2 - Facteurs influençant la VS

2.1 - Composition du plasma en protéines

Les protéines plasmatiques, chargées pour la plupart
positivement, neutralisent les forces de répulsion des GR
chargés négativement (acide sialique). Elles favorisent la
formation des rouleaux de GR.
La vitesse de sédimentation est d’autant plus rapide que
la formation de rouleaux d’hématies est importante.
Ainsi l’accélération de la VS est le plus souvent causée par
l’augmentation du taux de protéines plasmatiques telles que :
- le fibrinogène (migre au niveau des 
globulines)
- l’haptoglobine (migre au niveau des 2
globulines)
- la CPR= protéine C réactive : « protéine
d’origine hépatique qui précipite en présence de
la protéine C du pneumocoque » (migre au
niveau des  globulines)
- les anticorps ( globulines).
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2.2 - Certaines pathologies érythrocytaires

- Variation du nombre de GR
Une augmentation du nombre de GR ralentit la VS
Une diminution du nombre de GR accélère la VS

- Taille des GR
les macrocytes sédimentent plus vite
les microcytes sédimentent moins vite

- Formes anormales gênant la mise en rouleaux

Sphérocytes (forme sphérique)
Drépanocytes (forme de croissant)…

3 - Matériel et réactifs

- Tubes de Westergreen
Tubes en matière plastique, à usage unique, calibrés, gradués en mm, le “zéro” étant la
graduation supérieure.

- Un support
Permettant de maintenir les tubes rigoureusement verticaux.

- Citrate trisodique à 0,11mol/L

Solution anticoagulante liquide servant à diluer le sang.

- Sang
Le sang est prélevé sur un sujet à jeun et au repos (les lipides modifient la VS). En pratique
courante le prélèvement se fait sur EDTA, le même échantillon servant à l’hémogramme et à la
VS. Parfois le sang est prélevé directement sur citrate 0,11 mol/L à raison d’un volume de
citrate pour 4 volumes de sang.

Remarque :
Des techniques récentes permettent de mesurer directement la VS dans le tube qui a servi au prélèvement
(tube spécial), ce qui évite des manipulations de sang pouvant être source de contamination.
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4 - Mode opératoire
Les conditions expérimentales doivent être rigoureusement respectées, car elles influencent la VS
(verticalité du tube, calibre du tube…).

- Mettre la VS le plus tôt possible après le prélèvement :

Avant 2h si le sang est conservé à température ambiante.
Avant 6h si le sang est conservé à 4°C.
4.1 - Dilution du sang prélevé sur EDTA dans un tube à hémolyse

- Dans un tube à hémolyse sec, mettre un volume de citrate : 0,3 mL.

- Préparer le matériel nécessaire à la réalisation du test.
Mettre les gants.
- Homogénéiser le sang manuellement par retournements lents, puis retirer le bouchon
en évitant les aérosols
- Ajouter 4 volumes de sang : 4 x 0,3 =
(pipette automatique à désinfecter en fin de manipulation).
- Mettre un parafilm.
- Homogénéiser le mélange par 2 à 3 retournements.
4.2 - Montage de la VS
- Placer, en le maintenant bien, le tube à hémolyse
contenant le sang dilué dans le godet.
- Introduire le tube de Westergren jusqu’au fond
du tube de sang dilué.
- Tirer la tige intérieure jusqu’à ce que le sang
atteigne exactement la graduation « zéro » en
évitant les bulles d’air.
- Casser la tige qui dépasse du tube.
- Noter le temps « zéro »
Jeter les gants puis ranger le matériel non contaminé
- Laisser sédimenter 1h, en évitant tout choc au
portoir.
- Lire la hauteur de plasma surnageant après 1h
de sédimentation.

Si la lecture après 2h est difficile, une nouvelle lecture après 2h de

sédimentation peut être effectuée. fig 12: Système pour VS

Mettre les gants pour éliminer le tube à VS dans le sac plastique en vue de l’autoclavage et le tube à
hémolyse dans l’eau de Javel.
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5 - Résultats et interprétation

5.1 - Intervalles de référence

Homme : 15 mm après 1h de sédimentation

Femme : 20 mm après 1h de sédimentation
Enfant : 10 mm après 1h de sédimentation

Causes d’erreur favorisant un augmentation de la VS :

Température de la pièce > 23°C
Tube incliné
Vibrations, chocs
Quantité d’anticoagulants non respectée

5.2 - Variations physiologiques

- VS accélérée chez la femme enceinte

Ceci est dû à l’hémodilution et au taux élevé de fibrinogène.
- VS souvent accélérée chez les sujets de plus de 50 ans
Après 1h jusqu’à 20 mm chez l’homme
jusqu’à 30 mm chez la femme
et même jusqu’à 50 mm chez le vieillard
5.3 - Variations pathologiques

5.3.1 - Ralentissement de la VS
Il est difficile à apprécier. Il se rencontre lors :
- d’une diminution du taux de fibrinogène.
- de certaines pathologies des érythrocytes :
 anomalies érythrocytaires : drépanocytose, sphérocytose….
 polyglobulie
- d'une hyperleucocytose >50 G/L.

5.3.2 - Accélération de la VS

5.3.2.1 - Lors d’une diminution du nombre d’érythrocytes

Érythropénie provoquant une anémie profonde VS = 30 à 40mm/h
En particulier : les anémies hémolytiques (accompagnées généralement d’une baisse de
l’haptoglobine).
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5.3.2.2 - Essentiellement lors de l’augmentation du taux de protéines plasmatiques

 Syndrome inflammatoire, caractérisé par un taux augmenté en fibrinogène

( globulines), en haptoglobine (2 globuline) et protéine C réactive (CPR).
Exemple : Rhumatisme inflammatoire, Cancers avec métastases …

 Hyperstimulation du système immunitaire, caractérisé par un taux de fibrinogène normal et

une augmentation du taux d’anticorps sériques ( globulines) de spécificités variées (anticorps
polyclonaux).

 Maladies entraînant la production d’anticorps monoclonaux.

Maladie de Waldenström et myélome de Kahler, deux maladies caractérisées par un taux de
fibrinogène normal et une augmentation du taux d’anticorps sériques d’une seule spécificité
(anticorps monoclonal). Dans ce cas là, la VS est considérablement augmentée (supérieure à
100 mm après 1h) et sur le frottis sanguin, on peut même observer la présence de rouleaux.

6 - Automatisation de la VS
Des techniques automatisées de mesure de la VS ont été mises au point.
Le principe permettant la lecture est fondé sur la propriété des globules rouges à bloquer les rayons
infrarouges, alors que le plasma laisse passer les rayons.
Chaque canal de l'appareil est équipé d'une diode émettrice de rayons d'infrarouges et d'un capteur.
Lorsque la pipette est mise en place entre l'émetteur et le capteur dans l'appareil, la section contenant
des globules rouges bloque les rayons infrarouges qui ne sont plus détectés par le capteur.
En fin de test, l'appareil recherche le niveau pour lequel les rayons infrarouges ne sont plus détectés, il
indique la vitesse de sédimentation.
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Conduite à tenir devant une VS accéléré

La VS est un test non spécifique à interpréter avec prudence, en fonction du contexte clinique.
 En l’absence d'anémie sévère et d’un contexte clinique évocateur

VS accélérée

Dosage du fibrinogène plasmatique

et protéine C réactive (CRP)
Normal Augmenté

Électrophorèse des protéines plasmatiques

 des  globulines 2 globulines

Pic monoclonal de  globulines
polyclonales
 maladie de Kahler,
 hyperstimulation du
maladie de Waldenström
système immunitaire  syndrome
inflammatoire

Normal
Pathologique

Gammapathie Gammapathie Syndrome

polyclonale monoclonale inflammatoire

 Au cours d’une pathologie connue, la VS constitue un élément de surveillance

d’un étatinfectieux, inflammatoire ou cancéreux, par une méthode simple et efficace.
o Accélération de la VS laisse supposer une poussée évolutive.
o Ralentissement de la VS laisse supposer une évolution favorable.
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