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Plasmodium vivax est la principale cause de la malaria en Asie et en Amérique du Sud. On pense que
l'infection à Plasmodium vivax est absente des populations africaines qui sont du groupe sanguin
Duffy négatif (Duffy-negative). Cependant, de nombreux cas d'infection à P. vivax ont récemment
été observés chez des Africains Duffy-négatifs. Cela soulève la question suivante : les infections à P.
vivax dans les populations Duffy négatives étaient-elles auparavant absentes ou P. vivax s'est-il
adapté pour infecter les populations Duffy négatives ? Cette étude se concentre sur les récentes
découvertes de P. vivax en Afrique et présente des points de vue sur les ligands du parasite qui
pourraient jouer un rôle dans les infections à P. vivax Duffy négatif. En outre, des indices obtenus à
partir de l'étude de l'infection des réticulocytes par P. vivax sont présentés, ce qui pourrait fournir
des pistes pour établir

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Introduction

Plasmodium falciparum est la principale cause de décès dus au paludisme dans le monde ;
Plasmodium vivax provoque également des maladies graves chez l'homme, principalement en Asie
et en Amérique du Sud [1-3]. Le taux élevé de mortalité autour de l'estuaire de la Tamise il y a
plusieurs siècles était présumé être causé par P. vivax [4]. On pensait que Plasmodium vivax était
absent des populations africaines dont l'antigène du groupe sanguin Duffy (voir Glossaire) était
négatif (Duffy-négatif). Récemment, cependant, de nombreux cas d'infection par P. vivax dans des
populations Duffy-négatives ont été signalés en Angola, au Bénin, au Botswana, au Cameroun et en
Éthiopie, Guinée équatoriale, Kenya, Madagascar, Mali, Mauritanie, Sénégal, Soudan et Ouganda [5-
20]. Parmi ces nouveaux cas, on a observé que l'infection était moins grave chez les Africains Duffy
négatifs que chez les Africains Duffy positifs à l'antigène du groupe sanguin (Duffy-positive). On
craint que les mutations et l'évolution de P. vivax ne fassent courir aux Africains Duffy négatifs le
risque de contracter une maladie grave à l'avenir.

L'importance potentielle de P. vivax en Afrique pourrait être sous-estimée par les dirigeants et les
décideurs politiques. L'une des raisons pourrait être la déclaration des infections à P. vivax,
généralement faite au cas par cas, plutôt que sous la forme d'une carte holistique de l'Afrique. En
outre, comme P. vivax peut être asymptomatique, il est nécessaire de disposer d'outils de diagnostic
par PCR pour déterminer la fréquence réelle de P. vivax dans toute l'Afrique. Si les infections à P.
vivax ne sont pas prises en compte, P. vivax pourrait entraver les efforts de contrôle et d'élimination
du paludisme à l'avenir. Nous résumons ici les preuves existantes du paludisme à P. vivax chez les
Africains Duffy-négatifs, nous mettons en évidence les ligands et les récepteurs érythrocytaires de P.
vivax impliqués dans les interactions parasite-hôte, et nous discutons des possibilités de culture de
P. vivax, ce qui aidera à comprendre la biologie du parasite et à soutenir les efforts d'élimination de
P. vivax.

Preuves de l'incapacité de P. vivax à envahir les érythrocytes Duffy-négatifs

La thérapie antipaludéenne pour la neurosyphilis a été mise au point en 1919 par Julius Wagner-
Jauregg. Cependant, en 1932, P. vivax s'est révélé inefficace pour traiter les Afro-Américains, qui ont
donc été jugés résistants à P. vivax [21]. Bien qu'une majorité d'entre eux aient été résistants à
l'infection par P. vivax, la résistance n'était pas universelle. Young et al. ont démontré que le
caractère réfractaire était présent après l'inoculation de sang infecté par P. vivax, indiquant que la
résistance se situait au niveau des érythrocytes [22]. Garnham a décrit l'absence de P. vivax en
Afrique de l'Ouest ; cependant, 11 Européens revenant d'Afrique de l'Ouest ont été infectés par P.
vivax [23].

En 1975, pour identifier les récepteurs érythrocytaires de P. knowlesi (un parasite qui cause le
paludisme chez les primates), P. knowlesi a été testé pour l'invasion en utilisant des érythrocytes
dépourvus de divers déterminants du groupe sanguin. Parmi les érythrocytes testés, il a été
découvert que les érythrocytes dépourvus de l'antigène Duffy étaient réfractaires à l'invasion par P.
knowlesi [24]. On savait à l'époque que le Duffy négatif était courant dans les régions d'Afrique où P.
vivax n'était pas présent, ce qui suggérait que l'antigène Duffy était le récepteur de P. vivax. Par la
suite, cette hypothèse a été testée sur P. vivax chez l'homme, en démontrant la résistance des Afro-
Américains Duffy négatifs à l'infection par P. vivax, induite par les piqûres de moustiques infectés
[25]. Tous les Afro-Américains Duffy positifs étaient sensibles à l'infection par P. vivax [25]. D'autres
études sur les infections naturelles à P. vivax ont démontré que les Afro-Américains Duffy négatifs au
Honduras (26) et dans l'armée américaine au Vietnam (27) étaient résistants à l'infection par P.
vivax.

Plasmodium vivax dans les populations africaines Duffy-négatives : Un changement récent ?

Récemment, l'infection par P. vivax chez les Africains Duffy-négatifs a été observée dans de
nombreuses régions d'Afrique (figure 1 et tableau 1) et en Amérique du Sud où vivent des personnes
d'origine africaine Duffy-négatives [5-11, 15, 19, 28-30]. Des infections à P. vivax ont également été
récemment observées au Sénégal, au Botswana et en Ouganda, mais le statut de l'antigène Duffy
dans ces cas n'était pas déterminé [12, 16, 18, 31]. Le premier rapport d'infection à P. vivax chez des
Africains Duffy-négatifs a été établi au Kenya [5]. Il est important de noter que ces infections ont été
détectées lorsque les outils moléculaires sont devenus disponibles pour identifier des niveaux
extrêmement faibles d'infection à P. vivax [5-13, 16, 17, 19, 28-30, 32] (Tableau 1). Les travaux de
Didier Ménard et de ses collègues à Madagascar ont permis d'identifier de multiples cas de P. vivax
chez des Africains Duffy-négatifs [6] (Figure 1 et Tableau 1). En outre, des infections à P. vivax chez
des Duffy négatifs ont été constatées en Éthiopie [10, 14] et au Soudan [17], où vit une forte
proportion de Duffy positifs [33]. Les infections chez les Duffy-négatifs à Madagascar et en Éthiopie
étaient moins graves et présentaient une parasitémie plus faible que chez les Duffy-positifs [6, 10,
14]. Comme les personnes Duffy positives et négatives vivent côte à côte à Madagascar, en Éthiopie
et au Soudan (figure 1) [33], il a été suggéré que les infections se transmettaient dans les deux sens
entre les personnes Duffy positives et négatives. On a supposé qu'une sélection des érythrocytes
Duffy négatifs aurait lieu dans des circonstances où les moustiques infectés par P. vivax se
nourrissent constamment de personnes Duffy positives. Il s'est avéré que ce n'était pas le cas, car P.
vivax a été signalé dans des populations Duffy-négatives dans de nombreux endroits en Afrique
(Kenya, Mali et Cameroun) (figure 1 et tableau 1), où la population prédominante est Duffy-négative
[5, 11, 19, 20, 33].

À Bandiagara, au Mali, une étude longitudinale a révélé qu'environ 2 % des enfants étaient infectés
par P. vivax, et qu'ils étaient tous Duffy-négatifs [20]. Tous étaient asymptomatiques, bien qu'une
anémie ait été observée chez certains enfants, qui pourrait être due à l'infection par P. vivax [20].
Vingt-sept patients infectés par P. vivax et Duffy-négatifs ont présenté de la fièvre à l'hôpital du
district de Dschang au Cameroun [19] (Tableau 1). Dschang est situé à 1400 mètres au-dessus du
niveau de la mer avec des températures annuelles de 20,5 ± 6°C, ce qui n'est peut-être pas la
température idéale pour le développement de P. falciparum chez les moustiques, mais semble
convenir au développement de P. vivax. À Madagascar [6] et en Éthiopie [10], certains patients
présentaient des symptômes de paludisme ; cependant, un plus grand nombre de cas
symptomatiques a été observé à Dschang. Il est possible que P. vivax soit plus grave à Dschang en
raison des mutations du parasite qui s'y trouvent ou est-ce parce que les patients ont été prélevés
dans une large population de P. vivax asymptomatique dans la communauté ?

Interactions mérozoïte-érythrocyte

En 1995, la base moléculaire de la négativité de Duffy a été identifiée comme une mutation
ponctuelle unique dans le site de liaison de GATA1, un facteur de transcription érythroïde qui se lie
en amont de la région codant l'antigène de Duffy [34]. En raison de cette mutation, les érythrocytes
n'expriment pas l'antigène Duffy à leur surface et donc leur réfractaire à l'infection par P. vivax et P.
knowlesi [24, 25]. Les ligands de P. vivax responsables de l'invasion des érythrocytes Duffy négatifs
ne sont pas connus. On trouve de multiples ligands sur les mérozoïtes de Plasmodium, composés de
deux familles : Les protéines de liaison Duffy (DBP) et les protéines de liaison des réticulocytes (RBP)
(Tableau 2). Les protéines de liaison Duffy ont été découvertes pour la première fois chez P.
falciparum (35), puis chez P. knowlesi (36), et enfin chez P. vivax (37). Plasmodium knowlesi possède
trois ligands DBP (DBP α, β et γ). Seul DBPα, localisé dans les micronèmes, se lie aux érythrocytes
humains et nécessite l'antigène Duffy pour se lier [36, 38, 39]. Les mérozoïtes Plasmodium knowlesi
se fixent aux érythrocytes Duffy négatifs et se réorientent apicalement, mais ne peuvent pas envahir
les érythrocytes [40]. La microscopie électronique à transmission a révélé que les mérozoïtes restent
à une certaine distance des érythrocytes Duffy négatifs, avec des brins s'étendant vers l'érythrocyte,
mais la formation de jonction ne se produit pas [40]. Le DBP1 de P. vivax sur toute sa longueur

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ainsi que le domaine de liaison recombinant Duffy (région II) de la DBP1, se lie fortement à l'antigène
Duffy. Cette interaction particulière est cruciale pour l'entrée du mérozoïte de P. vivax et pour une
invasion réussie dans les érythrocytes [14, 37, 41] (Tableau 2). Cependant, la protéine DBP1
complète ou le domaine de la région II ne se lie pas aux érythrocytes Duffy négatifs [14, 37, 41] et
pour cette raison, P. vivax ne pourrait pas infecter les Africains Duffy négatifs.

Plusieurs mutations ont été identifiées dans le domaine de liaison de la région II du DBP1 de P. vivax
à partir d'érythrocytes positifs pour Duffy à Madagascar et d'érythrocytes négatifs pour Duffy en
Éthiopie [14, 29]. Aucune des séquences de DBP1 mutées ne se lie aux érythrocytes Duffy-négatifs
[14]. Dans l'étude de Madagascar, la duplication de la DBP1 chez P. vivax a été identifiée pour la
première fois dans des érythrocytes Duffy positifs et les duplications étaient identiques et en tandem
[29]. Plus tard, la duplication du DBP1 a également été identifiée dans l'ouest de la Thaïlande, l'ouest
du Cambodge et la Papouasie, en Indonésie (42). Une autre variante du DBP1 a été identifiée au
Cambodge, en Éthiopie et au Brésil (43). De même, la duplication de DBPα, le ligand des érythrocytes
humains, a été observée chez P. knowlesi lorsque les parasites ont été adaptés pour se développer
dans les érythrocytes humains (44). Il est intéressant de noter que l'expansion du nombre de copies
de DBP1 était plus prononcée dans les échantillons de P. vivax (trois et huit copies) provenant
d'érythrocytes Duffy-négatifs d'Éthiopie. Cependant, l'importance de cette expansion chez P. vivax
pour l'invasion des érythrocytes Duffy-négatifs n'a pas encore été déterminée [14]. Sur la base de ce
résultat, nous avons spéculé qu'il pourrait y avoir une fuite de l'expression de l'antigène Duffy dans
les érythrocytes Duffy-négatifs qui auraient pu être sélectionnés pour plus de copies de DBP1.
D'autres données sont nécessaires pour déterminer si l'infection par P. vivax dans les érythrocytes
Duffy négatifs de diverses régions a plus de copies de DBP1 que dans les érythrocytes Duffy positifs
de la même région.
Exposition de l'antigène Duffy à P. vivax sur les érythrocytes

Il est intéressant de noter que le DBP1 Région II, exprimé sur les surfaces des cellules COS, se lie à
tous les érythrocytes âgés [41]. De manière significative, Choe et al. ont découvert que la sulfatation
de la tyrosine 41 dans la région N-terminale de l'antigène Duffy est essentielle pour la liaison de la
DBP1 aux érythrocytes [45]. La liaison des cellules COS exprimant la DBP-1 aux érythrocytes a été
bloquée par la séquence de l'antigène Duffy de type sauvage, mais pas par une séquence mutée (de
la tyrosine 41 à la phénylalanine) qui ne présentait pas de sulfatation de la tyrosine 41 [45]. Par la
suite, au moins trois études indépendantes ont montré une plus grande affinité de liaison de la
région II de la DBP1 soluble recombinante avec les réticulocytes par rapport aux érythrocytes [46-
48]. Cependant, les cellules COS exprimant la région II de la DBP1 se lient à tous les érythrocytes
âgés, ce qui suggère que l'expression de la DBP1 à la surface des cellules multimériques a surmonté
la faible affinité de liaison du monomère à tous les érythrocytes âgés. Ainsi, l'avidité du ligand serait
plus forte sur les réticulocytes que sur les érythrocytes [46-48] ? La liaison de la région II de la DBP1
soluble est monomérique, alors que la région II de la DBP1 a de multiples ligands sur les cellules COS
et à l'extrémité apicale des mérozoïtes, et de multiples récepteurs sur les érythrocytes qui peuvent
compenser la liaison de faible affinité. La plus grande liaison des protéines solubles de la région II de
la DBP1 aux réticulocytes [46-48] suggère que les ligands à copie unique se lient plus fortement aux
réticulocytes. Une autre explication pourrait être la perte d'expression (par exemple, coupure par
une sulfatase) ou le masquage de la sulfatation au niveau du domaine de la tyrosine sur les
érythrocytes matures par la liaison d'une molécule chargée positivement. En outre, il a été constaté
que la liaison des anticorps monoclonaux spécifiques de la partie N-terminale de l'antigène Duffy
diminue à mesure que les érythrocytes mûrissent, y compris les anticorps spécifiques de Fya et Fyb
[48]. Cela peut refléter

Gunalan et al. page 4

Tendances Parasitol . Manuscrit de l'auteur ; disponible dans PMC 2019 mai 01.

Manuscrit de l'auteurManuscrit de l'auteurManuscrit de l'auteurManuscrit de l'auteur

la coupure de la protéase ou le masquage de la partie N-terminale de l'antigène Duffy. En outre, on a

constaté une baisse de la liaison à l'antigène Duffy par les anticorps spécifiques de Fy3 qui
reconnaissent la boucle entre les domaines transmembranaires 6 et 7 [48]. Il est possible que
certains antigènes de Duffy soient perdus lors de la maturation des réticulocytes pour faire mûrir les
érythrocytes ou masqués par d'autres molécules érythrocytaires. Cependant, les antigènes de Duffy
peuvent être détectés sur des érythrocytes matures à l'aide d'anticorps spécifiques de Fya et Fyb.
Peut-être que l'exposition de l'antigène de Duffy au parasite au stade immature contribue à
l'incapacité de cultiver P. vivax in vitro dans les érythrocytes matures.

Un autre ligand de la famille Duffy

L'assemblage de novo du génome d'un isolat de P. vivax provenant du Cambodge a permis

d'identifier la protéine de liaison érythrocytaire (EBP/DBP2), qui possède un domaine de liaison
Duffy conservé et un domaine riche en cystéine C-terminale avant le domaine transmembranaire
[49]. Le domaine de liaison Duffy de l'EBP se lie aux érythrocytes Duffy positifs et Duffy négatifs à un
niveau très faible [14]. Cependant, une étude de Ntumngia et al. a montré que l'EBP/DBP2 se lie
préférentiellement aux érythrocytes

Lignée cellulaire de type fibroblaste de mammifère qui exprime le ligand du parasite à sa surface
pour lier les érythrocytes.
Expansion du nombre de copies de la DBP1 L'expansion du nombre de copies de la protéine de
liaison de Duffy 1 (DBP1) peut jouer un rôle dans l'invasion par P. vivax d'érythrocytes Duffy négatifs,
bien que des duplications se produisent également dans les pays (par exemple, en Asie du Sud-Est)
où la Duffy négative n'existe pas.

Antigène du groupe sanguin de Duffy (Duffy-antigen) L'antigène du groupe sanguin de Duffy est une
protéine qui est exprimée à la surface des érythrocytes dans les populations Duffy-positives. C'est le
récepteur des érythrocytes pour l'invasion de P. vivax.

Duffy-négatif Le site de liaison du facteur de transcription GATA 1 sur les érythrocytes Duffy-négatifs
en amont du codon de départ du gène de l'antigène Duffy présente une mutation ponctuelle qui
résiste à la liaison GATA 1. Par conséquent, l'expression de l'antigène Duffy est absente à la surface
des érythrocytes. Cette mutation se produit en Afrique et en Papouasie-Nouvelle-Guinée.

Formation de la jonction Liaison étroite du parasite à l'érythrocyte qui dépend des protéines AMA1
et RON 2 et qui conduit à l'entrée de l'érythrocyte dans une vacuole formée par la membrane de
l'érythrocyte.

Fuite d'expression Le facteur de transcription GATA1 n'a pas pu se lier au gène de l'antigène Duffy en
raison d'une mutation au niveau de la région du promoteur et, par conséquent, l'antigène Duffy au
niveau de la protéine n'est pas détectable par les anticorps dirigés contre lui. Cependant, une faible
expression de l'antigène Duffy pourrait encore être possible.

Ligands Molécules parasites qui se lient aux récepteurs des érythrocytes. La DBP1 est un ligand
important pour P. vivax. La DBP2 (EBP) est structurellement similaire à la DPB1 mais se lie à un
récepteur érythrocytaire différent.

Mérozoïte Dans les infections au stade sanguin, les mérozoïtes sont la forme du parasite qui envahit
les érythrocytes. Après l'invasion, les mérozoïtes se développent en anneaux, en trophozoïte et en
parasite au stade de schizonte. La DBP est un ligand exprimé à l'extrémité apicale des mérozoïtes et
interagit avec les antigènes de Duffy sur l'érythrocyte pendant l'invasion.

Récepteurs Molécules de l'érythrocyte auxquelles les ligands du parasite se lient pour l'invasion. Le
groupe sanguin de Duffy est le récepteur de la DBP1.

Réticulocytes Les réticulocytes sont le stade immature des érythrocytes. Les réticulocytes
contiennent de l'ARN résiduel mais pas le noyau. P. vivax envahit préférentiellement les
réticulocytes par rapport aux érythrocytes matures.

Gunalan et al. page 8