Chapitre : Apoptose ou mort cellulaire programmée et

Métamorphose
I- Apoptose ou mort cellulaire programmée
La mort cellulaire a été mise en évidence tardivement. A l'heure actuelle, c'est un
processus obligatoire à toutes cellules Eucaryotes et organismes pluricellulaires.Cette M.C.P.
(Mort C8ellulaire Programmée) est responsable de l'hémostase cellulaire qui apparaît dès le
début de la vie d'un individu.
L’apoptose est une mort cellulaire physiologique impliquée dans le développement des
organismes pluricellulaires et la régulation du nombre de cellules utiles. Elle est aussi
impliquée dans quelques pathologies : cancers (perte du verrou apoptotique), maladie
d'Alzheimer (atteinte u système cérébral), maladie de Huntington, S.I.D.A., ...

1. Définition de la mort cellulaire programmée (M.C.P.)

Processus « cellulaire actif » qui atteint son paroxysme lors de la M.C.P. Cette M.C.P.
peut se produire suite à des signaux issus du développement ou de l'environnement ou encore
en réponses à des liaisons physiologiques décelées par le réseau de surveillance interne de
l'organisme (système immunitaire).
2. Principales cellules qui subissent la M.C.P.
Les principales cellules qui subissent la M.C.P. sont :
 Cellules nuisibles :En priorité : les Lymphocytes T auto réactifs qui agissent
contre le soi (si persistance = pathologie auto-immune), les cellules à ADN
muté, les cellules qui abritent des agents pathogènes.
 Cellules « inutiles » :Par exemple les neuroblastes au cours de la vie
embryonnaire (neurones en excès, précurseurs des neurones). Seuls les
neuroblastes ayant déjà établis des connexions nerveuses persistent. Aussi : les
cellules de la palmure interdigitale (aucune utilité chez l'Homme), les canaux
de Müller chez les hommes. Lors des traitements de cancers par
chimiothérapie, les molécules agissent en provoquant des liaisons cellulaires
qui vont déclencher la mort cellulaire par M.C.P.
3. Différents type de M .C.P. (Apoptose – Nécrose).
Il existe deux voies principales par lesquelles les cellules meurent : voie accidentelle =
Nécrose et voie programmée = suicide actif dont le principal mécanisme est l'Apoptose.

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3.1. Nécrose
La nécrose se produit quand la cellule reçoit, ou subit une agression structurale ou
chimique dont elle ne peut pas se remettre. Ex: ischémie (= manque d'oxygène), température
extrême, traumatisme physique,...
Globalement la cellule se désagrège et est digérée par ces propres enzymes
(autodigestion). Il y a alors une pénétration massive d'eau dans la cellule. Les cellules
gonflent, les organites vont éclater. Ce qui libère les enzymes lytiques, les lysosomes et les
peroxysomes entraînant une la digestion de la cellule et donc sa lyse. Il y a alors une forte
inflammation locale ; ses molécules mobilisent les cellules phagocytaires qui vont nettoyer la
zone nécrosée. La nécrose s'étend à cause de la présence de phagocytes.
3.2. Apoptose
Ici la cellule se condense sur elle-même. La chronologie est très reproductible ici. Ce qui
permet d'établir que ce phénomène est régulé et qui provient de la cellule. Premier phénomène
: modifications des jonctions cellulaires, elles se rompent (pour les tissus).
Alors la cellule se recroqueville, se condense sur elle-même. Ce qui entraîne une perte de
l'asymétrie des membranes. Le Phosphatydyl Sérine (marqueur membrane) se retrouve en
même quantité sur les deux feuillets alors que normalement il n'y en a que sur le feuillet
interne. La cellule éclate sous forme de vésicules composées de débris cellulaires appelés
"corps apoptotiques". Parallèlement on observe une hyper condensation de l'ADN.
Enfin, tous ces corps apoptotiques sont phagocytés par deux types de cellules : les
cellules voisines de l'apoptose et les macrophages circulants.
Ici il n'y a pas de réaction inflammatoire car les débris sont contenus dans des vésicules, les
cellules voisines ne sont donc pas dégradées.
3.3. Comparaison entre Nécrose et Apoptose
La nécrose ou mort cellulaire "accidentelle" :
- survient lors d'un dommage
- la membrane cellulaire éclate, et provoque une inflammation.
- Les mitochondries subissent des lésions irréversibles
L'apoptose, ou mort cellulaire programmée :
- Mort cellulaire physiologique
- Régulée.
- L'apoptose implique habituellement des cellules individuelles dans un tissu et ne
provoque pas l'inflammation

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 De plus, on note une translocation de la phosphatidyl sérine de la face interne à la face
externe de la membrane plasmique entrainant une perte de l’asymétrie membranaire d’où
reconnaissance par les phagocytes…

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Nécrose versus apoptose

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4. Aspects cellulaires morphologiques au cours de l’apoptose

Bourgeonnement de la membrane plasmique

et formation des corps apoptotiques

Phagocytose des corps apoptotiques

Cellule macrophagique

Cellule en apoptose

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5. Rôles physiologiques de l’apoptose
Parmi les rôles physiologiques de l’apoptose on retrouve par exemple :
-Morphogenèse des doigts chez les vertébrés terrestres par élimination des cellules de
l'espace interdigital existant au début del'embryogenèse.
- Elimination les neurones qui n'ont pas effectué de connexion avecleur cible
- Sélection du répertoire immunitaire par élimination deslymphocytes autoréactifs ou
dysfonctionnels au cours de lamaturation thymique, par exemple.
5.1. Rôles physiologiques de l’apoptose au cours du développement

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5.2. Rôles physiologiques de l’apoptose au cours de la différentiation du système
immunitaire

5.3. Rôles physiologiques de l’apoptose au cours du contrôle de l’homéostasie tissulaire

99,9% des cellules produites au cours de la vie d’un être humain meurent par apoptose
; D’où : autant de cellules produites par mitose que de cellules qui meurent par apoptose

5.4. Rôles physiologiques de l’apoptose au cours de l’homéostasie cellulaire et réponse

immunitaire

Mitose

Apoptose

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5.5. Rôles physiologiques de l’apoptose au cours de la défense immunitaire

5.6. Rôles physiologiques de l’apoptose au cours de la défense contre le cancer

6. Signalisation et déclenchement de l’apoptose

La mort cellulaire programmée par apoptose est déclenché suite à un stress, une atteinte de
l’ADN et divers signaux apoptotiques….

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7. Gènes impliqués dans l'apoptose

L’approche génétique chez Caenorhabditiselegans(Prix Nobel de médecine 2002 (Sydney

Brenner, John Sulston, Robert Horvitz) a été utilisé comme modèle d’étude de l’apoptose.
Chez ce ver de 1mm de longueur, 1090 cellules produites dont 131 meurent au cours du
développement. Qui fut le premier génome animal séquencé en totalité (1Mpb, 15-20 mille
gènes).

Elle a permis l’identification de 11 gènes régulateurs clés de l’apoptose (ced :

Caenorhabditiselegansdeathgenes) qui représentent les gènes de suicide cellulaire : ced-3,
ced-4 et ced-9.
Cette approche a permis de montrer que les produits des gènes ced-3 et ced-4 sont
nécessaires au déroulement du processus de mort cellulaire observé au cours du
développement. Le produit du gène ced-9 est au contraire capable de le bloquer.

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Ced-9 est l'homologue de l'oncogène bcl-2 chez les mammifères. Inhibent l'apoptose
Ced-3 est l'homologue d'une famille de gènes de protéases à cystéine, appelées caspases.
Ced-4, dont l'homologue mammalien est Apaf-1, lie et active la protéine Ced-3

Chez les mammifères de nombreux autres gènes ont été décrits comme ayant une
action positive ou négative sur l'apoptose. Certains de ces gènes sont connus pour être
impliqués dans le contrôle de la prolifération cellulaire (ex : E2F, Rb...), ce qui est en accord
avec l'idée que la mort par apoptose permet de compenser une multiplication cellulaire
ectopique et qu'elle participe ainsi à la protection contre l'apparition des cancers.
Certaines protéines virales agissent comme antagonistes de protéines cellulaires
impliquées dans l'apoptose. Pour notre part, nous avons montré que l'antigène T du virus
SV40 inhibe l'apoptose induite par la protéine p53.

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8. Mécanismes moléculaires du déroulement de l’apoptose

L'apoptose débute toujours par un signal interne à la cellule (coupure dans l'ADN, stress
oxydatif, infection virale,...) Un signal externe peut-être à l'origine de l'apoptose (diminution
de facteurs de croissance, contact avec des molécules toxiques, rayonnements X, UV. Ces
signaux sont dits "pro-apoptotiques".

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 Phase d’induction : Elle résulte de l’effet de balance entre les facteurs qui favorise la
viabilité cellulaire (adhérence à la MEC, facteurs de croissance, cytokines…) et ceux
qui l’inhibent (des signaux intracellulaires de la voie P53 par exemple, certains virus,
les LTc, des radiations, molécules de chimiothérapies…)
 Phase effectrice ou pré-apoptose : Les cellules subissent une série de modifications
physiologiques qui va les engager irréversiblement vers la mort.
 Phase de dégradation : mort cellulaire ou apoptose : Les cellules présentent les
caractéristiques morphologiques de la mort (condensation de la cellule, du noyau et de
la chromatine, fragmentation du DNA en fragments oligonucléosomiques.

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8.1. Protéines impliquées dans l'apoptose
De nombreuses protéines sont impliquées dans ce mécanisme. On distingue des
protéines régulatrices et des protéines intervenant dans l'exécution de l'apoptose
8.1.1. Les protéines régulatrices
On retrouve des protéines activatrices ou pro-apoptotiques et des protéines inhibitrices
ou anti apoptotiques. Parmi cette grande diversité de protéines une famille on trouve les
protéines de la famille Bcl-2.
Ex: Bax et Bak, favorisent le relargage d'effecteurs contenus dans l'espace inter
membranaire de la mitochondrie soit en formant un pore membranaire ou en activant sa
formation. Bcl-2 semble bloquer la relargage du cytochrome C par la mitochondrie.
8.1.2. Les protéines intervenant dans l'exécution de l'apoptose
On retrouveles caspases(cystéine aspartase) qui sont des protéases spécifiques
à Cystéines active qui coupent les protides côté -COOH des Asp. Au niveau de la cellule,
elles inhibent les voies de survie cellulaire et avivent spécifiquement d'autres facteurs
favorisant la M.C.P.Les caspases (cysteinylaspartate-specificproteinase) sont des protéases de
signalisation et non de dégradation, dont l’activation est l’aboutissement de la transduction
du signal apoptotique, appelé aussi signal de mort.
Structuralement, elles forment une famille complexe :
 ¨hétéro dimères constitués de 2 grosses sous-unités et de 2 petites sous-unités,
 produites sous forme de zymogènes, leur activation est soit auto catalytique (Caspases
initiatrices numérotées de 8 à 10) ou soit par une Caspases (Caspase effectrices),
 s'activent en cascade avec des ciblages cellulaires très spécifiques.
Parmi les cibles des caspases on retrouve :
- au niveau cytoplasmique : kinases de la régulation du cycle cellulaire et de la
signalisation cellulaire, favorisant la libération des éléments de l'apoptosome par la
mitochondrie.
- au niveau de l'appareil nucléaire : clivent les protéines impliquées dans la détection et
la réparation de l'ADN muté, clivent les lamines, clivent la protéine chaperonne ICAD
de la nucléase CAD (CaspaseActivatedDnase).
Les caspases sont normalement présentes dans la cellule sous forme de précurseurs
inactifs: les procaspases. Leur activation se déroule en cascade et conduit irrémédiablement à
la mort.

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 La conversion de la procaspase en caspase active nécessite au moins deux clivages
séquentiels. Ce qui permet d’obtenir un dimère d’hétéro-dimères P20/P10. Les caspases sont
capables de s’auto-activer ou d’être activée par d’autres scaspases.Cette activation répond par
une séquence de réactions hautement régulées conduisant à l’inactivation des voies
protectrices ou de survie et l’activation des voies de destruction cellulaire
L’activité protéolytique des caspases entraine des clivages protéolytiques au niveau de
sites consensus Asp-X (X étant un acide aminé au niveau des substrats spécifiques conduisant
à des gain ou perte de fonction, à des changement de localisation ou des modifications des
interactions moléculaires.

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8.1.3. La nucléase CAD et sa protéine chaperonne ICAD
Cette enzyme est impliquée dans la dégradation de l'ADN. Cette Dnase s'active
Uniquement lorsque sa protéine chaperonne est dégradée. Son activité consiste à
hydrolyserl'ADN en fragment de 50 kpb (corps apoptotiques) puis en fragment de 200 pb
(coupure entre2 nucléosomes).
9. Voies conduisent à l'apoptose
Il existe deux voies de signalisation aboutissant à l’apoptose qui sont la voie du
récepteur de la mort FAS et voie mitochondriale de la mort.
9.1. Voie du récepteur de la mort FAS
Ce récepteur est une protéine transmembranaire comportant: un domaine
extracellulaire deliaison un FAS ligand, un domaine cytoplasmique contenant un domaine de
mort DD (deathDomain) capable, lorsqu'il est actif, d'activer les caspases.
Cette voie est parfaitement connue comme stratégie de destruction des cellules
anormales(infectées par de virus ou déviantes) par les Lymphocytes T.
Chronologie de cette voie:
1) Liaison activatrice FAS/FAS Lignd (cd 95 / cd 95L) ® fixation de la protéine
relaie FADD(FasassociatedproteinwithDeath Domain) ;
2) ce complexe active les Caspases initiatrices qui s'autolyses ;
3) cascade d'activation et d'amplification des Caspases effectrices ;
4) Mort Cellulaire induite par les Caspases.
N.B.Les cellules du cristallin etdes testicules expriment à leur surface de FAS L, ce qui les
protègent de toute réaction immunologique et donc d'inflammation qui pourrait être fatale
àces tissus. Les cellules cancéreuses produisent des leurrent :
• Fas libre sécrété qui bloque alors FasL et inhibe l'activation des Lymphocyte T,
• Récepteur fas troqué snas le domaine d'activation DD intracellulaire.

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9.2. Voie mitochondriale de la mort
La mitochondrie est un organite clef d'une voie alternative de la M.C.P. Déclenchée
par unegrande variété d'agressions toxiques.Au cours de l’apoptose, la mitochondrie libère :
- Cytochrome C
- AIF (ApoptosisInducing Factor)
- Pro caspase 2 – 3 – 9
-Smac(second mitochondria-derivedactivator of caspases) et Diablo (direct IAP
binding
protein with low pI)
-IAP: Inhibitors of apoptosis proteins (inhibiteurendogène de l’apoptose)
… Dans certains cas c’est un événement très tardif... Il existe donc plusieurs
voies de signalisation apoptotique

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Il semble que la réponse apoptotique ait lieu lors de la fixation de Bax, Bad et Bid (famille
Bcl-2) pour former un pore membranaire.Deux conséquences au niveau de la mitochondrie :
1) Relargage du Cytochrome C et de l'ATP associé avec la ProCaspase et du
Apaf-1 (ApoptoticProteaseActivating Factor – 1) : formation de l'apoptosome;

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 autoactivation de la Caspase 9et déclenchement de la cascade de caspases
effectrices.
2) Interruption de la chaîne respiratoire : fuite d'e- qui interagissent avec le
dioxygène pourformer des radicaux hydroxyles (OH*), des anions super oxydés
-O2-), du peroxyde d'hydrogène(H2O2), ... Ces composants sont
particulièrement néfastes pour la cellule car ils détériorent leslipides et donc les
membranes, perturbation de l'équilibre bioénergétique de la cellule dontla survie
est alors compromise.

9.3. Bilan des deux voies qui concourent à l'apoptose

L'apoptose est particulièrement étudiée dans les recherches en biologie. Il s'agit d'un
véritable carrefour majeur de la physiologie cellulaire. Des dérèglements ont été mis en
évidence dans des pathologies. D’autres mécanismes existent dans la cellule – MCP2
(autophagie) et MCP3 (necrosislike) – et pourraient servir de piste pour lutter contre les
cancers dans le cas de tumeurs résistantes au processus d'apoptose ou MPC-1.

10. Mécanisme de mort apoptotique

Le déclenchement de l’apoptose se fait par la :

1- Voie perforine-granzyme
2- Voie des récepteurs de moert : Fas /Fas ligand
3- Voie p53
4- Voie mitochondriale : cytochrome c

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10.1. Voie perforine-Granzyme
La perforine s’intègre dans la MP et crée un pore. Le Granzyme pénètre par ce pore et
active la cascade des caspases. Il agit comme un signal de mort

10.2. Voie des récepteurs de mort

Différents récepteurs sont impliqués dans la mort cellulaire comme

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 Le complexe DISC (Death- InducingSignalingComplex) est formé par le récepteur de
mort(Exple: FasR) contenant les domaines de mort (FADD = Fas- AssociatedDeath Domain)
et lacaspase 8, initiatrice. Ce complexe transduit un signal de mort.

DISC

11. Régulation de l’apoptose

La régulation de l’apoptose se fait grâce a des molécules pro-apoptotique et des
molécules anti apoptotique représenté dans les figures suivantes :

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La Famille de BCL2 intervient dans une balance pour la vie ou pour la mort des cellules
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Bcl2 favorise la survie cellulaire

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12. Apoptose et pathologie
Plusieurs maladies sont associées à un dérèglement du processus apoptotique comme
les maladies neuro dégénératives, maladies auto-immunes, cancer….

II. Métamorphose

La métamorphose est une période de la vie d'un animal qui correspond au passage
d'une forme larvaire à une forme juvénile ou adulte. Elle se manifeste le plus souvent par
d'importants changements (histologiques, physiologiques, comportementaux, etc.), c'est un
des stades critiques pour beaucoup d'espèces, qui peut être affecté par certains polluants
(perturbateurs endocriniens notamment).

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 Il semble exister pour chaque espèce une taille optimale à atteindre au moment de la
métamorphose pour que les chances de survie soient les meilleures 1. Quelques espèces
peuvent ajourner à l'année suivante leur métamorphose (Néoténie, par exemple chez certains
amphibiens).

La métamorphose correspond à des changements morpho-anatomiques et

physiologiques brusques et irréversibles changeant le plan d'organisation de l'individu. C'est
une phase de développement dite indirecte, caractérisée par la naissance d'une larve
autonome, incapable de reproduction sexuée, qui aboutira à l'édification d'un adulte appelé
imago (=image de l'espèce).

Les bouleversements biologiques

Les bouleversements biologiques peuvent mettre en place trois processus différents

régis par contrôle hormonal (Processus neuro-endocrinien et endocrinien) et génétique
(reprogrammation/répression/dépression génique) :

- Élaboration de tissus et d'organes nouveaux imaginaux (par exemple les ailes ou les
pattes des Insectes holométaboles)

- Lyse de tissus et d'organes larvaires (par exemple la queue des Amphibiens Anoures)

- Transformation d'organes pré-existants (par exemple remaniement de l'intestin des

Insectes ou des Amphibiens)

Conclusion
L’apoptose est un processus physiologique de la mort cellulaire chez les organismes
pluricellulaires. Il assure l’homéostasie cellulaire et tissulaire et joue un rôle important durant
le développement puisqu’il contribue fortement dans l’architecture des organes. L’apoptose
intervient aussi, de façon stratégique lors de la maturation du système immunitaire ou du
système reproducteur, entre autres.
Cette mort obéit à un programme génétique régulé. Sa survenue suit une série séquentielle
d’événements en réponse à une signalisation de mort induite par l’environnement extra ou
intracellulaire.

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