Pastorex™ Strep

60
61721 61728 61733
61726 61729 61734
61727 61732
Test d’agglutination pour le groupage des streptocoques des groupes A, B, C, D, F et G.

880999 – 2017/12

TABLE DES MATIÈRES

1. APPLICATION ......................................................................................................................................... 3

2. RÉSUMÉ ET EXPLICATION DU TEST .............................................................................................. 3

3. PRINCIPE DU TEST .............................................................................................................................. 3

4. RÉACTIFS................................................................................................................................................ 3

4.1. Description ............................................................................................................................................... 3

4.2. Stockage et conditions de manipulation .............................................................................................. 4

5. PRÉCAUTIONS D'UTILISATION ......................................................................................................... 5

5.1. Consignes d’hygiène et de sécurité ..................................................................................................... 5

5.2. Précautions d’utilisation ......................................................................................................................... 5

6. ÉCHANTILLONS ..................................................................................................................................... 5

7. PROCÉDURE .......................................................................................................................................... 5

7.1. Matériel fourni .......................................................................................................................................... 5

7.2. Matériel requis non fourni ...................................................................................................................... 5

7.3. Procédure de test .................................................................................................................................... 6

7.4. Contrôle de qualité .................................................................................................................................. 6

1 [FR]
7.5. Interprétation des résultats .................................................................................................................... 6

8. LIMITES DU TEST.................................................................................................................................. 7

9. PERFORMANCES DU TEST ............................................................................................................... 7

9.1. Etude de reproductibilité ........................................................................................................................ 7

9.2. Performances cliniques .......................................................................................................................... 8

10. RÉFÉRENCES BIBLIOGRAPHIQUES ............................................................................................... 9

2 [FR]
1. APPLICATION
Le test Pastorex™ Strep est un test d’agglutination rapide pour le groupage des streptocoques selon la classification de
Lancefield. Le test comporte des suspensions de latex spécifiques permettant d’identifier les groupes A, B, C, D, F et G.
L’identification des antigènes spécifiques de groupe par des antisérums homologues nécessite une extraction
enzymatique préalable.

2. RÉSUMÉ ET EXPLICATION DU TEST

L’identification des streptocoques repose sur la nature de l’hémolyse autour des colonies isolées sur gélose Columbia au
sang (ß, ) et sur la détection des antigènes polyosidiques présents dans la paroi cellulaire et spécifiques du groupe
streptococcique (classification de Lancefield [1]). Selon cette classification de Lancefield, les principaux sérogroupes
sont A, B, C, D, F et G. Les souches appartenant à ces sérogroupes sont généralement ß-hémolytiques, mais certaines
peuvent aussi être α-hémolytiques ou non-hémolytiques. Il est à noter que les souches d’Enterococcus et de
Streptococcus bovis appartenant au groupe B, ne sont pas ß-hémolytiques.
Certains groupes de streptocoques (groupe A, C ou G) sont systématiquement associés à des pathologies cliniques [2,
3, 4], tandis que d’autres (groupes B, D ou F) sont des organismes commensaux des muqueuses buccales, génitales ou
intestinales et ne sont pathogènes que lorsqu’ils se trouvent en dehors de leur milieu naturel [5, 6]. Les streptocoques
sont responsables de nombreuses infections, incluant les pharyngites avec ou sans complications sceptiques [11, 12],
les infections cutanées, les septicémies puerpérales [2] et les endocardites. Certaines maladies sont causées par un
groupe spécifique, telles que les rhumatismes articulaires et les glomérulonéphrites aiguës (groupe A), les infections
néonatales (septicémies, méningites) et les infections invasives chez l’adulte (groupe B) [5, 6, 14], les infections post-
opératoires (groupe F) et les septicémies associées aux injections intraveineuses de drogues (groupe G) [4]. Les
streptocoques du groupe C, hautement pathogènes chez les animaux, peuvent provoquer des infections sévères chez
les patients pédiatriques (endocardites, méningites) [3] et de l’arthrite bactérienne grave chez les patients sans facteurs
de risque [15]. Les streptocoques du groupe D sont responsables d’infections des voies urinaires et d’endocardites [13].
L’identification des streptocoques des groupes A, B, C, D, F ou G, sur la base des antigènes polysaccharidiques
spécifiques de groupe selon la classification de Lancefield [1] peut parfois s’avérer difficile:
 certaines souches possèdent les antigènes spécifiques des groupe D et G [7, 8, 9],
 certaines souches -hémolytiques présentent l’antigène du groupe C [10],
 certaines souches atypiques produisent des micro-colonies hémolytiques présentant des antigènes A, C ou G [11].
Dans la plupart des cas, l’identification rapide du groupe de streptocoques selon la classification de Lancefield, permet
d’établir un diagnostic présomptif des infections à streptocoques.
Pastorex™ Strep est un test simple nécessitant seulement du matériel de laboratoire de base, et facile à réaliser pour
permettre cette identification.

3. PRINCIPE DU TEST
Le test Pastorex™ Strep utilise une méthode simple d’extraction enzymatique. L’antigène présent dans l’extrait obtenu
est identifié à l’aide de particules de latex recouvertes d’anticorps spécifiques de groupe. Les particules de latex
s’agglutinent en présence de l’antigène homologue. En l’absence de l’antigène, elles restent en suspension homogène.

4. RÉACTIFS
4.1. Description
A) Pastorex™ Strep, code 61721 (60 tests):
Identification Description Présentation
Suspension de latex rouge sensibilisé avec des immunoglobulines 1 ml
Pastorex™ Strep A de lapin spécifiques de Streptococcus du Groupe A 1 flacon compte-gouttes
A
Latex Conservateur : 0,3 % de ProClin™ 300 et 0,005 % de sulfate de à bouchon rouge,
gentamicine prêt à l’emploi
Suspension de latex rouge sensibilisé avec des immunoglobulines 1 ml
Pastorex™ Strep B de lapin spécifiques de Streptococcus du Groupe B 1 flacon compte-gouttes
B
Latex Conservateur : 0,3 % de ProClin™ 300 et 0,005 % de sulfate de à bouchon jaune,
gentamicine prêt à l’emploi
Suspension de latex rouge sensibilisé avec des immunoglobulines 1 ml
Pastorex™ Strep C de lapin spécifique de Streptococcus du Groupe C 1 flacon compte-gouttes
C
Latex Conservateur : 0,3 % DE ProClin™ 300 et 0,005 % de sulfate de à bouchon bleu,
gentamicine prêt à l’emploi
Suspension de latex rouge sensibilisé avec des immunoglobulines 1 ml
Pastorex™ Strep D de lapin spécifiques de Streptococcus du Groupe D 1 flacon compte-gouttes
D
Latex Conservateur : 0,3 % DE ProClin™ 300 et 0,005 % de sulfate de à bouchon orange,
gentamicine prêt à l’emploi
Suspension de latex rouge sensibilisé avec des immunoglobulines 1 ml
Pastorex™ Strep F de lapin spécifiques de Streptococcus du Groupe F 1 flacon compte-gouttes
F
Latex Conservateur : 0,3 % DE ProClin™ 300 et 0,005 % de sulfate de à bouchon prune,
gentamicine prêt à l’emploi

3 [FR]
 Suspension de latex rouge sensibilisé avec des immunoglobulines 1 ml
Pastorex™ Strep G de lapin spécifiques de Streptococcus du Groupe G 1 flacon compte-gouttes
G
Latex Conservateur : 0,3 % de ProClin™ 300 et 0,005 % de sulfate de à bouchon vert,
gentamicine prêt à l’emploi
Antigène de contrôle positif polyvalent, contenant les antigènes
1 x 1,5 ml
polysaccharidiques des streptocoques des Groupes A, B, C, D, F2
Pastorex™ Strep (quantité suffisante pour
- et G
Positive control 5 tests avec chaque
Conservateur : 0,3 % de ProClin™ 300 et 0,005 % de sulfate de
suspension de latex)
gentamicine
2 flacons d’enzymes
d’extraction lyophilisées à
Pastorex™ Strep Enzyme d’extraction dans TRIS (35,8 %)
- reconstituer avec 10 ml
Extraction enzyme Conservateur : 1,43 % de Bronidox
d’eau stérile (volume
suffisant pour 30 réactions)
- Cards Cartes d’agglutination jetables (8 cercles) 4 x 15 cartes

- Sticks Bâtonnets mélangeurs jetables 3 x 125 bâtonnets

B) Pastorex™ Strep, tests de latex individuels (60 tests chacun) :

Code
Identification Description Présentation
produit
Suspension de latex rouge sensibilisé avec des
1 ml
immunoglobulines de lapin spécifiques de Streptococcus
Pastorex™ Strep A 1 flacon compte-gouttes
61726 A du Groupe A
Latex à bouchon rouge,
Conservateur : 0,3 % de ProClin™ 300 et 0,005 % de
prêt à l'emploi
sulfate de gentamicine
Suspension de latex rouge sensibilisé avec des
1 ml
immunoglobulines de lapin spécifiques de Streptococcus
Pastorex™ Strep B 1 flacon compte-gouttes
61727 B du Groupe B
Latex à bouchon jaune,
Conservateur : 0,3 % de ProClin™ 300 et 0,005 % de
prêt à l’emploi
sulfate de gentamicine
Suspension de latex rouge sensibilisé avec des
1 ml
immunoglobulines de lapin spécifiques de Streptococcus
Pastorex™ Strep C 1 flacon compte-gouttes
61732 C du Groupe C
Latex avec bouchon bleu,
Conservateur : 0,3 % de ProClin™ 300 et 0,005 % de
prêt à l'emploi
sulfate de gentamicine
Suspension de latex rouge sensibilisé avec des
1 ml
immunoglobulines de lapin spécifiques de Streptococcus
Pastorex™ Strep D 1 flacon compte-gouttes
61728 D du Groupe D
Latex à bouchon orange,
Conservateur : 0,3 % de ProClin™ 300 et 0,005 % de
prêt à l’emploi
sulfate de gentamicine
Suspension de latex rouge sensibilisé avec des
1 ml
immunoglobulines de lapin spécifiques de Streptococcus
Pastorex™ Strep F 1 flacon compte-gouttes
61733 F du Groupe F
Latex à bouchon prune,
Conservateur : 0,3 % de ProClin™ 300 et 0,005 % de
prêt à l’emploi
sulfate de gentamicine
Suspension de latex rouge sensibilisé avec des
1 ml
immunoglobulines de lapin spécifiques de Streptococcus
Pastorex™ Strep G 1 flacon compte-gouttes
61734 G du Groupe G
Latex à bouchon vert,
Conservateur : 0,3 % de ProClin™ 300 et 0,005 % de
prêt à l’emploi
sulfate de gentamicine
2 flacons d’enzymes
d’extraction lyophilisées à
Pastorex™ Strep Enzyme d’extraction dans TRIS (35,8 %)
61729 reconstituer avec 10 ml
Extraction enzyme Conservateur : 1,43 % de Bronidox
d’eau stérile (volume
suffisant pour 30 réactions)
61723 Agglutination Cards Cartes d’agglutination jetables (8 cercles) 4 x 15 cartes

4.2. Stockage et conditions de manipulation

 Les réactifs peuvent être utilisés jusqu’à la date d’expiration indiquée sur l’emballage à condition qu’ils soient
conservés à +2-8 °C et en l’absence de contamination microbienne (y compris après ouverture).
 NE PAS CONGELER LES RÉACTIFS LATEX.
 S'assurer que les bouchons des deux flacons compte-gouttes sont bien fermés afin d’éviter toute contamination
ou dessèchement des réactifs.
 Stocker les flacons de réactif latex à la verticale (dans la mousse d’origine fournie dans le coffret).

Identification Conservation (après première ouverture)

A, B, C, D, F, G, Positive control Après la première ouverture : jusqu’à la date d’expiration mentionnée sur l’emballage à +2-8 °C
Extraction enzyme Après reconstitution : 4 mois à +2-8 °C
4 [FR]
5. PRÉCAUTIONS D'UTILISATION
Uniquement pour le diagnostic in vitro réalisé par des techniciens de laboratoire, dans un environnement de laboratoire :

5.1. Consignes d’hygiène et de sécurité

 La manipulation de ce test est exclusivement réservée à un personnel qualifié formé aux procédures de
laboratoire et connaissant les risques potentiels. Porter des vêtements de protection adaptés, des gants et des
lunettes ou masque, et procéder de manière appropriée en appliquant les Bonnes Pratiques de Laboratoire.
 Éliminer tous les échantillons et le matériel utilisé pour réaliser le test comme des déchets infectieux. Les déchets
de laboratoire, chimiques ou biologiques dangereux doivent être manipulés et éliminés conformément à toutes les
réglementations locales, régionales et nationales.
 Pour connaître les recommandations liées aux risques et les précautions relatives à certains produits chimiques
contenus dans ce kit, consulter le(s) pictogramme(s) figurant sur les étiquettes et les informations fournies à la fin
de cette notice. La fiche de données de sécurité (FDS) est disponible sur www.biorad.com.

5.2. Précautions d’utilisation

5.2.1. Préparation
 Avant l’utilisation, patienter 10 minutes pour permettre aux réactifs en flacon compte-gouttes de se stabiliser à
température ambiante (18-30 °C).
 Ne pas toucher la surface réactionnelle des cartes d’agglutination.
 La solution d’enzyme d’extraction doit être reconstituée avec de l’eau distillée, en évitant toute contamination.
 Il est recommandé d’identifier les cercles de la carte avec le(s) groupe(s) de latex avant de démarrer la procédure
de groupage.
 Utiliser les bâtonnets mélangeur en plastique fournis dans le kit pour mélanger les réactifs avec les colonies
bactériennes.
 Ne pas utiliser de réactifs périmés.
 NE PAS UTILISER le kit si l’emballage des composants est endommagé.

5.2.2. Mode opératoire

 Effectuer le test à température ambiante (entre 18 et 30°C), en évitant de s’exposer à un flux d’air climatisé.
 Agiter doucement les réactifs avant chaque utilisation, puis vérifier que la suspension de latex reste homogène
avant l'utilisation.
 Pour garantir le dépôt adéquat des gouttes, tenir les flacons compte-gouttes à la verticale.
 Essuyer l‘embout du compte-gouttes du réactif afin d'obtenir des gouttes correctement calibrées.
 Changer de bâtonnet mélangeur pour chaque réaction.
 Eliminer tous les matériaux jetables utilisés dans une poubelle autoclavable ou un bac désinfectant.

6. ÉCHANTILLONS
Le test Pastorex™ Strep doit être utilisé avec des colonies de streptocoques fraîches et bien isolées sur gélose
Columbia au sang (par ex. Bio-Rad, codes 63804, 63784) ou sur gélose Columbia ANC (par ex. Bio-Rad, code 63954)
(colonies de cocci à Gram positif, catalase négative).
Le latex Pastorex™ Strep B peut également être effectué avec des colonies fraîches et bien isolées de streptocoques
supposées de groupe B isolées sur StrepBSelect™ (Bio-Rad, code 63750) [16].

7. PROCÉDURE
7.1. Matériel fourni
 Tous les composants mentionnés dans la section « Réactifs » et leurs contrôles
 Pastorex™ Strep Extraction enzyme (code 61729)
 Cartes d’agglutination jetables (code 61723)
 Etuve sèche à 37 °C (optionnel pour la préparation de l’enzyme d’extraction)

7.2. Matériel requis non fourni

 Micropipettes standard pour distribuer 40 µl et 300 µl
 Pipettes standard de 10 ml
 Öse pour le prélèvement des colonies bactériennes
 Eau distillée stérile
 Sérum physiologique stérile
 Tubes à hémolyse ou micro-tubes (1 par souche à tester)
 Minuterie
 Bac désinfectant

5 [FR]
7.3. Procédure de test
Préparation de l’extraction :
Remarque : Des études internes ont montré que le latex Pastorex™ Strep B (61727) fournit de bons résultats en termes
de spécificité et de sensibilité lorsqu’il est utilisé pour tester les colonies supposées de groupe B, qui se sont
développées sur le milieu StrepBSelect™, sans extraction enzymatique préalable.
Déposer 300 µl de suspension d’enzyme d’extraction dans un tube à hémolyse pour chaque souche isolée à tester.
 En utilisant une öse, émulsionner avec précaution 5 à 10 colonies d’une culture fraîche de streptocoques dans la
solution enzymatique de manière à obtenir une suspension homogène. Si le diamètre des colonies est inférieur à
0,5 mm, augmenter l’inoculum jusqu’à l’obtention d’un trouble visible à l’œil nu.
Incuber soit pendant 15 à 45 minutes à température ambiante (18-30°C), soit 10 à 30 minutes à 37°C.

Procédure de groupage à partir d’une gélose Columbia au sang ou gélose Columbia ANC :
 Déposer 40 µl de solution d’extrait sur chaque cercle de la carte d’agglutination.
 Agiter lentement les réactifs. En maintenant le flacon compte-gouttes à la verticale, déposer une goutte de
chacun des réactifs A, B, C, D, F et G à côté de la suspension, sur la carte d’agglutination.
 A l’aide d’un bâtonnet mélangeur, mélanger la goutte de latex avec la suspension sur toute la surface du cercle
en changeant de bâtonnet entre chaque réactif de latex.
 Agiter lentement la carte, horizontalement, pendant 1 minute maximum.
 Observer si une agglutination visible à l’œil nu se forme dans un délai d’1 minute maximum. La taille des
agglutinats et la rapidité de leur apparition dépendent de la concentration antigénique de la suspension d’extrait.

Procédure de groupage à partir d’une gélose StrepBSelect™ :

D’après les études internes, il est recommandé d’effectuer le groupage des streptocoques présumés de groupe B (GBS)
sur StrepBSelect™ avec le réactif de latex B directement sur colonies, sans extraction enzymatique préalable utilisée
dans la procédure standard :
 Agiter doucement le réactif au latex B. En maintenant le flacon compte-gouttes à la verticale, ajouter une goutte
de réactif latex B à la périphérie de la carte d’agglutination.
 A l’aide d’une öse, prélever 1 colonie bleue, présumée GBS sur StrepBSelect™.
 En utilisant l’öse, émulsionner avec précaution les colonies dans la goutte de latex de manière à obtenir une
suspension homogène, puis étaler la suspension sur toute la surface du cercle.
 Agiter lentement la carte, horizontalement, pendant 1 minute maximum.
 Observer si une agglutination visible à l’œil nu se forme dans un délai d’1 minute maximum. La taille des
agglutinats et la rapidité de leur apparition des amas dépendent de la concentration antigénique de l’extrait.

7.4. Contrôle de qualité

Les réactifs de latex doivent être parfaitement homogènes après agitation.

Contrôle des suspensions de latex :

 Déposer 1 goutte de contrôle positif (Positive control) sur chaque cercle de la carte jetable.
 Agiter délicatement les réactifs de latex. En maintenant les flacons compte-gouttes à la verticale, déposer une
goutte de chaque réactif de latex sur la carte d’agglutination en suivant les indications de distribution.
 Mélanger les réactifs de latex avec le contrôle positif (Positive control) en utilisant un bâtonnet mélangeur, en
changeant de bâtonnet entre chaque réactif de latex.
 Agiter lentement la carte pendant 1 minute et observer l’apparition d’agglutinations.
 De l’eau physiologique stérile est utilisée pour contrôler l’absence d’agglutinations non spécifiques pour chaque
réactif de latex. Pour effectuer ce test, l’eau physiologique stérile est utilisée selon le protocole pour le contrôle
positif.
 Les réactifs de latex ne doivent pas être utilisés s’ils n’agglutinent pas avec le contrôle positif ou s’ils agglutinent
de manière non spécifique avec l’eau physiologique stérile (cela s’explique par des conditions de stockage du kit
incorrectes ou à une contamination du réactif de latex).

Contrôle d’extrait d’enzyme :

L’activité de la solution enzymatique peut être contrôlée à l’aide d’une souche de Streptococcus de groupe connu.
L’extrait antigénique de cette souche doit agglutiner rapidement avec le réactif latex correspondant.

7.5. Interprétation des résultats

Réaction positive
Une réaction positive est indiquée par des agglutinats rouges sur fond vert visibles à l’œil nu. L’intensité et la vitesse
d’apparition des agglutinats dépendent de la souche testée.
Seule une agglutination franche et rapide avec une seule des six suspensions de latex permet d’identifier le groupe de la
souche testée.

Réaction négative
Une suspension brune homogène, sans agglutinats, obtenue après 1 minute d’agitation indique une réaction négative.
Ne pas conclure un résultat négatif avant 1 minute.

6 [FR]
Résultats non interprétables
Une réaction est non-interprétable si de petits agglutinats apparaissent sur un fond brun ou si une agglutination apparaît
avec plus d’un réactif latex du kit. Si une réaction douteuse de ce type se produit, il est recommandé de répéter la
procédure d’isolement des colonies.

8. LIMITES DU TEST
a) Des résultats erronés peuvent survenir si un nombre incorrect de colonies est utilisé pour l’extraction.
b) Certaines souches de Streptococcus dysgalactiae peuvent agglutiner avec le latex Strep A (code 61721).
c) De rares souches de Corynebacterium peuvent agglutiner avec le latex Strep B (code 61727). La taille des
colonies et leur morphologie de type R (Rough) permettent leur différenciation avec des colonies de
streptocoques typiques.
d) Certaines souches de Streptoccocus pneumoniae peuvent agglutiner avec le latex Strep C (code 61732). Cette
réaction croisée est due à une similarité avec l’antigène pneumococcique F [10].
e) Certaines souches d’Enterococcus (E. durans, E. avium, E. faecium et E. gallinarium) peuvent ne pas agglutiner
avec le latex Strep D (code 61728).
f) Le diagnostic final, comme tous les diagnostics de laboratoire, ne peut pas être basé sur les résultats d’un seul
test, mais sur l’ensemble des données cliniques et des résultats biochimiques, cytologiques et immunologiques.

9. PERFORMANCES DU TEST
9.1. Etude de reproductibilité
Un panel de 2 échantillons a été utilisé pour déterminer la reproductibilité et la précision du test Pastorex™ Strep. Le
panel de reproductibilité à 2 échantillons incluait 1 échantillon négatif (Streptococcus pneumoniae non-réactif avec tous
les réactifs de latex) et 1 échantillon positif comprenant des colonies de Streptococcus ou Enterococcus des groupes A,
B, C, F, G définies selon chaque réactif latex. Pour chaque échantillon à tester avec les différents latex A à G, une
extraction enzymatique doit être réalisée sur les colonies de Streptococcus correspondantes.

9.1.1. Répétabilité
Le panel de reproductibilité (N = 2) décrit ci-dessus a été testé en dix réplicats, le même jour, sur un même lot de
Pastorex™ Strep, et préparé par un même opérateur. Comme indiqué dans le tableau I, les échantillons négatifs et
positifs ont donné les mêmes résultats attendus avec les 10 réplicats.

Tableau I : Résultats de répétabilité

Répétabilité avec le test Pastorex™ Strep Échantillon négatif Échantillon positif

Réactif latex Total de Non- Total des Non-

Détection de souche Réactif Réactif
Pastorex™ Strep réplicats réactif réplicats réactif
A Streptococcus du Groupe A 10 10 0 10 0 10
B Streptococcus du Groupe B 10 10 0 10 0 10
C Streptococcus du Groupe C 10 10 0 10 0 10
D Streptococcus du Groupe D 10 10 0 10 0 10
F Streptococcus du Groupe F 10 10 0 10 0 10
G Streptococcus du Groupe G 10 10 0 10 0 10

9.1.2. Précision intermédiaire

Le panel de reproductibilité (N=2) comme décrit ci-dessus a été testé sur 20 réplicats réalisés par deux opérateurs
indépendants, avec 2 réplicats par jour durant 5 jours. Comme indiqué dans le tableau II, les échantillons négatifs et
positifs ont fourni les mêmes résultats attendus avec les 20 réplicats.

Tableau II : Résultats de la précision série par série, jour par jour et inter-opérateur

Précision série par série, jour par jour et inter-opérateur

Échantillon négatif Échantillon positif
avec le test Pastorex™ Strep
Réactif latex Total des Total des
Détection de souche Non-réactif Réactif Non-réactif Réactif
Pastorex™ Strep réplicats réplicats
A Streptococcus du Groupe A 20 20 0 20 0 20
B Streptococcus du Groupe B 20 20 0 20 0 20
C Streptococcus du Groupe C 20 20 0 20 0 20
D Streptococcus du Groupe D 20 20 0 20 0 20

7 [FR]
 F Streptococcus du Groupe F 20 20 0 20 0 20
G Streptococcus du Groupe G 20 20 0 20 0 20

9.1.3. Précision inter-lot

La précision inter-lot a été étudiée à l’aide des résultats de contrôle de qualité (sensibilité et spécificité) de trois lots de
fabrication. Les panels de souches de streptocoques et d’entérocoques ont été utilisés pour comparer les
caractéristiques de sensibilité et spécificité des réactifs latex.
La conformité de la sensibilité inter-lot des latex est mise en évidence par agglutination de niveaux d’intensité très
similaire sur trois lots, sur panels de souches positives (voir tableau III). La conformité de la spécificité inter-lot des latex
est mise en évidence par l’absence d’agglutination sur trois lots, sur souches non ciblées (voir tableau IV).

Tableau III : Résultats de la précision inter-lot avec des panels de souches attendues positives avec le réactif
latex testé

Précision inter-lot avec le test Pastorex™ Strep Intensité de l’agglutination (de 0 à 3)

Réactif de latex Détection de souche Lot 1 Lot 2 Lot 3

Streptococcus du Groupe A (souche 1) 3 3 3
A
Streptococcus du Groupe A (souche 2) 3 2,5 3
Streptococcus du Groupe B (souche 1) 3 3 3
B
Streptococcus du Groupe B (souche 2) 3 3 3
Streptococcus du Groupe C (souche 1) 2,5 2,5 2,5
C
Streptococcus du Groupe C (souche 2) 2,5 3 3
Enterococcus du Groupe D (souche 1) 3 2,5 2,5
D Enterococcus du Groupe D (souche 2) < 0,5 0,5 0,5
Enterococcus du Groupe D (souche 3) 3 3 2,5
Streptococcus du Groupe F (souche 1) 3 3 3
F
Streptococcus du Groupe F (souche 2) 3 3 2,5
Streptococcus du Groupe G (souche 1) 2,5 2 3
G
Streptococcus du Groupe G (souche 2) 2,5 3 2,5

Remarques : La mesure de l’intensité d’agglutination a été classée entre 0 et 3 (« 0 » = réaction homogène négative, « 1 » = fins
agglutinats rouges sur fond vert, « 2 » = petits agglutinats clairement visibles sur fond vert, « 3 » = nombreux agglutinats visibles sur
fond vert ; par ex. 2,5 est compris entre 2 et 3)

Tableau IV : Résultats de la précision inter-lot avec des panels de souches attendues négatives avec le réactif
latex testé

Panel de souches
Précision inter-lot avec le test Pastorex™ Strep
(Intensité d’agglutination)
Réactif latex Détection de souche Lot 1 Lot 2 Lot 3
Streptococcus du Groupe A (souche 1) 0 0 0
B, C, D, F, G
Streptococcus du Groupe A (souche 2) 0 0 0
Streptococcus du Groupe B (souche 1) 0 0 0
A, C, D, F, G
Streptococcus du Groupe B (souche 2) 0 0 0
Streptococcus du Groupe C (souche 1) 0 0 0
A, B, D, F, G
Streptococcus du Groupe C (souche 2) 0 0 0
Enterococcus du Groupe D (souche 1) 0 0 0
A, B, C, F, G Enterococcus du Groupe D (souche 2) 0 0 0
Enterococcus du Groupe D (souche 3) 0 0 0
Streptococcus du Groupe F (souche 1) 0 0 0
A, B, C, D, G
Streptococcus du Groupe F (souche 2) 0 0 0
Streptococcus du Groupe G (souche 1) 0 0 0
A, B, C, D, F
Streptococcus du Groupe G (souche 2) 0 0 0

9.2. Performances cliniques

9.2.1. Spécificité
La spécificité testée sur 55 souches, telles que Streptococcus mitis (N=1), Streptococcus pneumoniae (N=7),
Streptococcus viridans (N=6), streptocoques buccaux (N=16), Aerococcus viridans (N=1), Listeria monocytogenes
(N=2), Gardnerella vaginalis (N=1) et Corynebacterium (N=21), est de 100 % (55/55) avec les réactifs latex Strep A, D, F
et G, 98,2 % avec le latex Strep B et 90,9 % avec le latex Strep C, démontrant une réactivité non-spécifique. Un
résultat faux-positif a été obtenu avec le latex Strep B et la souche de Corynebacterium (mais la taille/l’aspect de la
colonie était différent(e) de celle/celui des streptocoques) et cinq résultats faux-positifs ont été obtenus avec le latex
Strep C et les souches de Streptococcus pneumoniae (en raison de la réaction croisée commune avec l’antigène
pneumococcique F).

8 [FR]
Tableau V : Spécificité sur les colonies de la culture bactérienne
Nombre de
Latex Pastorex™ Nombre de
Détection de souche souches non- Spécificité (%)
Strep souches testées
réactives
A Streptococcus du Groupe A 55 55 100
B Streptococcus du Groupe B 55 54 (**) 98,2
C Streptococcus du Groupe C 55 50 (*) 90,9
D Streptococcus du Groupe D 55 55 100
F Streptococcus du Groupe F 55 55 100
G Streptococcus du Groupe G 55 55 100

Remarques : (*) Fausse réactivité de 5 souches de S. pneumoniae sur 7 avec le réactif latex C, due à la réaction croisée commune
avec l’antigène pneumococcique F [10].
(**) Fausse réactivité d’1 souche de Corynebacterium sur 21 testées avec du latex B, mais la taille/l’aspect de la colonie était
différent(e) de celle/celui des streptocoques.

9.2.2. Sensibilité
Comme indiqué dans le tableau VI, la sensibilité, testée sur 162 souches (2 souches ont été exclues), est de 100% avec
les latex A, B, C, F et G, et de 88,9% (24/27) avec le latex D en raison de la non-réactivité avec trois souches
d’entérocoques (E. durans, E. avium et E. gallinarium). Chaque souche de streptocoques a été testée avec les 6 réactifs
latex, aucune réaction croisée n’a été démontrée avec les réactifs latex non spécifiques.
Les 164 souches testées avec le test Pastorex™ Strep étaient des streptocoques des Groupes A (N = 67), B (N = 41), C (N
= 9), D (N = 29) incluant Enterococcus durans, Enterococcus casseliflavus, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium,
Enterococcus avium, Enterococcus gallinarium et Streptococcus bovis, F (N = 4) et G (N = 14).

Tableau IV : Sensibilité sur colonies bactériennes

Nombre de Nombre de
Latex Pastorex™
Détection de souche souches souches Sensibilité (%)
Strep
testées réactives
A Streptococcus du Groupe A 67 67 100
B Streptococcus Groupe du B 41 41 100
C Streptococcus du Groupe C 9 9 100
(*)
D Streptococcus Groupe du D 27 24 88,9
F Streptococcus du Groupe F 4 4 100
G Streptococcus du Groupe G 14 14 100

Remarques : (*) Cinq souches (1 E. durans; 1 E. avium; 1 E. gallinarium; 1 S. bovis et 1 E. faecium) sur les 29 souches testées ont été
classées comme non-réactives au Latex D. Les deux dernières souches (S. bovis et E. faecium) ont été exclues car elles étaient
également non-réactives avec le test de comparaison de référence pour finalement conduire à 3 faux-négatifs sur les 27 souches
testées (spécificité de 88,9 %).

9.3. Réaction croisée

Voir le chapitre 9.2.1 Spécificité.

9.4. Effet crochet

Le nombre de colonies à tester ne doit pas dépasser 10 à 15 (permettant d’obtenir des résultats exacts d’après l’étude
de robustesse), ce qui rend non pertinent l’effet crochet avec le test Pastorex™ Strep.

10. RÉFÉRENCES BIBLIOGRAPHIQUES

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10 [FR]
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