USTHB, FSB, L3 Parasitologie 2023-2024 Virologie appliquée et médicale

TD n° 03: Méthodes directes (analyse de protéines partie 2).

Exercice n° 01

Un agent d’élevage avicole présentant une fièvre supérieure à 39°C, toux et céphalée, décide
de se présenter chez le médecin pour un examen médical. Ce dernier suspecte une grippe
autre que la grippe saisonnière et décide de lui effectuer un prélèvement pour réaliser un
diagnostic du virus de l’influenza par immunofluorescence.

1. Quel type de prélèvement est recommandé ?

2. Donnez le principe de la méthode utilisée pour effectuer le diagnostic ? Quel type de
microscope est utilisé ?
3. Est-ce que le diagnostic biologique est systématiquement réalisé pour toutes personnes
infectées par le virus de la grippe ?
4. Quelles sont les souches zoonotiques du virus influenza qui peuvent infecter
l’homme?
5. Quelles protéines peut-on cibler pour identifier ces souches ?
6. L’échantillon prélevé a été analysé en utilisant l’anticorps anti Influenza A/H5N1
couplé à l’isothiocyanate de fluorescéine, les figures suivantes représentent les résultats
obtenus :

-Pourquoi choisir l’anticorps anti Influenza A/H5N1 ?

-Que représentent la fluorescence verte et la fluorescence orange ?
-De quel type de fluorescence s’agit-il ? Justifier votre réponse.
-Quelle conclusion peut-on tirer de ces résultats ? Quelles sont vos recommandations ?

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Exercice n° 02

Un patient a été admis à l’hôpital pour une pyélonéphrite chronique dans le contexte d’une
insuffisance rénale. Le patient avait subi quelques mois avant une transplantation rénale à
partir d’un rein provenant de son frère. Cependant, il souffre d’une douleur au niveau du
greffon rénal et une anurie. Devant ce tableau clinique, son urologue demande de réaliser un
diagnostic du virus BK par IHC qu’il suspecte de provoquer la néphropathie.

1. Quel type d’échantillon biologique est requis pour confirmer la présence de ce virus
par IHC?
2. Expliquez le principe de cette technique.
3. Quel type de microscope faut utiliser pour cette technique ?
4. Quelles sont les protéines ciblées pour la recherche du virus BK?
5. Que veut dire le système de révélation ABC ?
6. L’analyse de l’échantillon nous a permis d’avoir le profil suivant, A quoi
correspondent les couleurs observées ? - Quelle conclusion peut-on tirer ?

Exercice n° 03

La fièvre aphteuse est une maladie virale extrêmement contagieuse du bétail qui entraîne des
pertes économiques significatives. La maladie est provoquée par un virus de la famille des
Picornaviridae dont ils existent 7 génotypes: les génotypes O, A et C sont des virus
cosmopolites, les génotypes SAT1, 2 et 3 sont sud-africains et le génotype Asia est asiatique.

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Du fait de leur grande variabilité antigénique, l’immunité développée contre un génotype

donné ne protège pas contre tous les virus : un même animal peut donc être atteint par
plusieurs types de virus de fièvre aphteuse en même temps ou successivement. En effet, un
diagnostic rapide est nécessaire pour contrôler cette pathologie.

1- Quelles techniques proposez-vous pour le diagnostic de l’infection ?

L’agglutination est une des méthodes qui a montré son efficacité pour le diagnostic de la
fièvre aphteuse. Les procédés utilisés se basent sur l’utilisation d’anticorps anti VP1
conjugués aux particules de latex.

2- Justifier l’utilisation spécifique de l’antigène VP1.

Deux échantillons bovins ont été testés par cette technique en utilisant des anticorps anti
protéines VP1 des génotypes A, O et C. Les résultats obtenus sont représentés dans les figures
ci-dessous.

3- Interpréter la figure, quelle conclusion tirez-vous au sujet des échantillons A et B ?

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