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UNIVERSITE MARIEN NGOUABI

FACULTE DES SCIENCES ET TECHNIQUE


Parcours : Biologie

Compte rendu du TP de Biochimie

ETUDE DES GLUCIDES ET DES


PROTEINE

Groupe (11, 17,21)


Sous-groupe C
1-MOTONDE Dakaud Alshen G 15
2- ELE Ebinda Brice Ildevert G 11
3-BOUTAMBA Charden G 21
4-KISSALOU Yoann Styven G21
5- KIPEDI Juste Emmanuel G17
6- NKOU MBA Marie Rachelly G21

Année Académique : 2022-2023

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Table des matières
I- INTRODUCTION .................................................................................................................................. 3
I-1- But ................................................................................................................................................... 3
I-2-Principe ............................................................................................................................................. 3
I-3- Appareil et produits ......................................................................................................................... 3
a- Appareils ............................................................................................................................................ 4
I-4-Mode opératoire............................................................................................................................... 4
-La première phase ................................................................................................................................ 4
-Deuxième phase.................................................................................................................................... 4
I-5-Observation .............................................................................................................. 5
I-6-Discussion ......................................................................................................................................... 7
I-7-Interprétation ................................................................................................................................... 7
II- Dosage qualitative.......................................................................................................................... 7
1-But................................................................................................................................................... 7
3-Appareil et réactif ........................................................................................................................... 8
4-Mode et opératoire......................................................................................................................... 8
I-INTRODUCTION .................................................................................................................................. 10
Il- But ................................................................................................................................................ 10
III- Dosage quantitatif........................................................................................................................... 10
IX le principe......................................................................................................................................... 10
A-Appareil ............................................................................................................................................ 10
B-Produits............................................................................................................................................. 10
IV-Mode operation ........................................................................................................................... 10
V-Observation .................................................................................................................................. 11
VI-Resultats ...................................................................................................................................... 11
IX-Mode opératoire .............................................................................................................................. 11
Exploitation du tableau ........................................................................................................................ 12
Observation .......................................................................................................................................... 14
Interprétation....................................................................................................................................... 14
Dosages qualitatif................................................................................................................................. 15
But ........................................................................................................................................................ 15
Principe ................................................................................................................................................ 15
Produits ................................................................................................................................................ 15
Matériel................................................................................................................................................ 15

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PARTIE A ETUDE DES GLUCIDES

I- INTRODUCTION
Tout organisme vivant a besoin d’un apport important en matière organique pour son
fonctionnement. Parmi lesquelles figures les glucides qui sont des sucres généralement
synthétisés par les organismes autotrophes. Ils sont divisés en deux groupes: Les oses (sucre
simple) et osides (sucre complexe). Le glucide qui est un sucres simple et très répondu dans
l’aliment, sa consommation non contrôlé peut causer les disfonctionnements de l’organisme
pour y remédier, un dosage quantitative et qualitatif sont nécessaires d’où l’intérêt de notre
manipulation

I-1- But
Le but de cette manipulation est de déterminer la concentration de glucose dans la solution
𝑋1 𝑒𝑡 𝑋2
DOSAGE QUANTITATIVE

I-2-Principe
La méthode de Bertrand est fondée sur la réaction d’oxydo-réduction en présence d’oxydant
les groupes aldéhyde ou cétone libres d’oxyde pour former des acides. Le métal se réduit de
comme oxydant on utilise la liqueur de Fehling. Le cuivre passe de l’état bivalent a l’état
monovalent (Cu++-Cu)

I-3- Appareil et produits

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a- Appareils
 Tube a assai
 Plaque chauffante
 Pipette
 Bain marin bouillon
 Centrifugeuse

b-Produit

 Eau distillée
 Liqueur de Fehling
 Solution mère du glucose
 Solution 𝑋1 𝑒𝑡 𝑋2

I-4-Mode opératoire
Cette manipulation se fait en deux phases
 Réaliser une gamme de cinq tubes à essai

-La première phase


Nous avons versé 8ml d’eau distillée plus 2ml de la solution mère dans le première tube ; 6ml
d’eau distillée plus 4ml de la solution mère le deuxième tub e ; 4ml d’eau distillée plus 6ml de
la solution mère dans le troisième tube 2ml d’eau distillée plus 8ml de la solution mère dans
la quatrième tube et enfin 10ml de la solution mère dans la cinquième tube

-Deuxième phase
Nous avons préparé huit tubes à essai (𝑇1 ; 𝑇2 ; 𝑇3 ; 𝑇4 ; 𝑇5; 𝑋1 ; 𝑋2 ), nous avons mis en suite dans
le tube témoin 6ml d’eau distillée plus 6ml de la liqueur de Fehling, nous avons mis dans les
(𝑇1 ; 𝑇2 ; 𝑇3 ; 𝑇4 ; 𝑒𝑡 𝑇5; ) 6ml de la solution respective des (𝑇1 ; 𝑇2 ; 𝑇3 ; 𝑇4 ; 𝑒𝑡 𝑇5; ), en suite nous
avons ajouté 6mldans les tubes de la liqueur de Fehling, nous avons ensuite mis dans les tubes
𝑋1 𝑒𝑡 𝑋2 6ml de leur solution respective addition de 6ml de la solution de liqueur de Fehling,
ensuite nous avons ensuite placé les tubes (𝑇1 ; 𝑇2 ; 𝑇3 ; 𝑇4 ; 𝑒𝑡 𝑇5; et𝑋1 ; 𝑋2 ) dans un bain marré
bouillon pendant 10minutes et enfin nous avons lu à partir du spectrophotomètre les densités
optiques après refroidissement des tubes.

4
I-5-Observation

Après la sortie des tubes (𝑇1 ; 𝑇2 ; 𝑇3 ; 𝑇4 ; 𝑇5; 𝑋1 ; 𝑋2 ) dans le bain marré nous avons observé un
dépôt dans certains tubes de couleurs rouge brique pour :
-le témoin (T) pas de précipitation d’où la concentration égale à zéro
-le tube II pas de précipite visible la concentration est très faible
- le tube 𝑇2 : présence d’un petit dépôt de couleur brique la concentration augmente
- le tube ; 𝑇4 : présence d’un dépôt de couleur rouge brique plus visible que le tube 𝑇3 la
concentration est élevée
-le tube 𝑇5; l’importance de précipité rouge brique est plus volumineux que l’autre tube la
concentration est plus élevé
-le tube𝑋2 présence du précipité rouge brique mais de faible concentration
-𝑋1 augmentation de la précipitation rouge brique par rapport à 𝑋2 en plus nous avons
constaté que plus la concentration de glucose dans les tubes élevés plus la concentration
augmente
Résultats
Tableau n 1

Tubes 𝑇1 𝑇2 𝑇3 𝑇4 𝑇5

5
Solution 2ml 4ml 6ml 8ml 10ml
mère 0,5g/L
Volume de 8 ml 6ml 4ml 2ml 0
𝐻2 𝑂
Facteur de 0,2 0,4 0,6 0,8 10
dilution

Tableau n 2

Tubes T2 𝑇′1 𝑇′2 𝑇′3 𝑇′4 𝑇′5 𝑋1 𝑋2


DO 0 0,108 X 0,243 0,538 0,781 0,264 0,249
Concentration 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5

Courbes

0,9
0,8
y = 1,676x - 0,1272
0,7 R² = 0,9007
0,6
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0
0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6

𝑌 = 1,676 − 0,1272
Y=DO et X =[x1 ]
Pour x1

DO = 1,676[x1 ] –0,1272
𝐷𝑂 + 0,1272
[x1 ] =
1,676
0,264 + 0,1272
[x1 ] = = 0,23
1,676
[x1 ] = 0,23𝑔/𝑚𝑙

Pour x2

6
𝐷𝑂 + 0,1272
[x2 ] =
1,676
0,249 + 0,1272
[x2 ] = = 0,22
1,676
[x2 ] = 0,22𝑔/𝑚𝑙

Tubes T0 𝑇′1 𝑇′2 𝑇′3 𝑇′4 𝑇′5 𝑋1 𝑋2


DO 0 0,108 X 0,243 0,538 0,781 0,264 0,249
concentration 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,23 0,22

I-6-Discussion
La concentration 𝑋1 (qui est égale de 0,23𝑔/𝑚𝑙 Et la concentration𝑋2 (qui est égale
à 0,22𝑔/𝑚𝑙) il est claire que la concentration𝑋1 est supérieur à la concentration de𝑋2 . Donc
en terme de copnecntration nous retenon s que 𝑋2 est la dilution de 𝑋1

I-7-Interprétation
La courbe si dessus traduit la variation de la densité optique en fonction de la concentration
du glucide à chaque tube. Sachant que la liqueur de Fehling réagit avec les glucides et le réduit
en donnant une coloration rouge brique, plus la liqueur de Fehling rencontrera du glucose
dans la solution plus la coloration rouge brique sera intense. Ce qui explique l’intensification
de la coloration rouge brique en fonction de l’augmentation de la concentration de glucose
dans les différents tube et la non coloration tu tube témoin en rouge brique est dû à l’absence
du glucose

II- Dosage qualitative


1-But
Le but de ce dosage est de vérifier la présence du glucose dans une solution
2-Principe
Ce principe consiste à réaliser une réaction caractéristique des glucides en mettant en
présence d’un réactif de molish du glucose et l’acide sulfurique

𝐶6 𝐻10 𝑂6 𝐶6 𝐻10 𝑂3 + 3𝐻2 𝑂

7
𝐶5 𝐻10 𝑂5 𝐶5 𝐻4 𝑂2 + 3𝐻2 𝑂

3-Appareil et réactif
 Appareils
 Tube à essai
 Becher
 Pipette
 Réactif
Solution de glucose
Réaction de molochs

4-Mode et opératoire
Nous avons pipette 2ml dans la solution du glucose ensuite nous avons mis dans tube à
essai𝐴2 , nous avons versé lentement 0,5ml du réactif de molish dans 𝐴1 (𝑋1 )et 𝐴2 (glucose)

5-Observation

CONCLUSION
En somme les glucides sont parmi les molécules les plus abondantes al à surface du globe
terrestre. En effet l les sucres sont utilisée dans les industries alimentaire et biotechnologique.
Ils sont aussi utilisés par les microorganismes pour infecter les organites hôtes. Compte tenu de
leurs compositions les glucides produisent de l’énergie sous forme (d’Atp, NADH, H+). Aussi
important sont aussi important soit-il pour l´organisme des glucides représente un danger en
cas de leur consommations inconsolés pouvant entrainer une évaluation de glycémie
Que se passerai –T–il s´il n’y pas de glucose dans organisme
8
PARTIE B: ETUDE DES PROTEINES

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I-INTRODUCTION
Pour son bon fonctionnement,tout organisme vivant à besoin d'un apport en éléments
nutritionnel dont nous avons les protéines qui ne sont autre que les molécules organiques
constitue d'un enchaînement ordonné des acides aminés. Se cela elles ont une grande
compettance dans l'organisme et assure l'essentiel des fonctions de la cellules une mauvaise
quantité et qualité de ce dernier peut être à l'origine d'un mauvais fonctionnement de l'organisme
pour résoudre ce problème le dosage qualitatif était l'objet de notre manipulation quantitatif

Il- But
Déterminer la concentration de 𝑿𝟏 , 𝑿𝟐 𝒆𝒕𝑿𝟑

III- Dosage quantitatif


IX le principe de la manipulation est d'obtenir une coloration qui est proportionnelle à la
concentration en protéines, les substances ayantaux moins deux liaison peptidique donne en
présence de sulfate de cuivre et en milieu alcalin un complexe coloré bleu violet.
Appareil et produits utilisés

A-Appareil
 Tubes a essai
 la pipette
 Spectrophotometre

B-Produits
 blanc d'œuf
 eau physiologique
 reactif de Buret

IV-Mode operation
Au début de la manipulation nous avons prélevé 9 tubes a essais dont nous le avons numéroté
: (T ,T1,T2,T3,T4, X1,X2,X3)
Dans le tube témoins (T) Nous avons transvaser 1ml d'eauphysiologique plus 4ml du reactifde
burette
Dans les tubes (T1,T2,T3,T4,T5) nous avons transvaser la couleur blanc d'oeuf de volume
respective (0,2; 0,4;0,6;0,8, 1,)ml puis ajouter dans le tubes (T1,T2,T3,T4,T5) une solution
d'eau physiologique de volume respective
(0,8;0,6;0,4;0,2)ml
Dans le tube (T1,T2,T3,T4,T5) on ajoute 4ml de la solution du reactif de Buret (X1, X2, X3)
nous avons transvaser 1ml de la solution respectif de la Buret

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V-Observation

VI-Resultats
Trente minutes après nous avons observé une différence de coloration dans chaque tubes de la
manipulation suivante
Dans le tube (T)il ya eu aucun changement de coloration témoin
Dans le tubes (T,T1,T3,T4 T5) nous avons observé une différence de coloration du violet clair
au Violet sombre de façon respective a chaque tubes
Dans le tube (X1, X2, X3)il ya aucun changement de coloration
Dans les tubes (T1,T2, T3, T4, T5) la variation de l'intensité de la coloration montre la présence
des protéines dans chaque tube en fonction de la concentration de la solution contenu dans
chaque flacons

IX-Mode opératoire
Nous avons pris trois tubes T, T1,T2 dans le quel nous avons mis des différents solution dans
le tube témoins (T)nous avons transvaser 1ml d'amidon

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Tube T T1 T2 T3 T4 T5 X1 X2 X3
Solution
mere 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1 1 1
H2Ofi 1 0,8 06 0,4 0,2 0
[ ] 0 2 4 6 8 10
Reactive
de buret 4 4 4 4 4 4 4 4 4
DO 0 0,109 0,206 0,303 0,395 0,484 0,027 0,020 0,023

Titre du graphique
0,6

0,5 y = 0,4695x + 0,0177


R² = 0,9996
0,4

0,3

0,2

0,1

0
0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2

Exploitation du tableau
Y=0,4696X+0,0177
Or Y=DO
Pour[𝑋1 ]
D=0,4695[𝑋1 ]+0,177
𝐷𝑂−0,0177
[𝑋1 ]= 0,46695

0,027−0,0177
[𝑋1 ]= 0,46695

𝑋1 =0,1g/ml
Pour[𝑋2 ]
D=0,4695[𝑋2 ]+0,177
𝐷𝑂−0,0177
[𝑋2 ]=
0,46695

12
0,020−0,0177
[𝑋2 ]= 0,46695

𝑋2 =0,004g/ml
Pour[𝑋3 ]
𝐷𝑂−0,0177
[𝑋3 ]= 0,46695

0,023−0,0177
[𝑋3 ]= 0,46695

𝑋3 =0,01g/ml

Tube T T1 T2 T3 T4 T5 X1 X2 X3
Solution
mere 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1 1 1
H2Ofi 1 0,8 06 0,4 0,2 0
[ ] 0 2 4 6 8 10 0,1 0,004 0,01
Reactive
de buret 4 4 4 4 4 4 4 4 4
DO 0 0,109 0,206 0,303 0,395 0,484 0,027 0,020 0,023

La concentration de [𝑋1 ]=0,1g/ml, [𝑋2 ]=0,004 g/ml et [𝑋3 ]=0,01 g/ml montre de façons Claire
que [𝑋1 ] est superieur a [𝑋2 ] qui a son tour est superieur a [𝑋3 ]. Donc on terme de concentration
nous retenons que [𝑋3 ] est plus diluée que [𝑋2 ] qui est plus diluée que [𝑋1 ]

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Dans les tubes (T1,T2) nous avons transvaser 1ml de la solution d'albumine et 1ml de solutions
de blanc d'oeuf nous avons ajouté 1ml de NaoH dans chaque tube (T,T1,T2) puis nous avons
chauffé jusqu'à floculation après refroidissement nous avons ajouté 2 goutte de sulfure de cuivre

Observation

Interprétation
Dans le tube (T') il ya aucune coloration cela s'explique par une absence des protéines dans la
solution d'amidon
Dans les tubes (T'1 T'2) il ya une coloration rouge violacé traduisent la présence des protéines

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Dosages qualitatif

But
vérifiée la présence des protéines dans une solution blanc d'œuf et une solution d'albumine

Principe c'est de réaliser une réaction caractéristiques de liaison peptidique, celle ci donne en
alcalin en présence de sulfate de cuivre une coloration rouge violacé
Produits et Matériels

Produits
 Solution d'albumine
 Solution de blanc d'oeuf
 Solution d'amidon
 Solution de soude
 Solution de sulfate de cuivre

Matériel
 Tubes a essai plus support
 Pipette
 Pro pipette
 Bec-Bunsen
Conclusion:
En définitive les protéines sont des molécules essentielles à l'organisme elle s'y jouent un rôle
structural dans l'organisme au niveau du musculaire encore cutane mai sont également impliqué
dans des très nombreux processus tel que la réponse immunitaire le transport de l'oxygène dans
l'organisme ou encore la digestion toute foi un excet en protéines pourrait être de surcharger les
reins lorsque la voie de synthèse des protéines est saturé les acides aminés en excès sons des
aminé produisant ainsi l'amoniac

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