Nom :ADNANI FATIMA EZZAHRAE Gr:01

Date :22-03-2023

Rapport TP1 biodiversité et métabolisme secondaire

Introduction
Les micro-algues apparaissent comme une matière première originale, avec plusieurs applications
intéressantes dans de nombreux domaines. Outre une biochimie diversifiée ouvrant à de nombreux
usages.

Objectif du TP :
 L’étude de quelque micro-algues, depuis leurs isolement jusqu'à la production en
biomasse donc nous pouvons faire une valorisation d'une espèce Micro-Algue .

Les étapes de valorisation des espèces micro-algues :

1. L'identification de l'espèce
2. L'isolement de l'espèce
3. La culture de l'espèce [Milieu de culture avec des conditions favorables et spécifiques à
l'espèce]
4. Suivre la cinétique de l’espèce [ Comptage , détermination du taux de croissance, le
nombres des cellules /ml, la densité ]
5. Production de biomasse
6. Extraction [molécules Biomédicales]
1. L'identification de l'espèce

La première étape pour identifier des microalgues consiste à comprendre les groupes des
micro-algues communs , par ce qu'ils ne sont jamais isolées dans la nature, C’est pour cela
il faut identifie une espèce d’intérêt parmi le mélange pour pouvoir l’isolée en souche pure.
A partir d’un échantillon On peut identifier les différentes Micro-algues sur la base de
caractères morphologiques à l'aide de microscope et la clé de classification.

Clé de classification microscope optique

Dans notre TP on a fait l’identification de 6 echantillons
1- Chlorella : est une micro-algue verte unicellulaire de forme sphérique et d’environ 5
µm de diamètre
2- Microcystis : une cyanobactérie, unicellulaires coloniale de quelques micromètres
dépourvus de vrais paroi individuelles possèdent des vésicules remplies de gaz qui
leurs permettent de remonter en surface, sans hétérocystes.
3- Klebsordium : un genre d'algues vertes charophytes filamenteuses.
4-Nostoc : un genre de cyanobactéries de la famille des Nostocaceae, avec absence des
akinètes.
5- Anabaena : une espèce de cyanobactéries filamenteuses (anciennement appelées
algues bleues) caractérisés par la présence des akinètes .
6-Anabaena et Chlorella

2. L'isolement de l'espèce
Les cultures stériles des micro algues pour l’aquaculture peuvent être obtenues à partir de
collections spécialisées de culture. Alternativement l’isolement des souches endémiques peut
être envisagé à cause de leur capacité à se développer sous les conditions environnementales
locales. L’isolement d’espèces d’algues n’est pas simple en raison de leur petite taille et leur
association avec d’autres espèces . Plusieurs techniques de laboratoire sont disponibles pour
isoler des cellules individuelles successive sur milieu agar, séparation en utilisant des pipettes…
Dans notre TP On fait l'isolement de Microcystis par la méthode la plus simple ^quadrant^ sur
des boîtes de pétrie qui est une milieu minérale, Car le milieu minérale permet de réduire
contamination bactériennes et son équilibre chimique autorise des cultures de longue durée.
 Méthodes des quadrants
a-Diviser la bites en 4
quadrants
b-Soulever le couverle de la
boites et disposer l’inoculum
sur une petite surface au
point initial
c- Steriliser l’oes et apres
refroidissement faire des
stries serrées sur les quadrants 1 et 2
d-Steriliser l’oese et faire des stries serrées sur les quadrants 2 et 3
e-Stériliser de nouveau l’oese et faire des stries serrées sur le quadrant 4
f-Stériliser de l’oese et placer la boite à l’envers dans l’étuve

3. La culture de l'espèce
Techniques de culture d’algues :
Les algues peuvent être produites en utilisant plusieurs méthodes, s’étendant des
méthodes étroitement contrôlées de laboratoires aux méthodes moins prévisibles dans
les réservoirs d’extérieurs. La terminologie utilisée pour décrie le type de culture
d’algues inclue :
- D’intérieur /extérieur : la culture d’intérieurs permet de contrôler l’éclairage, la
température, le niveau nutritif, la contamination avec des prédateurs et des algues de
Concurrence , tandis que les systèmes de culture algales extérieur rendent très difficile
d’accroître des culture d’algues spécifiques pendant des périodes prolongées.
- ouverte/ fermée : des cultures ouvertes telles que dans les étangs, les réservoirs
découvert ( à l’intérieurs ou l’extérieurs) sont plus facilement souillées que les cultures
fermées telles que dans les tubes, des flacons, des touries, des sacs…
 - Axénique (stérile)/ Xenic : les cultures axéniques sont exemptes de tous les
organismes étrangers tels que les bactéries ; elle exige une stérilisation stricte de toute
la verrerie, le milieu de culture et les récipients pour éviter la contamination. Ces
derniers la rendent impraticable pour des opérations commerciales.
- culture en Batch, continue, semi-continue : se sont les trois types de base de la culture
de phytoplancton qui seront décrites ultérieurement.

Les conditions de croissance optimale

Temperature Presque 26°C
 La lumière 82uE.m2 s-1
 Photopériode 8h de la lumière/ 6h d’obscurité
 L’aérobie
Verrerie de volume adéquat selon la concentration, le stade de croissance, le
volume…
4. Suivre la cinétique de l’espèce
Durant cette partie on a fait deux types de dénombrement:
Utilisation de la cellule de Malassez De Helene Laguerre
But : déterminer une concentration en
cellules dans un ballon de culture de micr-oalgues.
Description : la cellule de Malassez possède
un quadrillage (fig. 1) de volume connu. Il est
composé de cases (fig. 2) qui, chacune,
possède 4 lignes et 5 colonnes
Dénombrement :
1. Faire une première mise au point à l’objectif x50 ;
2. Passez au grossissement x100 et faire la mise au
point. Le quadrillage doit être bien visible ;
3. Compter le nombre de cellules pour 5 cases.
 Utilisation de spectre électronique et mesure le DO

Ce tableau présenter les valeurs obtenues après le comptage selon

difèrent concentration de cellule et déférent temps.
 Comptage indirect

Droite de nombre des C par DO

-Taux de croissance : 𝜇 = 𝑳𝒏(𝑵𝟒−𝑵𝟑) 𝑻𝟒−𝑻𝟑

= 𝑳𝒏(𝟐𝟕𝟒−𝟐𝟏𝟗) 𝟒−𝟑
= 4 cellule/jour
-Temps de génération: TG =𝑳𝒏𝟐*𝟒 = 0,173 Jour
Conclusion
L'intérêt biotechnologique pour les micro-algues et les cyanobactéries s'est concentré sur leur
contenu en métabolites précieux qui peuvent être utilisés pour développer une large gamme
d'applications différentes dans des domaines tels que la médecine, l'industrie, l'énergie,
l'agriculture, l'alimentation et en cosmétique. L'intérêt des micro-algues pour les applications
cosmétiques est relativement récent, notre travail a pour objectifs de valoriser l'utilisation des
micro-algues dans ce domaine. Les extraits sont largement appliqués dans les industries
cosmétiques, en particulier pour les produits de soin de la peau. Il s'agit notamment des soins du
visage et de la peau (crème anti-âge, émollient, anti-irritant dans les peelings, soins
rafraîchissants, crèmes solaires) ainsi que des produits capillaires. Trois produits à base de ces
microorganismes seront testé cela va monter l'intérêt aux consommateurs à l'utilisation
d'ingrédients plus sains et plus durables.