Physiologie et

croissance bactérienne

Bactériologie – Virologie
 Objectifs pédagogiques
1- Définir la croissance bactérienne
2- Distinguer les besoins élémentaires des besoins
spécifiques
3- Décrire les facteurs influençant la croissance
bactérienne
4- Expliquer la croissance bactérienne en milieu solide et
en milieu liquide
5- Donner les applications de l’étude de la croissance
bactérienne
 1. Introduction
1.1. Définitions
•Physiologie bactérienne : ensemble des
conditions de vie des bactéries
•Nutrition : réactions permettant l’absorption des
nutriments dans l’environnement
 1. Introduction
• Croissance bactérienne
Croissance : augmentation ordonnée des
constituants bactériens ( augmentation du
nombre de cellules).

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 1. Introduction
1.2. Intérêt
•Préparation milieux de culture
•Identification bactérienne
•Etude de la sensibilité des bactéries aux antibiotiques
•Conservation souches bactériennes
•Industrie : domaines agro-alimentaires
•Stérilisation, antisepsie
2. Conditions de la croissance
bactérienne
 2. Conditions de la croissance
bactérienne
Les bactéries sont des organismes vivants
devant trouver dans l’environnement
l’ensemble des substances nécessaires à
leur énergie et à leurs synthèses cellulaires

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 Besoins constitutifs élémentaires
 Besoins constitutifs spécifiques
 Besoins constitutifs élémentaires
• Majorité des éléments de structure des bactéries =
Composés organiques
– C, H, O et N : quantités importantes

Source : H et O = Eau

Eau: représente 80 % des besoins

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 Besoins constitutifs élémentaires
Carbone: (50%) : élément constitutif essentiel
-Bactéries autotrophes : milieu inorganique

-Bactéries hétérotrophes : composés organiques

Source de carbone

CO2: principale source de carbone pour la synthèse molécules organiques complexes (Bactéries
autotrophes)
– Hydrates de carbones : composé organique ayant au moins 2 atomes de C comme unique source
de carbone (Bactéries hétérotrophes)

•Autres: soufre, phosphore, azote, ions, oligo éléments (cofacteurs)

 Besoins constitutifs élémentaires
• Source d’azote (8-15%)
–Azote moléculaire (qlq sps)
–Composés inorganiques : Nitrites, nitrates, ammoniac
–Composés organiques : Composés aminés
Autres: Eléments minéraux
–S et P, Na, Ca, Mg et K : quantité plus faible
–Co, Cu, Zn, Mn, Mo : traces (oligo-éléments)

–Soufre et Phosphore+++
o Constitution des acides nucléiques
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Besoins constitutifs spécifiques
Besoins constitutifs spécifiques
• Substances organiques non synthétisées =
Facteurs de croissance : Acides aminés,
Vitamines, Bases puriques et pyrimidiques
• Deux catégories de bactéries :

- Bactéries prototrophes : non exigeantes

- Bactéries auxotrophes : exigeantes

 Besoins constitutifs spécifiques
• Bactéries auxotrophes
Besoin de facteurs de croissance
o Bactéries prototrophes
Pas besoin de facteur de
croissance ie croissance dans un
milieu minimum

Haemophilus influenzae

Escherichia coli
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Besoins constitutifs spécifiques
Besoins énergétiques
• Origine de l’Energie :
Energie lumineuse:
- Bactéries phototrophes (photosynthèse)

- Energie chimique
- Bactéries chimiotrophes (chimiosynthèse)
Besoins constitutifs spécifiques
Besoins énergétiques
–Energie chimique : bactéries chimiotrophes
• Composés minéraux : chimiolithotrophes
• Composés organiques :
chimioorganotrophes (plupart des bactéries
d’intérêt médical)

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3. Conditions de croissance
Conditions physico-chimiques
favorables

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 Facteurs physico-chimiques
1. Température :
• Bactéries cryophiles :
Température de croissance inférieure à 20°C
(optimum = 10°C)
• Bactéries thermophiles :
T° de croissance supérieure à 40°C
• Bactéries mésophiles :
T° entre 20 et 40°C : optimum = 37°C (Bactéries
pathogènes chez l’Homme)
2. pH
•pH neutre : 6,5 – 7,5 : intérêt dans la
préparation des milieux de culture

•Bactéries acidophiles :
pH acide (bas) (Ex.: Lactobacillus)

•Bactéries alcalophiles:
pH alcalin (élevé) Ex.: Vibrions
3. Oxygène :
• Bactéries micro-aérophiles :
faible teneur en oxygène
• Bactéries anaérobies strictes :
ne peuvent se développer qu’en l’absence d’O2
• Bactéries aérobies strictes :
exigent la présence d’oxygène
• Bactéries aéro-anaérobies facultatif :
avec ou sans oxygène.
 Microaérophiles Aéro-Anaérobies Facultatif

O2 +

O2 -

Types
respiratoires

Aérobies strictes Anaérobies strictes

4.4. Pression osmotique :
liée aux concentrations en sodium
• Bactéries halophiles :
forte concentration Na cl (certains vibrions)
• Bactéries halotolérantes :
concentration moyenne en Na cl (staphylocoques)
• Bactéries non halophiles :
Faible concentration en Na cl

4.5. Autres facteurs :

• Radiations UV
• Antibactériens
4. Croissance bactérienne
 Croissance bactérienne

La croissance bactérienne est

l'accroissement ordonné de tous les
composants de la bactérie. Elle aboutit à
l'augmentation du nombre de bactéries.

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 Temps de génération d’une souche
bactérienne

Bactérie mère

Première 20min 4h
génération

Deuxième
génération

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5. Méthodes d’étude de la croissance
bactérienne

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5.1. Croissance en milieu liquide
•Se manifeste par :
-Trouble du milieu
-Voile en surface
-Culot au fond
•En milieu non renouvelé :
-Croissance limitée : épuisement du milieu
-Courbe de croissance : évolution biomasse en
fonction du temps
-Plusieurs phases : latence, acélération, croissance
exponentielle, décélération, stationnaire, déclin
 d e
a b c
Courbe de croissance bactérienne en milieu non renouvelé
a = Phase de latence : Croissance nulle
Biomasse = inoculum
b = Phase d’accélération :
Augmentation Biomasse et vitesse de
croissance
c = Phase exponentielle de croissance :
Vitesse de croissance
constante et atteint sa valeur maximale
f
temps
d = Phase de décélération :
Diminution vitesse de croissance,
Aaugmentation de la biomasse
ralentie
e = Phase stationnaire : Vitesse de
croissance nulle, Biomasse maximum
f = Phase de déclin : La biomasse
diminue; mort cellulaire
5.2. Croissance en milieu solide
• Se manifeste par :
- Un amas visible à l’œil nu
- Si 106 bactéries
- Colonie

• Caractères :
- Taille : grosse, moyenne, petite, fine
- Bords (contours): réguliers, irréguliers
- Surface : lisse, rugueuse, muqueuse
- Aspect : mate (opaque), transparent
- Pigment : rouge, jaune, bleu, vert, blanc
30
 6. Applications
6.1. En Bactériologie :
 Milieux de culture : préparation, utilisation
• Selon la consistance : milieu liquide (bouillon), milieu
solide (gélose)
• Selon la composition : milieu ordinaire (nutritif),
milieu riche ou enrichi
• Selon l’utilisation : milieu d’isolement, milieu sélectif,
milieu électif, milieu d’enrichissement, milieu
d’identification
 Applications : Milieux de culture
• Les milieux d'isolement
– Milieu solide permettant d’isoler une bactérie d’un mélange (produit
pathologique)
• Les milieux d'enrichissement
– Milieu liquide + substances favorisant la croissance du germe étudié
• Les milieux enrichis
— Favorisent la culture des bactéries exigeantes
• Les milieux électifs et sélectifs
— favorisent la culture d'une espèce ou d'un groupe d'espèces vis-à-vis d’autres
espèces
• Les milieux d'identification
– Mise en évidence de caractères biochimiques
• Les milieux de conservation
– Milieux pauvres permettant le maintien à l’état de vie ralentie, ne favorisent
pas la croissance
• Les milieux de transport
– Utilisés pour assurer la survie des micro-organismes fragiles présents dans
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les spécimens cliniques pendant leur transport
 Applications
 Détermination de la sensibilité
aux antibiotiques
• en présence de différents
antibiotiques permet de définir pour
chaque bactérie analysée un profil
de sensibilité /résistance aux
différentes molécules antibiotiques.

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 Identification bactérienne :
• Aspect des colonies (orientation),
• Choix des milieux de culture,
• Type respiratoire (selon familles)
• Etude des caractères biochimiques
• Tests de sensibilité aux antibiotiques
Applications : identification

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6.2. En Thérapeutique :
 Usage d’antibiotiques : action sur la bactérie
et sa croissance (bactériostase, bactéricidie)

6.3. En Hygiène :
stérilisation (destruction des germes) par :
chaleur, radiations (RX, UV), formol …

6.4. Autres applications :

• Conservation des souches
• Industrie alimentaire
 Applications
• À la conservation des souches
– Par le froid 2-8°C
• Ralentit le métabolisme bactérien sans tuer les microorganismes.
• Permet de conserver des cultures bactériennes pendant un court laps de
temps
– La congélation -18°C
• Aucune activité métabolique mais la plupart des cellules restent vivantes.
• Permet de décongeler la culture et de la faire croître, même après
plusieurs années.
– La lyophilisation
• Congélation rapide d’une suspension microbienne entre –54 et -72ºC en
éliminant l’eau par la création d’un vide ce qui donne une poudre
• Poudre peut être conservée pendant des années.
• Les bactéries peuvent être ranimées en tout temps par hydratation avec
un milieu nutritif.
 Conclusion
• Notions de physiologie de croissance
– Préalable à l’étude des bactéries
– Conditionne le diagnostic des infections
bactériennes
– Nombreuses applications
Questions
 Répondre par vrai ou faux
1. La plupart des bactéries pathogènes
chez l’homme sont micro-aérophiles
et thermophiles
 d e f
a b c

temps
Courbe de croissance bactérienne en milieu non renouvelé
 d e f
a b c

temps
Courbe de croissance bactérienne en milieu non renouvelé

a = Phase de latence : Croissance nulle d = Phase de décélération :

Biomasse = inoculum
b = Phase d’accélération :
Augmentation Biomasse et vitesse de
croissance
c = Phase exponentielle de croissance :
Vitesse de croissance
constante et atteint sa valeur
maximale
Diminution vitesse de croissance,
Aaugmentation de la biomasse
ralentie
e = Phase stationnaire : Vitesse de
croissance nulle, Biomasse maximum
f = Phase de déclin : La biomasse
diminue; mort cellulaire
Citer trois facteurs pouvant influencer la
croissance bactérienne

Réponse:
Température, pH, Oxygène
 Microaérophiles Aéro-Anaérobies Facultatif

O2 +

O2 -

Types
respiratoires

Aérobies strictes Anaérobies strictes

Définir les termes suivants:
Biotypes
Caractères biochimiques : Utilisation de
sucres, enzymes, métabolisme définissant
différents groupes / Bactéries même
espèce
 Indiquer la réponse juste

Les antitoxines sont :

a- Des toxines purifiées
b- Des anticorps
c- Des antigènes
 Indiquer les réponses fausses
Les anatoxines sont :
a- utilisées comme vaccins
b- des toxines détoxifiées
c- des anticorps dirigés contre les toxines
d- des toxines actives
Réponse: c, d