EXPLORATION BIOCHIMIQUE DE

L’EQUILIBRE ACIDO BASIQUE

DR BOUKROUS
PLAN
I / INTRODUCTION
II/ RAPPEL PHYSICO CHIMIQUE
III/ REGULATION DE L’EQUILIBRE
ACIDO BASIQUE
VI / LA GAZOMETRIE
V/ DESEQUILIBRE ACIDO
BASIQUE
 Le pH exprime
l’acidité ou
l’alcalinité d’un pH
milieu

Les ions H+:

H+ De l’ionisation de
molécules d’eau
Molécules libérant H+:AC

Ph =log 1 /[H+]
 Source
d’acidification

Endogène
Acides
( métabolique)
inorganiques: ac
sulfurique et ac
phosphorique

Acides Acides REIN

volatils: Fixes:
CO2
Acides
organiques: ac
lactique et ac
acétylacétique
POUMON
 Exogène
( alimentaire)
 Les fruits et les légumes fournissent des ions
Ca2+;k+;Mg2+ et Na+ qui ont un effet alcalinisant
Pourquoi la concentration en H+ est elle
étroitement régulée ?
❑Le déficit de H+ dans le LEC entraîne un efflux de H+ qui est
compensé par un influx de K+. La  de [K+]e entraîne une
dépolarisation des neurones  hyperexcitabilité et activité
électrique spontanée. Au niveau musculaire : spasmes, tétanies,
convulsions, mort par paralysie respiratoire.
❑ l’excès de H+ dans le LEC entraîne un influx de H+ qui est
compensé par un efflux de K+. L’ de [K+]e entraîne une
hyperpolarisation des neurones  hypoexcitabilité et dépression
de l’activité cérébrale (confusion, désorientation puis coma).
Le PH EST VARIABLE DANS LES DIFFERENTS FLUIDES
DANS NOTRE ORGANISME

SANG: 7,37-7,43
Sécrétion gastrique:1
Urine:4,5-8,5

Intracellulaire variable d’un tissu a un autre mais

proche de 7
Dans les tissus il y consommation
de O2 et production du CO2,
Ce CO2 est pris en charge par le
sang circulant jusqu’au poumon
ou il est expiré
Les différence de pression entre d’une part l’espace
alvéolaire et l’hématie et d’autre part le milieu intra
cellulaire et l’hématie permettent les échanges par
simple diffusion
 Transport de l’O2:
Forme dissoute: concentration très
faible (0,3ml/100ml de sang)
Forme liée a l’hémoglobine (+++)
soit 20ml/100ml de sang
Transport du CO2 dans le sang

80%-90% de CO2 sous forme de

bicarbonate
( HCO3-)
5% - 10% de CO2 sous forme dissoute
5% -10% de CO2 sous forme de composés
carbaminé
 échanges
gazeux du
Coté
tissulaire
 échanges
gazeux du
Coté
pulmonaire
 REGULATION DE
L'ÉQUILIBRE ACIDO
BASIQUE
2.
Réponse
1.
Respiratoire
Tampon
3.
Réponse
Rénale
SYSTÈME
TAMPON
Les systèmes tampons: Ce sont des mélanges
de substances en équilibre chimique
s'opposant aux variations de pH.
Un système tampon comprend généralement :

- un acide faible et sa base conjuguée.

- une base faible et son acide conjugué.
pH = pKa + log (base/acide):
c’est l’équation d’Henderson Hasselbach.
 SYSTEMES TAMPON
Tampon HCO3-/H2CO3:
C’est le tampon le plus important quantitativement dans le milieu extracellulaire. Son
pH s’exprime comme suit:
pH= pKa + log (HCO3-/c CO2 dissous)
Ce tampon est efficace pour 3 raisons:
❖ C’est un système ouvert= il ne se sature pas:
Addition d’un acide
AcH + NaHCO3 AcNa + H2O + CO2
Le CO2 sera éliminé par les poumons.
Addition d’une base BOH:
BOH + CO2+ H2O BHCO3+ H2O
La diminution du CO2 est aussitôt compensée par sa production continuelle.
❖ Le système agit en étroite collaboration avec le tampon Hb/Hemoglobinate.
❖ Ce système est sous contrôle des poumons et des reins.
 SYSTÈME TAMPON PROTEINES /
PROTEINATES

II a une action surtout comme moyen de lutte contre l'acidose.

Le pouvoir tampon des protéines est du à leurs différents groupements
constitutifs.

Les résidus d'acides aminés basiques comme l'arginine, l'omithine, la citrulline,

la lysine, l'histidine permettent de lutter contre l'acidose en fixant un proton.

Au contraire les résidus d'acide aspartique ou d'acide glutamique permettent

de lutter contre l'alcalose en libérant un proton
SYSTÈME PHOSPHATE
C’est un tampon mineur dans le liquide
extracellulaire mais il a une importance
fondamentale dans l’urine.
H2PO4- HPO42-+ H+
Il existe à 80% sous forme monoacide: HPO42-
et 20% sous forme diacide: H2PO4-
À côté de ces systèmes, il y a les tampons
osseux, qui sont lentement mobilisables mais
qui jouent un rôle majeur dans les surcharges
acides chroniques (IRC).
 SYSTÈME TAMPON
GLOBULAIRE
Ils interviennent de 2 manières:
Fixation du CO2 sur l’Hb pour former un dérivé carbaminé:
HbNH2 + CO2 ——> HbNHCOO- + H+
Les groupements imidazoles des résidus histidine sont capables de
fixer les ions H+.
C’est ainsi que: Au niveau des tissus, HbO2 va libérer l’O2 pour le
livrer aux cellules, et éponger les H+.
Au niveau des poumons, l’Hb peut être oxygénée et libérer dans le
milieu les H+.
HbO2 + H+ TISSUS HHb + O2.
poumons
Ceci permet de comprendre l’étroite interdépendance des tampons
Hbinate et HCO3-: TISSUS
CO2 + H2O + HbO2 HHb + HCO3- + O2
Poumons
POUMON
REIN
Elle est plus longue à réagir en cas de
perturbations car elle intervient en troisième
position. Cependant elle peut durer plus
longtemps et elle est très efficace de lutte aussi
bien contre l'acidose que contre l'alcalose.
Le rôle du rein sur l'équilibre acido-basique est
double :

1/ il peut réabsorber la quasi totalité

des bicarbonates filtrés, ou bien excréter ceux ci
en cas de surcharge alcaline.

2/ il peut éliminer des ions H+ en

générant des bicarbonates qui seront absorbés.
 REABSORBTION DES BICARBONATES
La cellule tubulaire proximale, riche en anhydrase carbonique, peut
synthétiser de l'acide carbonique à partir de CO2 et d‘H2O . Celui-ci
se dissocie immédiatement en protons et en bicarbonates.
L'ion H+ est échangé contre un ion Na+ de l'urine primitive laissant
le bicarbonate qui sera réabsorbé.

Dans l'urine l'ion H+ se combinera avec un bicarbonate pour former

un acide carbonique qui se dissocie immédiatement en CO2 et eau.
Ce CO2 sera réabsorbé et participera à la réaction catalysée par
l'anhydrase carbonique. On peut donc dire qu'à un bicarbonate
filtré correspond un bicarbonate réabsorbé.

Normalement plus de 90 % des bicarbonates filtrés sont

ainsi réabsorbés.

La réabsorption des bicarbonates dépend en particulier

de la pCO2 dont une élévation entraîne une réabsorption
accrue et réciproquement. C'est aussi à ce niveau qu'est
réabsorbé en totalité le potassium filtré.
 EXCRETIONS H+
Elle se déroule au niveau du tube
contourné distal où la cellule rénale,
riche ici aussi en anhydrase
carbonique, élimine un proton en
l'échangeant contre un ion sodium.
Le bicarbonate généré est ensuite
réabsorbé dans le sang.
La réabsorption du sodium est sous
le contrôle de l'aldostérone
❑l’excrétion de H⁺ sous forme d’acidité titrable
(H₂PO₄̄) :
Est un mécanisme qui extrait H⁺ fixe, produit par le
catabolisme des protéines et des phospholipides.
H⁺ est secrété dans la lumière par une H⁺-ATPase et
HCO₃̄ est réabsorbée dans le sang.
Les H+ sécrétés se combinent avec les HPO²₄̄ pour
former H₂PO₄⁻, qui est excrété comme acidité titrable.
Ce processus aboutit à une sécrétion nette de H⁺ et
une réabsorption nette du HCO₃̄ nouvellement
synthétisé.
L’excrétion de H⁺ sous forme de NH⁺₄:
Est un autre mécanisme d’excrétion du H⁺ fixe.
NH₃ est produit dans les cellules rénales à partie
de la glutamine; il diffuse vers la lumière en
descendant son gradient de concentration.
Le prélèvement
❖ Le patient au repos pour éviter les effets d'une hyperventilation
de stress.
❖ la ponction se fait au niveau d'une artère (radiale, fémorale,
humérale...).
❖ Chez le nourrisson , une ponction capillaire périphérique sera
préférée (au niveau d'un doigt, du lobe de l'oreille, ou du talon
après dilatation vasculaire par massage ou chaleur).

❑ prélèvement sûr héparine, sans introduction de bulle d'air,

homogénéisé par retournement, et maintenu en anaérobiose
stricte jusqu'à son analyse.

Le matériel le plus fréquemment utilisé est la seringue héparinée,

maintenue hermétique après ponction par un bouchon
❑ Le prélèvement sera analysé sans délai, et en cas de force
majeure, devra être maintenu au réfrigérateur à + 4°C pendant
un maximum d'une heure(seringue en verre)
 MESURE DU PH
Le système de mesure parfaitement
thermostaté à 37 C se compose:

➢ D’une électrode de
référence(calomel ou Ag/ AgCl)

➢ D’une électrode de mesure

(électrode de verre); cette électrode
est remplie d’une solution de Ph
connue et constante .
La partie active est la
membrane de verre.
➢ Du liquide de jonction .

Les valeurs normales sont de

7.4±0.02.
Limites compatibles avec la
vie: 6.8-7.8
MESURE DE LA PO2
Le principe de la mesure de la p02 est basé sur le fait qu'une
électrode soumise à un potentiel de polarisation constant (0,6
volt) fournit un courant directement proportionnel à la p02
diffusant au niveau de la surface de réaction de l'électrode. Ce
courant est produit par la réduction de l'O2 au niveau de la
cathode (fil de platine).

02 + 2H2O + 4e- ——> 4 OH-

L'alimentation en électrons à la cathode, est assurée par une
anode en argent chloruré (Ag/AgCl).
Ag——>Ag+ +1e-
Le débit d'électrons consommés est proportionnel à la pO2
présente.
L'électrode est recouverte d'une membrane de polypropylène
perméable aux gaz et à l'O2 ce qui la rend spécifique. Il faut la
changer tous les 20 à 30 jours.
Sur les nouveaux appareils, les électrodes sont jetables.
 MESURE DE LA PCO2
ELECTRODE DE SEVERINGHAUSS

La mesure de pCO2 se ramène à une mesure de pH. Par méthode

électrométrique,
on mesure les variations de pH d'une solution de bicarbonates séparée du
sang par une fine membrane en téflon (ou silicone) perméable au
CO2uniquement.
La diffusion du CO2 entraîne un abaissement du pH qui est proportionnel
à la quantité de CO2 présent. L'électrode est composée d'une électrode
de mesure de pH en verre et d'une électrode de référence miniaturisée.
Le CO2 de l'échantillon diffuse à travers la membrane puis se dissout
dans l'électrolyte.
CO2+H2O ——> H2C03
H2CO3 ——> H+ + HCO3-
L'augmentation de H+ fournit un potentiel variant logarithmique ment
avec laPco2.
3/ Mesure des bicarbonates:

C'est la concentration des ions HCO3-, en mmol/l de

plasma qui est déduite par le calcul de la mesure de
pCO2, et du pH à l'aide de l'équation d'Henderson
Hasselbach.
Valeurs normales : 22 à 27 mmol/l.
Différentes méthodes, par méthode enzymologique ou
potentiométrie sur automates effectuant l'ionogramme
permettent de doser directement les bicarbonates.
DESEQUILIBRE
ACIDO BASIQUE
Diagramme de Davenport
 Stratégie d’interprétation de la
gazométrie

1/ Regarder

pH
 < 7,35 7,35 – 7,45
 > 7,45
Acidémie Normal Alcalémie
2/ Regarder

La PaCO2

< 35 mmHg
35 – 45mmHg  > 45 mmHg
Hyperventilation Normal Hypoventilation
alvéolaire alvéolaire
Alcalose resp. Acidose resp.

Si pH  et PaCO2  Acidémie due à une acidose respiratoire

Si pH  et PaCO2  Alcalémie due à une alcalose respiratoire
3/ Regarder

Les HCO3-

 22 mmol/l 22 – 26 mmol/l  27 mmol/l

Normal
Acidose Alcalose
métabolique métabolique

Si pH  et HCO3-  Acidémie dûe à une acidose métabolique

Si pH  et HCO3-  Alcalémie dûe à une alcalose métabolique
acidose métabolique

Acidose
métabolique

pH = 6,1 + log HCO3-

PCO2
acidose Acidose
Métabolique
compensée
En acidose
métabolique
calculez toujours
le trou anionique
( anion gap )
acidose respiratoire

Acidose
Respiratoire
compensée

pH = 6,1 + log HCO3-

PCO2
acidose Acidose
respiratoire
étiologies

1/Diminution des mouvements de la cage thoracique

une atteinte de la paroi par des traumatismes ;
-une atteinte nerveuse ou musculaire par dystrophies musculaires,
myasthénie, poliomyélite
2/Diminution de la surface alvéolaire disponible:
-les broncho-pneumopathies chroniques obstructives par emphysème ou
asthme
- les broncho-pneumopathies restrictives par fibrose pleurale ou
pulmonaire, pneumothorax ou œdème aigu du poumon ;
- la mucoviscidose dans laquelle est retrouvée une dilatation des
bronches avec hypersécrétion bronchique
3/Hypoventilation par inhibition des centres
respiratoires
un accident vasculaire cérébral ;
- une hypotension intracrânienne ;
- une atteinte bulbaire par anesthésiques, morphiniques,
tranquillisants, barbituriques ou alcool.
4/Air vicié par augmentation du CO₂ (caves,
grottes...)
Insuffisance respiratoire aiguë avec hypoxémie
aiguë et détresse respiratoire
(cause toxique, médicamenteuse, traumatique).
Il est important de distinguer le caractère aigu ou chronique des
acidoses respiratoires
alcalose métabolique

Alcalose
métabolique

pH = 6,1 + log HCO3-

PCO2
alcalose Alcalose
Métabolique
compensée
❖Alcalose métabolique par excès d’apport de HCO3̄- :
Survient principalement chez l’IRC (rétention)
❖ Alcalose métabolique par pertes digestives d’ions H+:
(vomissements, aspirations gastriques intempestives ...).
→ perte de H+, Na+, Cl- et d’eau entraînant une
déshydratation extracellulaire(DEC) → ↗ de la
réabsorption rénale de Na+ ↘ Cl- souvent associée → ↗
réabsorption de HCO3̄- et excrétion d’H+ et K+)
❖Alcalose métabolique par pertes rénales d’ions H+:

❑avec déshydratation extracellulaire:

suite à administration excessive de diurétiques de l’anse (+++).

Exemple : Furosémide, Bumétanide.
→ les diurétiques de l’anse (branche ascendante) inhibent le
Co transporteur Na+/K+/Cl-
→ au niveau du tube distal : ↗ de la réabsorption du Na+ en
échange de H+ c’est à dire perte de H+ → ↗HCO3-
plasmatique.
❑avec hyperhydratation extracellulaire:

dans les surcharges en minéralocorticoïdes.

L’alcalose fait suite et se maintient par la
réabsorption tubulaire distale du Na+ en échange de
H+. Perte parallèle de K+ qui stimule encore
l’échange rénale Na+/H+.
Exemple : hyperaldostéronisme primaire ou
secondaire, hypercortisolisme,minéralo-
corticomimétiques
❖Alcalose métabolique dans le déficit en potassium:

✓ déplacement de H+ du liquide extracellulaire vers les

cellules.

✓ sécrétion accrue de H+ par les cellules tubulaires distales

déplétées en K+ (le rein cherchant à retenir K+).
alcalose respiratoire

Alcalose
respiratoire
compensée

pH = 6,1 + log HCO3-

PCO2
alcalose Alcalose
rspiratoire
L'alcalose respiratoire est habituellement due à une hyperventilation et
parfois à un abaissement de la pression partielle en 0₂.

➢une anxiété ou une douleur violente ;

➢l'hyperventilation d'origine centrale : affections du système nerveux
central

➢l'hyperventilation d'origine hypoxique :

on sépare deux types d'hypocapnies hypoxiques par l'étude de la SaO₂ et
de la pO₂.

Le plus fréquent est dit anoxémique : est la conséquence d'une respiration

en atmosphère raréfiée lors de séjours en haute altitude ou d'une
diminution des échanges respiratoires par lésions pulmonaires étendues.
Dans les deux cas la p0₂ est très diminuée.
Le deuxième mécanisme est dit anémique et correspond à la perte du
pouvoir oxyphorique de l'hémoglobine (possibilité de transporter
l'oxygène).