Méthodes d’extraction et séparation par chromatographie 2021

Chapitre I
Méthodes d'extraction

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I.2. Séparation des constituants d’un mélange hétérogène

Les techniques les plus utilisées sont : la décantation, la filtration et la centrifugation.

I.2.1. La décantation

La décantation est une opération mécanique permet de séparer les constituants sous
l’effet de la pesanteur d’une phase solide en suspension dans un liquide ou de deux
phases liquides non-miscible [1].

Exemple :
A- Dans le cas d’une phase solide en suspension dans un liquide (liquide-solide) avec des
masses volumiques moindre, exemple, eau-sable (Figure-I.1).

Figure-I.1 : Après décantation liquide-solide

B- Dans le cas de deux phases liquides non-miscibles de densité différente (liquide-

liquide), exemple, eau-huile (Figure-I.2).

Figure-I.2 : Après décantation de deux liquides

I.2.2. La filtration

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Le but de la filtration est de séparer les constituants qui possèdent une phase liquide et
une phase solide au travers d’un milieu filtrant poreux. La filtration est un processus
mécanique, en fonction de la gravité, soit par l'application d'une pression, et ce afin de
forcer le milieu liquide à passer à travers des membranes par l’aide d’un entonnoir. Le
liquide obtenu à la fin de la filtration est appelé le filtrat. Le solide qui reste dans le filtre
peut être appelé le résidu solide [2].
On récupère après filtration soit le solide comme précipitation d’un solide dans l’eau
(après une cristallisation), soit le liquide (après sédimentation), soit le liquide et le solide
(opération de recristallisation).

I.2.2.1. Principe de la filtration

La filtration est une séparation selon le diamètre des particules solides de différentes
tailles, qui sont dispersées dans un liquide. La différence de pression force le liquide à
passer à travers le filtre alors que les particules solides restent à la surface [2].

I.2.2.2. Matériaux filtrants

Ce sont des substances fibreuses ou poreuses minérales ou organiques.

 Les produits organiques

 Substances poreuses sont des produits à base de cellulose comme : papier filtre
(porosité 0,7-2,7 μm) en fibre de cellulose les plus couramment utilisés dans les
laboratoires, mais attention ces papiers sont sensibles aux solutions alcalines (Figure-
I.3).

Figure-I.3: Papier filtre

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 Polymères organiques : sont des membranes filtrantes sous forme de disques en

polymère avec des pores parfaitement définie. Ce type de membrane utilisé pour
séparer les petites tailles comme les bactéries. Ils ont cependant l’inconvénient d’être
soluble dans un certain nombre de solvants organiques. Domaine de la filtration et de
la microfiltration (porosité 0,1-10 μm).

 Inconvénients de papier filtre

Pour éviter le colmatage, il faut arrêter la floculation des petites particules, pour
l’obtention de particules plus grosses et donc plus faciles à filtrer. La meilleure
technique consiste à faire appel aux adjuvants de filtration qui sont des produits destinés
à faciliter le nettoyage du filtre. Les principaux adjuvants sont : la diatomite
(Kieselguhr) et la cellulose. Ces composés ne peuvent être employés que si le liquide
seul est à récupérer.

 Les produits minéraux

Les entonnoirs sont des produits minéraux ou des substances poreuses (Figure-I.4), ils
sont des dérivés de la silice selon la préparation exemple : verre fritté avec porosité de 0
pour les pores les plus gros à 4 pour les plus fins et supports types Buchner (tailles des
pores : 0,7-2,7 μm).

Deux types d’entonnoirs se distinguent dans cette catégorie:

a) Les entonnoirs de BUCHNER: utilisés pour la filtration de quantités assez

importantes de solides (Figure-I.5).
b) Les entonnoirs de HIRSCH: utilisés pour la récupération de petites quantités de
solide (Figure-I.5).

I.2.2.3 Méthodes de filtration

La filtration consiste à séparer les constituants d’un mélange liquide -solide par
passage à travers un milieu filtrant. Elle est beaucoup plus rapide que la sédimentation.

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La filtration peut être opérée sous pression normale (filtration par gravité), en s’aidant
d’une surpression (filtre presse) ou d’une dépression (filtration sous pression réduite).

 Filtration par gravité

Les mélanges soumis à la pression atmosphérique, est créée par la hauteur du liquide
sur le filtre. Le liquide passe à travers le support filtrant, tandis que le solide est reste sur
le filtre (Figure-I.6).
La filtration gravimétrique présente les inconvénients suivants:
. La filtration est lente.
. La difficulté de récupération de la phase solide isolée.

 Filtration sous pression réduite (sous vide)

Contient plusieurs éléments : une pompe à vide (trompe à eau), une fiole à vide,
entonnoir de Büchner, un tuyau et papier filtre (Figure-I.7). La vitesse de filtration est
augmentée en exerçant une pression sur le liquide à filtrer en amant du matériel filtrant
représenté par une membrane filtrante. L’entonnoir est adapté sur la fiole par
l’intermédiaire d’un cône en caoutchouc, qui collera à la fiole et l’entonnoir lorsque la
dépression est établie.

Figure-I.7 : Montage de filtration sous pression

I.2.3. La centrifugation

La centrifugation est une technique de séparation des mélanges contenants dans une
solution ne peuvent sédimenter par la seule de force gravité. La centrifugation est une

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décantation accélérée qui utilise la force centrifuge grâce à un mouvement de rotation

autour d’un axe. Elle est ainsi de séparer d’un mélange hétérogène comme deux phases
liquides ou une phase solide en suspension dans une phase liquide en fonction de leur
différence de densité [2,3] (Figure-I.8).

Figure-I.8: Centrifuge

Les facteurs influant sur la vitesse de séparation de centrifugeuse sont :

- Taille des particules (plus les particules sont petites, plus la durée de séparation est
augmente).
- La viscosité du liquide (la vitesse de rotation relativement réduite).

I.2.3.1 Equations de la centrifugation

Au cours du mouvement circulaire d’une particule, nous ne constatons que l'accélérateur

résultant de la force centrifuge [3].

ac= r.W2 ……….(1)

ac : accélérateur (m/s2)
r : rayon (m)
W : vitesse de rotation angulaire (rad/s)
W=v/r…………………………(2)
Donc : ac=v2/r…………………………(3)
v=N.2π.r…………………………(4)

ac=N2.4 π2.r………………………….(5)

Donc la force centrifuge est équivalente à l’accélération que multiplie la masse (Figure-I.9);

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Fc= m.ac…………………. (6)

La force centrifuge est appliquée à une particule solide en suspension dans un liquide,
donc la masse doit être remplacée par la différence entre m et la poussée d’Archimède
subie par la particule, donc la masse s’exprimer par : m = V(dS – dl)………….(7), où V et
dS sont respectés le volume et la densité de la particule et dl la densité du liquide.

Fc=V(dx-dl)*(N.2π.r)2/r=4π2.N2.r.V(ds-dl)…………………(8)

Parfois la vitesse de rotation angulaire peut être exprimée en fonction du nombre de

tours par minute selon la formule suivante :
W=2π.N/60………………………….. (9)
Fc =mr(2π.N/60)2= 0.01097mrN2……………………..(10)
L’amplification (Z) de l’accélération en nombre de g (gravité = 9,81 m/s2) est définie
comme étant le rapport :
Z = Fc/ Fg= mrw2/mg = rw2/g………………………….. (11)

I.3. Séparation des constituants d’un mélange homogène

Ne contiennent qu’une seule phase comme mélanges liquides-liquides ou liquides-

solides, exemple : eau-alcool, eau-sel.

I.3.1. Séparation par rupture de phases

1. Définition

 Dans le cas d’un mélange solide-liquide : provoquer la formation d’un solide dans
une phase liquide.
 Dans le cas d’un mélange liquide-liquide : provoquer la démixtion entre deux phases
liquides.

2. Mélange solide-liquide : la rupture de phase liquide homogène peut être provoquée :

 Soit en augmentant la concentration par élimination partielle de solvant. Exemple : un
composé A dissout dans une solution, la phase liquide est homogène si la
concentration C ˂ solubilité A, si C ˃ S il y‘a rupture de phase [2,4].

 Techniques d’élimination du solvant : pour éliminer un solvant on peut effectuer ;

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Par concentration à la pression atmosphérique : procédé simple qui consiste à chauffer la

solution. Inconvénient : oxydation à l’air de substances fragiles et modification de
produits thermolabiles [2].
Concentration sous-pression réduite : on limite l’élévation de température, on utilise
généralement évaporateur rotatif (ROTAVAPOR) (Figure-I.10).

Figure-I.10: Rotavapor
 Soit en diminuant la solubilité S (précipitation) par diminution du pouvoir
solvant : Elle peut être réalisée de plusieurs méthodes ;
Soit par variation de température.
Soit par addition d’un non-solvant.
Soit par relargage.

A) Variation de température

Cette méthode est basée sur le chauffage correspond à la technique bien connue de la
recristallisation c'est-à-dire la solubilité augmente avec la température (dissolution à
chaud) puis à refroidir à la température ambiante entraine l’apparition de cristaux.
Exemple : la recristallisation de l’acide benzoïque.

B) Addition d’un non-solvant

D’une manière générale, on ajoute un 2ème solvant miscible au premier mais peu ou
pas de solvant de la substance dissoute, car diminuant le pouvoir premier solvant, elle
entraine la précipitation [2,4]. Exemple : précipitation, d’une solution alcoolique, de
l’acide benzoïque ou salicylique par addition d’eau.

C) Relargage

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Le relargage est une technique qui consiste à séparer une substance A en introduisant
une autre substance B plus soluble qui prend sa place et qui modifie la solubilité de A.
Exemple : Un savon de soude est séparé par addition de NaCl (le savon est très peu
soluble dans l’eau salée).

 Composés relargables

Ils sont des molécules de faible masse moléculaire que des macromolécules de
polymères de structure colloïdale. Une molécule est beaucoup plus facile relargable que
son caractère organique (hydrophobe). Exemple : l’acétone, miscible à l’eau est relarguée
par addition d’un sel sulfate d’ammonium(NH4)2SO4.

 Composés relargants

Ce sont des sels minéraux solubles dans le solvant (généralement dans l’eau), ils sont
classés par ordre décroissant selon les séries de Hofmeister [2], par exemple :
F- > SO42 - > Citrate > Tartrate > Cl- > Br- > Li+ > Na+ > K+ > NH4+ > Mg2+
I.3.2. Changement d’état

Il consiste à faire passer l’un des constituants du mélange homogène à l’état de

vapeur c’est la distillation, si le mélange initial est un liquide, la sublimation, s’il est un
solide [2,4].

I.3.2.1. La sublimation : est le passage d'un corps de l'état solide à l'état gazeux. Cette
transformation se fait par une abaisse de la pression et augmente de la température.
Exemple : acide benzoïque, chlorure mercurique sont sublimables, en chauffant le solide
et en recueillant les vapeurs sur une paroi froide.

I.3.2.2. La distillation : passage de l’état liquide à l’état gazeux d’un mélange liquide,
en utilisant les volatilités différentes de ces constituants (Figure-I.11). Elle consiste à
bouillir les mélanges dont la vapeur. Les vapeurs obtenues sont condensées par
refroidissement, le liquide recueilli s’appelle le distillat. Exemple : la lyophilisation
(séchage à froid), est un procédé utilisé pour retirer l’eau contenu dans un produit afin de
rendre stable à la température ambiante et ainsi faciliter sa conservation [2].

On étudiera successivement :

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 La séparation des mélanges de composés non miscibles représentée par la technique

dite, d’entrainement à la vapeur. Cette technique dite aussi hydrodistillation, est très
utilisée dans l’extraction des huiles essentielles des végétaux.
 La séparation des mélanges de composés miscibles, soit par distillation simple, soit par
distillation fractionnée ou rectification.

a) Distillation simple (sans colonne)

Est une méthode de séparation des constituants d’un mélange homogène

généralement liquide dont les températures d'ébullition sont différentes de volatilité
existant entre les corps purs (Figure-I.13). Cette technique employée encore pour
concentrer en l’un des constituants une fraction d’un mélange liquide. Si on augmente
par chauffage la température, la tension de vapeur augmente, et se condense dans un
réfrigérant, lorsqu’elle devient égale à la pression ambiante (pression atmosphérique
pour les distillations ordinaires ou pression réduite pour des distillations dites sous
vides). Exemple : distillation simple d'un mélange binaire (eau–acétone).

b) Distillation fractionnée ou rectification (avec colonne)

La distillation fractionnée, aussi appelée rectification, est un procédé qui permet de

séparer à l’état pratiquement pur des composés à points d’ébullition relativement voisins
comme un mélange (eau–éthanol). Pour cela, elle exploite le même principe que
la distillation simple mais se distingue par l'utilisation d'une colonne de séparation.
L’utilisation de colonnes permit en pratiquant la distillation fractionnée d’obtenir de bien
meilleures séparations [4] (Figure-I.14).

I.3.3. Transfert de phases

On peut dissoudre dans un solvant approprié, certains constituants du mélange

homogène, c’est le transfert de phase tel que, osmose, extractions (Figure-I.15) et
chromatographies [2].

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Figure-I.15: Schéma d’extraction L/L par un solvant miscible et non miscible

I.3.3.1. Extraction liquide-liquide par un solvant miscible

1. Osmose
Pour réaliser un transfert de phase entre une solution initiale et un second solvant, il
y’a possibilité de séparer les deux phases, si les deux solvants ne sont pas miscible. Mais
le second solvant est miscible à la solution, il faut séparer à l’aide d’une membrane
poreuse de type semi-perméable, c'est-à-dire laisser passer le solvant ou le soluté ; c’est le
phénomène d’osmose.
L’osmose est un phénomène de diffusion [2]. La diffusion liquide correspond à des
concentrations de soluté (substance dissoute) dans un solvant [5].

1.1. Phénomène osmotique (expérience de Dutrochet 1809)

On place une solution saline est plongée dans un solvant. Une membrane semi-
perméable sépare les deux compartiments A et B (Figure-I.16). Le solvant
(compartiment A), pénétrant dans le compartiment B (solution saline) à travers de la
membrane, sur laquelle elle exerce alors une pression. Le phénomène d'osmose fait donc
que de l'eau pure passe dans la solution saline à travers une membrane semi-perméable
jusqu'à ce qu'il s'établisse une différence de niveau représentative de la pression
osmotique p (Figure-I.16) dont la valeur dépend de la concentration atteinte par la
solution saline, lorsque s'établit l'équilibre entre la pression osmotique et la pression
hydrostatique (la pression minimum qu’il faut exercer pour le passage du solvant de la
solution moins concentrée vers la solution plus concentrée) [6].

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2.2 Pression osmotique

La différence de concentration provoque une différence de pression osmotique qui

donne un déplacement du solvant du milieu le moins concentré vers le milieu le plus
concentré à travers la membrane semi-perméable (Figure-I.16) ce qui entraine une
élévation du niveau de la solution (dilution de la solution le plus concentrée).

 Loi Van t’Hoff

La pression osmotique exercée par une substance dissoute dans un solvant présente la
même valeur que la pression que prendrait cette substance, si elle se trouvait à l’état
gazeux et à la même température.
p = R.T.Cm

p : pression osmotique
R : constante des gaz parfaits (8,31 J.K/mol)
T : température absolue en ° K (Kelvin)
Cm : concentration molaire du soluté : C = n / v

 Influence de l’ionisation

Une molécule introduite dans un solvant à la concentration CB, dans lequel elle se
dissocie en nombre d’ion i, provoque une élévation de la pression osmotique :

p = R.T.i.Cm

i : nombre d'ions libérés par une molécule dissociée.

i Cm : osmolarité théorique.

Osmolarité :
L’osmolarité d’une solution est le nombre de moles de particules en solution dans 1 litre
de solution.
Osmolarité réelle : OS = α i C
α : coefficient de dissociation (α ˂ i).

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β = 1 + α (i – 1) tel que : α : est le coefficient de dissociation ; β : nombre d'ions libérés

par une molécule totalement dissociée
Exemple:

Le glucose est complètement dissocié 100% de dissociation→ α = 1  → β= 1

1) MgCl2: MgCl2 →Mg2+ + 2Cl- → i = 3, α = 0,89 ; β= 1 + 0,89 (3 - 1) = 2,78
2) NaCl: NaCl → Na+ + Cl- → i = 2, α = 0,93 ; β= 1 + 0,93 (2 - 1) = 1,93
3) 50% des molécules de MgCl2 sont dissociées : MgCl2 ↔Mg2+ + 2Cl-→ α= 0,5 → β =
1 + 0,5 (3 - 1) = 2

 Influence de la masse molaire des solutés

C’est le nombre de particules de soluté (molécules ou ions) qui intervient et non pas
leur masse moléculaire qui n’a donc aucune influence sur la pression osmotique [2,7].

Exemple:

 40 g d’un dextran (Mr = 40 000) / 1l.

 5 g d’une proteine (Mr = 75 000) / 1l.
 0,18 g de glucose (Mr = 180) / 1l.
 0,075 g de glycine (Mr = 75) / 1l.

Dans une solution contenant différents solutés, la pression osmotique est due à ceux
dont les masses moléculaires sont les plus faibles.

 Cas de solution contenant plusieurs solutés

La pression osmotique totale est la somme des pressions partielles dues à chacun des
constituants.
Osmolarité totale = ∑ osmolarité de chaque soluté.

Exemple :
Calculer la pression osmotique à 27 °C d’une solution aqueuse contenant 9 g de
glucose et 2,925 g de NaCl dans un litre de solvant. R = 8,31 J.K/mole ; M NaCl = 58,5
g/mole ; Mglucose = 180 g/mole.
La pression osmotique exercée : La pression osmotique résultante : p1= pNacl+pglucose
Le glucose est complètement dissocié :
i=1

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Les molécules de NaCl sont complètement dissociées

NaCl ⇄ Na+ + Cl- α = 0,93
i = 1 + α (β – 1) → i = 1+ 0,93 (2-1) = 1,93
Δp = R.T. (iglucose.Cglucose + iNaCl. CNaCl)
9∗10−3 9.25∗10−3
Δp = 8,31* 300*(1*180∗10−3∗10−3 + 1,93 ∗ )
58.5∗10−3 ∗10−3

Δp = 3,74.105 Pa

2.3 Mesure de la pression osmotique

A l’équilibre pression osmotique = pression hydrostatique.

Pression hydrostatique : ΔP = d g h ; (d : masse volumique ; g : gravité ; h : hauteur).
Pression osmotique : p = R T C
À l’équilibre, la différence de pression osmotique est égale à la différence de pression
hydrostatique qui s’exerce en sens opposé [2].

2.4. Mesure cryométrie (osmolalité)

L’abaissement de température de congélation ΔT (cryométrie) ou directement en

osmolalité est proportionnelle à sa concentration et il est indépendant de la nature du
corps dissous [2].
ΔT = K C (loi de Raoult)
ΔT : abaissement de température.
K : constante cryoscopique du solvant (K = 1,86 0C / [osm/Kg) pour l’eau].
C : osmolalité totale de la solution.
p=RTC et ΔT = K C
Note : l’osmolalité est le nombre de moles de particules en solution dans 1 kg d’eau.

2. Dialyse

Le principe de la dialyse est un procédé de séparation de deux solutions par une

membrane semi-perméable. Le transfert des solutés par diffusion au travers de la
membrane d’un mouvement des molécules contenues dans la solution. La vitesse de
diffusion d’un soluté dépend de sa masse moléculaire (Figure-I.17). De plus, la taille des

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pores, certaines membranes sont perméables à très petite molécules comme l’eau et
imperméables à des molécules plus grosses, c’est le phénomène d’osmose [2].
Les membranes utilisées laissent filtrer les molécules petites et moyennes
(cristalloïdes), en retenant les plus grosses, de structure colloïdale (macromoléculaire).
C’est le phénomène de dialyse.

Figure-I.17: Principe de la dialyse

2.1. Electrodialyse

Electrodialyse est un processus électrochimique qui permet d’extraire les ions

contenus dans une solution. L’extraction des ions se fait par migration des ions à travers
des membranes (anioniques ou cationiques) sous l’influence d’un champ électrique
(électrodialyse). Les particules qui ne portent pas de charge électrique ne sont pas
éliminées.

2.2.Principe

Electrodialyse est utilisée pour récupérer l’eau en fin de traitement, l’eau potable ou
eau de mer est soumise à l’effet d’un courant qui sont disposées des membranes
anioniques et cationiques. Les ions Na+ sont attirés vers l’électrode négative et les ions
Cl- sont attirés vers l’électrode positive. Pour la sélectivité des membranes, les ions Na +
peuvent uniquement passer les membranes cationiques et les ions Cl- les membranes
anioniques [8,9] (Figure-I.18).

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2.3.Hémodialyse

L'hémodialyse est une méthode d'épuration extra-rénale du sang (insuffisance rénale) à

l’aide d’un rein artificiel. Ce dernier contient un liquide artificiel appelé dialysat (solution
saline), il consiste des membranes qui laisse passer seulement l’eau et les substances de
très petite taille. Ces substances quittent le sang et traversent la membrane vers le dialysat
[8,9].

2.4.Application de la dialyse

Purification macromoléculaire.
Purification de sérum sanguin.
Purification des solutions d’enzymes.
Séparation solutés.
Echanges d’ions.

I.3.3.3. Extraction
L’extraction d’une espèce chimique se faire grâce à un entrainement par vapeur ou par
solvant qui permet d’extraire une espèce chimique d’un milieu solide ou liquide par
solubilisation dans un solvant. On distingue des extractions, liquide-liquide et solide-
liquide.

1. Extraction directe (extraction par hydrodistillation)

Cette technique est très utilisée dans l’extraction des huiles essentielles des végétaux.
L’espèce chimique est extraire dans l’eau dont la vapeur entraine les huiles essentielles et
se condense dans un réfrigérant, par exemple l’extraction des arômes des zestes d’orange.

2. Extraction par un solvant non-miscible (extraction liquide-liquide)

L’extraction permet de réaliser le transfert d’un soluté initialement contenu dans une
phase liquide ou solide par un solvant non miscible au premier milieu.
L’extraction par solvant consiste à dissoudre le composé dans un solvant non miscible
avec l’eau et à séparer la phase organique contenant le composé à extraire de la phase
aqueuse.

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L’extraction liquide-liquide est la succession de plusieurs étapes. La première étape est

la mise en contact des deux phases. Pour augmenter la surface d’échange, la phase à
extraire et la phase d’extraction sont mélangées. La seconde étape consiste à obtenir
l’équilibre du système (saturation de la phase d’extraction) qui est conforme par les lois
de la diffusion et de la solubilité (coefficient de partage). La dernière étape est la
séparation des phases après la décantation (Figure-I.19).

Figure-I.19: Extraction liquide-liquide

1.2.Principe
Le principe d’extraction est basé sur la distribution d’un soluté donné entre les deux
solvants en fonction de sa solubilité dans chacun d’entre eux [2].
Deux paramètres sont importants lors d’une extraction : le coefficient de partage et le
taux de distribution [2].
La phase initiale : substance S dans un solvant A. Un solvant B non miscible au solvant A.
La substance S se partage dans chacun des solvants A et B.
SA SB

A) Le coefficient de partage K : est le rapport des concentrations

de la substance S dans les deux phases, après réalisation de l’équilibre.
K = CB / CA
K : coefficient de partage
CB : concentration du soluté dans la phase organique B.
CA : concentration du soluté dans la phase aqueuse A.

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L’indice A est attribué dans la phase aqueuse C A ˃ CB → le soluté est hydrophile (K ˂ 1).
CB ˃ CA → le soluté est appelé hydrophobe (K ˃ 1).

B) Taux distribution D : si le soluté existe sous plusieurs formes, c’est la somme des
concentrations en chaque forme qui intervient, que cette forme participe [2].
D = ∑ CB / ∑ CA.
Cas idéal : dans les deux phases le soluté se trouve sous une seule et même forme : D = K.

C) Relations relatives aux quantités :

Rapport de quantité α : est parfois appelé coefficient de partage [2].
.

 Extraction simple

QB1 1
R= → R = 1-
QA0 1+α

Distribution non régulière de S entre A et B

VB
Il faut remplacer K par le taux de distribution D avec α = D. VA
1
R = 1- VB
1+D VA

 Inconvénient

Difficulté d’émulsion qui ne permet pas la récupération de 100% de l’extrait.

Faible rendement.
Pour l’améliorer, on pratique plusieurs extractions successives ou répétées.

Extractions répétées

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