TESTS

RELATIFS LA CLAIRANCE DU SANG PORTAL

CONCENTRATION EN AMMONIAQUE ( NH4+) ET TEST DE TOLRANCE L'AMMONIAQUE (SUR PLASMA)

Permet de dceler les shunts porto-systmiques et la diminution de la masse fonctionnelle hpatique.
Echantillonnage & Dosage
Mise jeun de 8 heures.
Le tube prlvement ne peut contenir de l'ammoniaque, l'hparine sous forme d'hparinate de
lithium est l'anticoagulant recommand.
Bain de glace ds le prlvement et sparation du plasma dans les 30 minutes (l'hmolyse donne des
valeurs fausse); test dans les 60 minutes si l'chantillon est gard au rfrigrateur (sinon fausse
augmentation des valeurs); 2 jours si l'chantillon est gard - 20C au moins par immersion et
agitation dans un mlange de glace sche (carboglace) et d'thanol.
L'hyperammonimie est mieux dtecte dans le sang artriel que dans le sang veineux.
Mthodes de dosages trs classiques (mthode colorimtrique de Berthelot)
Rsultat et interprtation
Concentration de base
Normal 60-75 g/dl
Suspect si >120 g/dl
Pathologique si > 200-1000 g/dl
Si normale, indique une absence de shunt entre le systme porte et les veines systmiques mais, nexclure
une diminution de la masse fonctionnelle hpatique de plus de 60%, le test de tolrance s'indique. En cas
de Shunt, le test de tolrance est dangereux.
Test de tolrance
per os: Aprs sondage, administrer directement dans l'estomac 0,5 ml (=0,1g)/KgPV d'une solution de
NH4Cl 20%, ou la faire boire en mlangeant du lait chocolat et prlever le plasma 30 minutes aprs
l'ingestion de NH4Cl.
par voie rectale: Vider l'intestin, collecter du sang sous hparinate de lithium, administrer 0,1g/KgPV
de NH4Cl 5% 20-30cm dans le rectum, collecter un chantillon de sang 30 et 60min, garder
l'chantillon dans la glace, aprs une centrifugation, doser dans les 3 heures
Les valeurs interprter lors de test de tolrance sont la valeur absolue atteinte aprs 30 minutes et
l'accroissement entre le niveau de la ligne de base et le niveau de l'ammonimie 30 minutes aprs
l'ingestion:
Normale = 2 2,5 x ligne de base 30min,
5 fois la valeur de la ligne de base indique quau moins 60% de la masse fonctionnelle est perdue.
Danger d'intoxication car les rcepteurs hpatiques sont fortement rduits.
Si le test de tolrence a t risqu malgr une ligne de base trop leve:
2 2,5 x ligne de base -> shunt veineux uniquement.
> 2,5 x ligne de base -> shunt et diminution de la masse fonctionnelle hpatique.
Remarques:
Chez les bovins l'hyperammonimie peut tre la consquence d'une intoxication l'ure o l'herbe
jeune riche en azote soluble (intoxication alimentaire).
Chez le chien des dficiences enzymatiques du cycle de l'ure induisent une hyperammonimie.

AA. BRANCHS/ AA. AROMATIQUES DANS LE PLASMA (CHEZ LE CHIEN)

Normal (a jeun) = 3
Shunt porto-systmique < 1
Explications: l'insuline est une hormone qui induit une utilisation accrue des acides amins branchs par
les tissus musculaires et adipeux, d'o le niveau plasmatique en acides amins branchs est peu lev
lorsque le niveau en insuline est lev (normalement: uniquement aprs un repas). Lors de shunt ou
d'hpatite chronique active, le niveau de l'insulinmie reste lev en priode interprandiale
comparativement un animal sain (car le foie ne peut plus stocker le glucose, qui passe dans le sang) et
cette insuline empche le muscle de librer les acides amins branchs comme il le fait normalement en
priode de jene interprandiale.
N'est possible que dans un nombre limit de laboratoire. Les techniques utilises sont l'autoanalyseur et/
ou la chromatographie.
CONCENTRATION SRIQUE EN GLOBULINES
Dans les maladies chroniques du foie, la masse en cellules de Kupffer diminue, avec comme consquence
une dissmination assure dans l'organisme de protines trangres en provenance de l'intestin vers la
population des monocytes-macrophages des tissus extra-hpatiques. Les cellules de Kupffer sont en fait
des macrophages spcialiss du foie qui nettoient le sang portal du matriel antignique originaire de
l'intestin: microorganismes, produits issus de ces microorganismes (endotoxines), antignes non-spcifis
provenant des aliments. Contrairement aux cellules de Kupffer, les macrophages de la rate et tissus
lymphodes transfor ment l'antigne pour la production d'anticorps. Il s'en suit une
hyperimmunoglobulinmie ou une gammapathie polyclonale.
TESTS D'EXCRTION DE COLORANTS (BSP-ICG)
Colorant anionique organique limin presque exclusivement par le foie. Dficience si prsence
concomitante de shunt et dune diminution de la masse fonctionnelle.
Ln Ct = Ln Co - Kt
K est ici la Clairence relative ou
fractionnaire. K est mesurable
graphiquement ou calculable car K=
Ln2/t1/2 (car Ct = Co/2).

P1 (10 premire minutes) dpend du flux sanguin

hpatique, de la circulation intrahpatique (sanguine
et biliaire), du pouvoir de captation du colorant par
l'hpatocyte. P mesure le transit hpatocytaire. P2
dpend de lintgrit des hpatocytes et des voies
biliaires.

Epreuves ralises chez le chat et le chien: % de rtention 30 minutes (Ct/Co), Mesure de P1 (clairance
fractionnaire) par prise de sang rptes pendant 10 minutes, Mesure de P2 par prolongation jusque 60
minutes. Prise de sang dans la cphalique et mesure par absorbance du plasma.
Faux ngatif par Rtention diminue et Clairance augmente
- Anasarque/Ascite riches en protines: ugmentation du VD.
- Hypoalbuminmie: Plus grande proportion de srumalbumine est unie la BSP et l'interaction
entre l'albumine et les rcepteurs de l'hpatocyte favorisera une augmentation de la prise de BSP.
Faux positif
- Obsit: augmentation apparente du % de rtention suite linjection dune quantit excessive (sauf
par la mthode de Sutherland)
Vrai positifs: Rtention augmente et Clairance diminue
Diminution du flux sanguin hpatique: par insuffisance cardiaque ou obstruction post sinusodale.
Shunt porto-systmique: si la masse hpatique est aussi rduite . Normal dans le cas contraire.
Perte de 55% de la masse fonctionnelle
Hyperbilirubinmie: Cholestatique: la BSP qui devrait tre limine par la bile retourne dans le
sang via les fluides interstitiels et le drainage lymphatique. Trouble de captage. Hyperbiliribunmie
prhpatique: il y a comptition relative entre la BSP et la bilirubine pour la SA (la BSP se lie la
srumalbumine et aux globulines par opposition la bilirubine), mais les troubles de rtention ou de
clairance se produiront uniquement si l'hyperbilirubinmie dpasse 5 mg/dl car dans ce cas il y a
comptition pour la conjugaison au sein de l'hpatocyte.
- Les drogues qui se lient la SA entreront en comptition avec la BSP.
- Systme de transport intrahpatique dfectueux sans altration de la structure histologique. (dcrit
chez le chien).
-

TESTS RELATIFS AUX MTABOLISMES HPATIQUES DE SYNTHSE (ANABOLIME HPATIQUE )

GLYCMIE
Atteinte hpatique chronique > 80% de la masse de
lorgane: Hyperglycmie
postprandiale prolonge
(diminution de la masse fonctionnelle) et/ou
hypoglycmie associe l'anorexie (suite la
diminution des capacits de stockage du glucose sous
forme de glycogne) DDx: animal jeune, dficience
enzymatique, tumeur du pancras endocrine.
Shunt porto-systmique: dans 35% des cas l'hypoglycmie s'observe du fait de la diminution de la masse
hpatique.
ALBUMINMIE ET RAPPORT ALBUMINE/GLOBULINE
Rapport A/G diminu dans le srum: Une diminution de la masse fonctionnelle suite une maladie
chronique engendre une diminution de la synthse d'albumine et de certaines globulines (autres que les
gammaglobulines), mais ces changements ne s'observent qu'au terme de la maladie.
Hypoalbuminmie: La demi-vie de l'albumine tant de 8 jours, l'hypoalbuminmie ne s'observe
normalement pas lors d'atteinte hpatique aigu, mais bien au terme d'atteintes chroniques ou si lhpatite
aigu dure plus de 14 jours. Causes: maladie inflammatoire chronique (hypoalbuminmie svre),
pritonite infectieuse fline, stress prolong, shunt porto-systmique congnital.

profil d'lectrophorse:
Inflammation aigu du foie: les protines de l'inflammation sont augmentes alors que l'albuminmie
tend diminuer (lanorexie diminue les apports azots: carences en acides amins, dpression des
fonctions hpatobiliaires, changements mtaboliques au profit dune synthse des protines de
linflammation et au dtriment de la synthse de lalbumine; tat catabolique > tat anabolique) d'o
diminution du rapport A/G. Le profil d'lectrophorse sera donc typique: diminution du % de
l'albumine, et accroissement du % des alpha et globulines (centre du profil). Si la chronicit s'installe
(pritonite infectieuse fline), une augmentation des gamma-globulines s'observe galement. Si
lhypoalbuminmie survient aprs 3 sem. datteinte hpatique (dans les maladies qui se dveloppent
rapidement), le dclin de lalbuminmie indique que les fonctions hpatiques sont massivement
dficientes, ce qui contribue tablir un pronostic dfavorable.
Inflammation chronique, llectrophorse montre un pontage bta - gamma si l'hpatite chronique est
volutive et active (= cirrhose). L'inflammation chronique expose le systme immunitaire aux antignes
digestifs, d'o synthse continue d'IgM et d'IgG: l'augmentation simultane des gamma-globulines (IgG;
zone des gamma-globulines d'un profil lectrophortique) et des IgM (zone des 2-globulines) induit le
pontage lectrophortique entre et . Lors de cirrhose ou de tumeurs, la maladie tant plus
progressive, on trouve toujours une hypoalbuminmie qui conduit la formation doedme et dascite
lorsque la valeur de lalbuminmie est <20g/l ou <15g/l pour d'autres auteurs. La mise en vidence de
loedme et de lascite est frquente lors de cirrhose ou de tumeurs.
PROTINES DE LA COAGULATION DANS LES MALADIES CHRONIQUES DU FOIE
Les temps de coagulation du plasma citrat seront allongs: temps de Quick(prothrombine): seul signe au
dbut de la dficience hpatique car la 1/2 vie du facteur VII est plus courte que celle des autres facteurs;
temps de thromboplastine partielle (APTT). Contrle d'une carence possible en vitamine K: Si un facteur
de la coagulation est dficient de 70 %, cela suffit pour avoir un allongement du temps de coagulation.
Comme les facteur II, VII, IX et X sont vitamine K-dpendants, il y aura lieu d'injecter de la vitamine K
et de refaire le test 24 h plus tard. Si Quick reste allong: le problme est dorigine hpatique et non d
une dficience en vit. K.
URMIE DANS LES MALADIES CHRONIQUES DU FOIE:
Normalement 10 50 mg/dl chez le chien. Diminution lors d'insuffisance hpatique grave avec
augmentation concomitante de l'ammoniaque.
ACIDES BILIAIRES:
A jeun, la concentration srique est basse. Aprs un repas, la scrtion d'acides biliaires augmente, un
maximum est atteint 2 heures aprs le repas. Augmentation des valeurs sriques en cas de ncrose
hpatique (intoxication aigu), cirrhose (cholestase),
lipidose (cholestase),
noplasie hpatique,
cholangiohpatite (cholestase), shunt porto-systmique. Valeur normale jeun < 5M/L

TESTS ENZYMATIQUES DU FOIE

ALANINE TRANSAMINASE (ALT)
Catalyse la raction suivante: alanine + -ctoglutarate (ALT) pyruvate + glutamate
localisation: cellule hpatique, coeur, pancras, rein, muscles squelettiques
Valeurs normales: moyenne: 40 UI/l cf. normes du laboratoire, variations physiologiques selon lge:
augmentation significative avec lge, lindividu.
Valeurs anormales: chez le chien et le chat, non valable chez les GA

- Augmentations fortes (signes cliniques d'insuffisance hpatique nuls): ncrose hpatique toxique, hpatite
contagieuse canine ou maladie de Rubarth.
- Augmentations modres: (signes cliniques d'insuffisance hpatique maximaux): hpatite chronique +
cirrhose avec cytolyse, hpatite par rtention: chollithiase, cholestase intrahpatique avec surcharge
graisseuse (augmentation d'ALT, PAlc).
- Augmentations faibles: en absence datteinte hpatique 1aire, mais lors d'atteintes cardiaques,
pulmonaires, ou rnales, et lors datteinte hpatique 2aire de cholestase (diabte sucr).
L'ALT est lenzyme de choix pour dtecter la cytolyse de lhpatocyte. On considre que laugmentation
de ALT est pathognomonique dune atteinte hpatique primaire avec cytolyse ou secondaire: insuffisance
cardiaque ou surcharge graisseuse qui entrane une augmentation de la permabilit des cellules
hpatiques. Donc, cause dune demi-vie courte, la dtection dune augmentation sensible un moment
donn nest possible que si la cytolyse hpatique est un processus en cours, et quil y a donc eu une
libration d' enzyme peu de temps avant la prise de sang.
ASPARTATE TRANSAMINASE (AST)
Transforme l'aspartate en oxaloactate et l'alpha-ctoglutarate en glutamate. Prsent dans la plupart des
tissus mais les origines de l'activit srique sont essentiellement le muscle et le foie.
L'augmentation pathologique de l'AST n'est pathognomonique d'aucun tissu en particulier puisque
l'enzyme se rencontre dans la plupart dentre eux et dans les rythrocytes. Cependant, les augmentations
d'activit sont surtout observes lors:
- d'atteintes hpatiques
- d'inflammation et de ncrose musculaire (coeur; muscles squelettiques)
- d'hmolyse pathologique ( confirmer par la mesure de l'hmatocrite)
Lorsque la cause d'hmolyse a pu tre carte, l'origine hpatique ou musculaire de l'augmentation sera
dfinie partir du dosage de l'ALT, toute augmentation d'activit ALT tant considre comme
pathognomonique d'une atteinte hpatique avec cytolyse chez le chien et lechat. En revanche, chez les
grands animaux, le dosage de l'ALT sera remplac par celui de la sorbitol dshydrognase (SDH) pour
confirmer ou non l'origine hpatique d'une pathologie.
Fausses augmentations: hmolyse accidentelle (le globule rouge est riche en AST/ALT); lipmie (lecture
malaise); ctoacidose; drogues hpatotoxiques; sang total laiss temprature ordinaire (hypoxie:
permabilit membrane)
Fausses diminutions: traitement la mtronidazole, penicillamine, oxodipine, carence en vitamine B6
(rare), carence en zinc (effet via la P.Alc.), urmie (diminution non significative).
LACTATE DSHYDROGNASE (LDH )
Catalyse la transformation du pyruvate en lactate ou inversment, en faisant disparatre ou apparatre du
NADH, lequel est dos par spectrophotomtrie.
5 isoenzymes prsents dans tous les tissus, la LDH1 est le principal isoenzyme du coeur et des reins sauf
chez la vache et le mouton o il est aussi trs abondant dans le foie. Chez les autres espces, le foie et les
muscles squelettiques contiennent surtout la LDH5. Attention lhmolyse.
Dosages:
Sens pyruvate --->lactate pH 7: mesure de la vitesse de disparition du NADH
Sens lactate ---> pyruvate: pH 9: mesure de la vitesse d'apparition du NADH.
Sens lactate ---> pyruvate pH 7 avec un pige pyruvate.
Comparaison de lactivit de LDH1 (-HBDH) lactivit totale. Si l'activit LDH1 est normale, mais
LDH totale augmente: affection hpatique mais pas cardiaque.

 Inactivation thermique: les LDH lentes sont dtruites 65C pendant 30 min >< LDH1 qui rsiste.
LDH5 seule est dtruite 57C.
lectrophorse suivie dune raction enzymatique en prsence de lactate, NAD+, PMS(phnazine
mthosulphate) et sel de ttrazolium (MTT). Prconise en mdecine humaine lors de suspicion
dinfarctus du myocarde.
Conclusions: L'activit LDH tant trouve dans de nombreux tissus, le dosage srique de l'activit totale
(de l'ensemble des isoenzymes confondus) ne permet pas de dfinir l'origine tissulaire de la pathologie en
cas d'augmentation des taux. Le dosage des LDH doit donc obligatoirement tre associ celui d'autres
enzymes: CK et AST lors d'affection musculaire, alanine transaminase (ALT ou GPT) ou sorbitol
dshydrognase (SDH), et phosphatase alcaline (PAlc) lors d'affection hpatique; et ventuellement une
lectrophorse des LDH pour dterminer l'origine tissulaire l'aide des valeurs enregistres pour les
diffrents isoenzymes.
Taux faussement bas: prsence doxalate, dascorbate (vitamine C), dure, ou ractifs trop vieux.
Taux faussement levs: hmolyse, lipmie svre.
CRATINE PHOSPHOKINASE (CPK, CK)
Transforme la cratine de la cellule musculaire en phosphocratine (PC), pendant le repos.
Isoenzyme BB (CK1): systme nerveux, viscres.
Isoenzyme MB (CK2): coeur, un petit peu muscles squelettiques. pas dans le serum chez chien.
L'isoenzyme MM (CK3): coeur et muscles.
interprtation:
Musculaire: Toute augmentation de l'activit CK dans le srum est considre comme spcifique d'une
affection musculaire. EN vt il sagit plus souvent traumatisme induit par une injection musculaire, une
prise de sang difficile, des lacrations musculaires, une position couche prolonge, transport, chocs
lectriques, lectrode, hypothermie, crasement.... que dune myosite. Donc, une augmentation nest
pathognomonique que si elle se maintient pendant plusieurs jours. Des valeurs normales ne permet pas
dexclure. Les myosites et les myopathies dgnratives induisant des augmentations d'acitivit CK
sont d'origines diverses: hrditaire, infectieuse ou parasitaire: Clostridium, Toxoplasmose, endocardite
bactrienne, dirofilariase, immune: lupus rythmateux, myosite osinophiles, endocrinienne:
hypothyrodisme, hyperadrnocorticisme, nutritionnelle: vit E, muscle blanc, cu chez le mouton,
monensine chez CV, ou autre: myoglobinurie chez le cheval; hypertehermie maligne.
Endocrinienne: hypothyrodisme, hyperadnocorticisme.
SNC: ischmie crbrale, traumatisme, maladies crbrovasculaires aigues.
Faussement bas: prsence d'agents oxydants, d'EDTA, de citrate, de fluorure, lors d'exposition de
l'chantillon la lumire solaire, lors d'analyse tardive.
Anormalement levs: lors d'hyperbilirubinmie (interfrences), d'hmolyse (activation du milieu
ractionnel), de traitements mdicamenteux (clofibrate; injection intramusculaire).
PHOSPHATASES ALCALINES (P.ALC)
Dosage: lenzyme hydrolyse les esters phosphates, libre un chromogne jaune -> colorimtrie (410nm).
Raction est optimale pH 8,5; cette phosphatase a t dnomme alcaline pour cette raison.
Localisation et rles:
foie (cellules pithliales), cortex rnal:(tubes contourns proximal), muqueuse intestinale, ostoblastes, et
aussi: cerveau, glandes mammaires, glandes maxillaires, placenta, peau, bile, leucocytes (uniquement
chez les herbivores), pancras. Impliques dans le transport de substances au travers des membranes.

Interprtation dune augmentation de lactivit PAlc:

Maladies hpatiques: PAlc totales augmentes: chien >2 50 x; chat >2 5 x
- cholestase: dosage peu interessant chez le chat.
- augmentation conjointe dALT et de PAlc: Surcharge graisseuse hpatique. ventuellement:
noplasie hpatique maligne, hpatome, cirrhose.
- Autres affections: shunt vasculaire porto-systmique, intoxication hpatique au cuivre, rupture du
canal biliaire, cholangio hpatite suppurative.

Apprciation en fonction des Niveaux sriques ou des augmentations en isoenzymes:

- si 10 x augment: lsion hpatique.
- si 100 x augment: obstruction biliaire extra-hpatique (chez l'homme)
- PAlc hpatique: augmente quand hpatite avec cholestase, obstruction biliaire.
- PAlc cortico-inductible augmente (chien uniquement) quand mtastases hpatiques, carcinome
hpatique, foie graisseux (lipidose), troubles endocriniens (voir ci-aprs).

Maladies osseuses : augmentation faible des PAlc. Il ny a pas daugmentation des PAlc lors d'ostolyse
(mylomes multiples; cancer osseux) sauf si l'activit des ostoblastes est augmente. Le bilan phosphocalcique doit accompagner le dosage de la PAlc. Anomalies responsables d'une augmentation srique:
Ostomalacie (hypocalcmie et hypophosphatmie), Hyperparathyrodie localisation osseuse
(augmentation de 4 6 x par rapport la normale), Ostosarcome: 2 x la normale, Ostoporose
nutritionnelle, Rachitisme du jeune par carence en vitamine D.
Maladies endocriniennes qui saccompagnent de lipidose hpatique: Hypercorticisme (maladie de
Cushing), Diabte sucr avec foie graisseux, Hypothyrodisme, Hyperparathyrodisme
Drogues: Traitement aux glucocorticodes.
Noplasie (pas un bon marqueur)
PHOSPHATASE ACIDE (PAC)
pas d'utilit en mdecine vtrinaire (cancer de la prostate).
GAMMAGLUTAMYL TRANSPEPTIDASE (GT, GGT)
Prsent dans le rein, le pancras, le foie et les voies biliaires. L'enzyme circulant serait exclusivement
d'origine hpatobiliaire et ce titre cet enzyme serait un meilleur indicateur des obstructions bilaires que
ne l'est la phosphatase alcaline chez les animaux.
Bon indicateur dingestion du colostrum chez le chiot
Chez le ruminant adulte, la GGT est lun des marqueurs de choix pour dtecter des atteintes
hpatiques, mais chez le nouveau-n, la trs haute activit srique due lingestion de colostrum
gne cette utilisation diagnostique pendant quelques semaines.
Chez l'homme, il est utilis pour dmasquer: le syndrome de cholestase, l'alcoolisme chronique et la
surveillance du sevrage.
AMYLASE ET LIPASE
Atteinte du pancras
SORBITOL DSHYDROGNASE (SDH)
Dosage: sur srum ou sur plasma hparin : rduction du D-fructose en D-sorbitol. Mesure la vitesse de
disparition du NADH.

Ne se rencontre pratiquement que dans l'hpatocyte. Troubles hpatique (cytolyse) chez tous les animaux
tests. La SDH a t propose pour vrifier l'intgrit de la cellule hpatique chez le cheval et les
ruminants car, chez ces espces, le dosage de l'ALT ne convient pas ce contrle
GLUTAMATE DSHYDROGNASE (GLDH) ET ORNITHINE TRANSCARBAMYLASE (OTC, OCT)
Permettent d'valuer l'intgrit de la cellule hpatique chez toutes les espces.
- L'OTC fait partie du cycle de l'ure. Enzyme essentiellement hpatique chez le chien. Marqueur des
hpatopathies primaires.
- En revanche, lors d'atteintes hpatiques secondaires, c'est la GLDH qui augmente le plus frquemment.

HYPERBILIRUBINMIE (ICTRES)
DOSAGES:
Pigment biliaire urinaire: dcelable par une bandelette ou par mthode clinique
Bilirubine conjugue urinaire: Par bandelette du commerce, En couplant la bilirubine un compos
stable de diazonium, Test de Rosenbach lac nitrique (oxyde bilirubine en biliverdine), Test de
Harrison (prcipit bilirub ac 10% chlorur de baryum, puis faire ragir ac ractif de Fouchet),Test au
bleu de mthylne.
Bilirubine srique: Se mesure par la raction de van den Bergh. Capacit de la bilirubine se coupler
un ractif en formant un compos color.
GNRALITS:
Lorsque les taux de la bilirubinmie augmentent, un ictre apparat. Ce syndrome se marque par des
signes plus ou moins prononcs en fonction du type d'ictre: la coloration jaune des tguments et
muqueuses, des urines fonces brunes, des selles dcolores blanc mastic. Le dpistage de
l'hyperbilirubinmie revient classer les ictres comme des affections rsultant soit d'une augmentation de
la production de bilirubine, soit d'une diminution de l'excrtion de la bilirubine.
5 processus responsables de l'hyperbilirubinmie:
Surproduction: hmolyse, rythropose inefficace
Capatation insuffisante par l'hpatocyte: jene prolong, drogues, troubles hrditaires
Raction de conjugaison dficiente: hrditaire, hpatites et cirrhose, drogues (chloramphnicol)
Rduction de l'excrtion de la bile, hrditaire, hpatites, drogues
Obstruction la sortie de la bile: chollithiase, tumeurs
LHOMME:
Classification de lictre en fonction de lorigine:
Ictres prhpatiques ou hmolytiques: Le foie est normal, mais on observe un ictre hmolytique
(causes varies). La capacit du foie conjuguer la bilirubine libre produite en grandes quantits du fait
de l'hmolyse est dpasse. Un tel ictre (lger) se caractrisera par une hyperbilirubinmie libre
augmente, une hypersidrmie, une rticulocytose, une urobilirubinurie franche. Pas de bilirubinurie
(exception: chien). Une stercobiline fcale augmente.
Ictres hpatiques ou mdicaux dorigine hpatocytaire: hpatite aigu cytolytique virale/toxique,
cirrhose (hyperbilirubinmie mixte), dficit du mtabolisme (captation; enzymes transformants;
excrtion)

 Ictres hpatiques ou mdicaux dorigine obstructive: cholestase (arrt ou diminution du passage de la

bile par obstruction des voies biliaires intra-hpatiques (cancer; granulomatose). Hyperbilirubinmie
conjugue.
Ictres hpatiques ou mdicaux dorigine mixte ou indtermine: frquent (hpatite aigu avec
cholestase: hyperbilirubinmie conjugue)
Ictres post-hpatiques ou chirurgicaux: Ce sont les ictres par rtention de bilirubine conjugue qui
sont dus au blocage des voies bilires extra-hpatiques (calcul du choldoque, et cancer de la tte du
pancras).L'hyperbilirubinmie est conjugue.
Classification en fonction de la prsence ou non de cholestase:
Ictres cholestatiques: cholestase intra- ou extra-hpatique
Ictres non cholestatiques
Classification en fonction du type de bilirubine prsente en exces:
Ictres bilirubine libre:
- Ictres hmolytiques (Les plus frquents) dus des causes hrditaires (hmoglobinopathie,
enzymopathie rythrocytaire: rare chez les animaux), des troubles acquis: infectieux, parasitaire,
immunologique (autoanticorps; incompatibilit foeto-maternelle; transfusion)
- Autres: Erythropose inefficace excessive, dfaut de l'hpatocyte (prhension, enzymopathie).
Ictres bilirubine conjugue: Diminution de l'excrtion biliaire (hrditaire; rare), Cholestatiques,
Obstruction extra-hpatique (signes cliniques marqus, hyperbilirubinmie conjugue,
hypercholestrolmie, augmentation de P.Alc et GGT, temps de Quick allong par malabsorption de
vitamine K); Obstruction des voies biliaires intra-hpatiques (Symptmes moins nets); Cholestase de
l'hpatocyte (interprtation difficile; hyperbilirubinmie mixte, lors d'hpatite et de cirrhose)
LE CHIEN
Contrairement ce qui est crit dans la plupart des ouvrages vtrinaires, le chien n'obit pas 100% aux
rgles valables pour l'homme. De plus, le chien prsente deux particularits importantes:
un seuil rnal bas pour l'limination de la bilirubine conjugue
Du coup: un dosage de la bilirubinurie serait prfrable une recherche plasmatique de bilirubine lors d'une suspicion de
cholestase intra- ou post-hpatique chez le chien.
une capacit rnale transformer l'hme en bilirubine conjugue
Composition urinaire:
urobilinogne: Ce terme dsigne toutes les substances qui peuvent ragir avec le ractif d'Ehrlich. La
prsence d'urobilinogne indique que le canal choldoque est permable, et la circulationentrohpatique du pigment biliaire normale. L'absence de pigments biliaires dans l'urine signe: une
obstruction complte du choldoque si le dosage est rpt plusieurs jours sans donner de rsultats
positifs; un traitement aux antibiotiques qui a dtruit la flore intestinale, empchant ainsi la
transformation de la bilirubine en pigments biliaires (leur prsence dans l'urine sera diminue, ou ils
seront absents en fonction de l'importance de la destruction de la flore intestinale). Un accroissement
des concentrations urinaires en pigments biliaires indique (valable chez le chien, la bte bovine et le
cheval): une pathologie hpatique (ex.:hpatite virale) avec cytolyse, car les dommages cellulaires
empcheront la prise par le foie des pigments biliaires absorbs par le tube digestif (cycle entrohpatique perturb): ds lors, les pigments rabsorbs sortiront via les reins plutt que via la bile. Une
affection pr-hpatique (l'hmolyse pathologique augmente les taux en urobilinogne)
bilirubine conjugue: la bilirubine libre, non-conjugue, ne se retrouve jamais dans l'urine puisqu'elle est
insoluble. Vu le seuil rnal bas, la prsence de bilirubine conjugue dans l'urine, mais pas dans le
plasma, est un phnomne classique, et un signe prcoce de lsions hpatocellulaires ou d'obstruction
biliaire, ou encore d'une atteinte hmolytique, ou enfin d'une absence de pathologie (60% des chiens
apparemment en bonne sant peuvent faire de la bilirubinurie).

LE CHEVAL
L'hyperbilirubinmie va se prsenter dans une multitude de pathologies qui n'ont rien voir avec le
mtabolisme hpatique de la bilirubine. La classification utilise chez l'homme est donc sans valeur chez le
cheval.
Ictre hmolytique: hyperbilirubinmie libre
Ictre hpatique: hyperbilirubinmie libre !
Affections extra-hpatiques diverses: hyperbilirubinmie indirecte (non-conjugue). Insuffisance
cardiaque, constipation, pneumonie, maladies infectieuses, syndrome de coliques
Jene et anorexie: hyperbilirubinmie indirecte (non-conjugue). Curiosit
Traitement l'hparine: hyperbilirubinmie peut s'observer car la phagocytose des GR augmente
(hmatocrite diminue).
LE BOVIN
On ne peut interprter l'hyperbilirubinmie selon le schma utilis pour l'homme. Une affection hpatique
grave ne se marque pas par des taux levs en bilirubine srique (15mg/l). Donc ce dosage ne peut servir
d'index sensible de troubles hpatiques chez cette espce. Ce n'est que lors d'une crise d'hmolyse
(parasitaire) que les taux augmentent significativement (20-80mg/l). Vu ce qui prcde, la bilirubinurie
est un signe biochimique rare et peu marqu. Elle se rencontre aussi lors d'actonmie. Sa dcouverte doit
s'accompagner d'examens complmentaires de la fonction hpatique avant de conclure avec certitude sur
l'existence d'une telle affection.
AUTRES ESPCES
L'interprtation du test de van der Bergh chez le mouton, la chvre et le porc est identique celle de la
bte bovine. Chez le mouton, des troubles hrditaires semblables ceux dcrits chez l'homme ont t
observs: dfection de la prise de bilirubine par l'hpatocyte, dfection de l'excrtion de bilirubine
conjugue.

PORPHYRIES
DFINITIONS
La molcule de porphyrine est une molcule cyclique o liaisons simples et doubles liaisons sont alternes
et absorbent la lumire visible, ce qui donne une couleur rouge au globule rouge. En fonction de leurs
structures ( pour les chanes latrales fixes aux pyrroles), on distingue trois porphyrines importantes d'un
point de vue diagnostic: uroporphyrine, coproporphyrine et protoporphyrine. La dtection des
porphyrines est base sur la dtection de la couleur rouge en fluorescence de solutions acides exposes aux
UV.
Les porphyries regroupent une srie de syndromes, maladies au cours desquelles des mtabolites de la voie
de biosynthse des porphyrines sont excrts par les urines et les matires fcales. Dans certains cas,
l'anmie accompagne la porphyrie, mais pas dans d'autres cas (les plus frquents).
CLASSIFICATION
porphyries primaires (gntiques): interruption partielle de synthse de l'hme avec apparition de
mtabolites intermdiaires en excs sous la forme de porphyrinogne (=porphyries essentielles).
porphyries rythropotiques: production des porphyries dans l'rythrocyte (trouble dans la moelle)
porphyries hpatiques: production excessive de porphyrines par le tissu hpatique (cytochromes,...)
(acquises): Exprimentalement, on peut provoquer soit une porphyrie
porphyries secondaires
rythropotique semblable une porphyrie rencontre chez l'homme ou chez la bte bovine, par un

empoisonnement avec du plomb ou de la phnylhydrazine soit une porphyrie hpatique par l'allylisopropyl-actyl-carbamide ou avec la dihydrocollidine.
HOMME
Chez l'homme, les porphyries induisent, lorsque les quantits de porphyrines sont excessives, des
prcipitations tissulaires qui se marquent par un syndrome cutan (le plus frquent. Prsence de pigments
en excs dans le derme, et photosensibilisation), des crises abdominales douloureuses (dues la
prcipitation de porphyrines dans les terminaisons nerveuses sympathiques), un syndrome neurologique
(paralysies les plus varies dues la prcipitation de porphyries dans les filets des nerfs moteurs).
BOVINS
Porphyrie congnitale rythropotique bovine
Frquence et localisation: C'est la maladie la plus rare et la plus svre; elle est hrditaire; se rencontre
chez les homozygotes
Aspects cliniques: signes plus ou moins marqus en fonction de la svrit de la maladie: coloration
brun-rouge des dents et des os (autopsie), coloration brun-rouge des urines, photosensibilisation,
fluorescence des dents et des urines sous UV.
Biochimie chez lanimal malade
- Urine: URO I, COPRO I, fluorescence rouge intense est nette avec la lampe de Wood.
- Bile et fces: COPRO I
- Plasma et rythrocytes: COPRO I et URO I abondants dans le plasma, fer srique normal, sauf
chez certains (hypersidrmie) et PROTO en supplment dans les rythrocytes.
Rponse hmatologique la maladie: anmie hmolytique frquente (d'o hypersidrmie),
normochrome et parfois macrocytaire, rythropose augmente: rticulocytes abondants, normoblastes.
globules rouges riches en porphyries, dure de vie plus courte associe une hmolyse. Le mcanisme
de l'hmolyse n'est pas connu.
Causes biochimiques de la maladie et des trouble: Dficience en cosynthtase, d'o le rtrocontrle
bloquant la synthse des porphyrines ne se fait plus, et la prophyrie produite est l'isomre I au lieu de
l'isomre III: apparition d'URO I et de COPRO I qui ont un effet hmolytique tant sur les cellules de la
moelle que sur celles du sang priphrique. Cette dficience peut atteindre l'expression du gne comme
la protine elle-mme. Mais une inactivit complte est incompatible avec la survie de l'animal. La
photosensibilisation est interprte selon le schma suivant: les porphyrines absorbent la lumire
400nm. Les lectrons sont excits par cette longueur d'onde, et lorsqu'ils retournent l'tat de repos, ils
peuvent librer de l'nergie sous la forme de lumire d'une longueur d'onde plus leve (>600nm) ou
transfrer l'nergie l'O2 qui donne des radicaux libres (oxygne activ). Ceux-ci dtruisent la
membrane du lysozome et librent des protases qui dtruisent la cellule.
Protoporphyrie rythropotique bovine
Rencontre chez la race Limousin (galement chez l'homme). Est uniquement responsable d'une
photosensibilisation des animaux, avec prurit. L'examen de laboratoire indique une augmentation de
PROTO IX dans les rythrocytes et les matires fcales. Les urines sont normales. La cause gntique est
un trouble rcessif li au chromosome sexuel (car la maladie n'a jamais atteint que des femelles) et
responsable d'une dficience de la ferrochlatase dans tous les tissus, dont le foie, d'o cette maladie est
galement appele "porphyrie rythrohpatique".
PORC
Dcrit en Nouvelle Zlande et au Danamark. D'un point de vue biochimique, c'est l'URO I qui est
dcele. Ne provoque pas de troubles svres: il n'y a pas de photosensibilit, les dents sont rougeatres.
CHAT

A t dcrit chez le chaton mle ne souffrant ni d'anmie ni de photosensibilit. Mais les dents sont
colores comme chez les porc atteints, et rouges sous UV. L'urine est de couleur ambre (jaune dor):
contient URO, COPRO et porphobilinogne. Une autre porphyrie a t dcrite chez le siamois. URO I,
COPRO I et PROTO se rencontrent dans les GR, les matires fcales et l'urine. Atteint de
photosensibilit, avec anmie et troubles rnaux.

TESTS DU MTABOLISME DU FER

HMATOLOGIE:
Anmie microcytaire hypochrome (aussi si inhibition de synthse d'hme, carence B6, Cu)
DOSAGE DU FER SRIQUE (SIDRMIE)
Les valeurs se situent autour du mg par litre. Ce dosage doit tre effectu sur des prlvements obtenus
sans aucune contamination en fer (idal: aiguille en nickel, absence d'hmolyse). Prlever suffisamment de
sang pour obtenir 3,5ml de serum ou de plasma hparin. Le plasma rcolt sur EDTA, oxalate, ou
citrate est inutilisable car ces anticoagulants fixent le fer empchant ainsi sa raction avec le chromogne.
Les chantillons hmolyss doivent tre refuss cause de lenrichissement en fer du plasma au dpart de
lhmoglobine.
Principe: le fer est libr de la transferrine en abaissant le pH du srum; les protines et lapotransferrine
sont limines par prcipitation et centrifugation; le Fe(3+) du surnageant est rduit en Fe(2+) avec de
lacide thioglycolique avant dtre complex un chromogne; labsorbance du complexe Fechromogne
est proportionnelle la [Fe] srique, le pH du milieu ayant t abaiss 4,5 pour obtenir un optimum
dabsorbance.
CAPACITS TOTALE ET LATENTE DU SRUM FIXER LE FER
La transferrine est normalement sature au 1/3, le dosage du fer srique donne la quantit de fer unie la
transferrine, la mesure de la "capacit latente de saturation en fer" consiste mesurer la quantit de fer
ncessaire pour atteindre une saturation 100% de la transferrine qui est dj partiellement sature dans
les conditions de lorganisme. La "capacit totale de saturation en fer" correspond la quantit de fer
transportable par la transferrine (= sidrmie + "capacit latente de saturation en fer")
Principe du dosage: un excs de citrate ferrique dammonium est incub avec du srum pour saturer tous
les sites de fixation de la transferrine (Fe3+ en excs); le fer ferrique non li est limin par addition de
MgCO3 (= adsorption du fer) et dun tampon; le mlange est centrifug et le fer du surnageant est dos.
FERRITINE SRIQUE
aucune corrlation ne peut tre tablie chez le chien entre les rserves en fer et la sidrmie, ou la capacit
totale de saturation mais une corrlation significative existe bien entre la concentration srique en
ferritine et les rserves en fer non hmiques du foie et de la rate. Cependant cofficient de dtermination
ne vaut que 14%, ds lors, mme si la relation est statistiquement tablie, elle n'est pas trs concluante
pour une utilisation pratique. De plus, il faut disposer danticorps spcifiques de la ferritine canine pour
faire cet examen (test RIA). Enfin, lors d'inflammation aigu, la ferritine peut augmenter, d'o cette
analyse doit tre couple celles des protines de l'inflammation et la vitesse de sdimentation. Dans les
cas latents de dficience en fer, et si l'hmoglobinmie est infrieure 10g/dl, toute diminution de la
ferritine srique signifie une dficience en fer dans 90% des cas, mme s'il n'y a aucun signe clinique
d'anmie.
PROTOPORPHYRINE RYTHROCYTAIRE LIBRE
(test peu sensible)
COLORATION DES GRANULES D'HMOSIDRINE
Prlever de la moelle osseuse et la colorer au bleu de Prusse. L'hmosidrine n'tant pas une forme de
rserve pour le fer, mais plutt une forme de stockage pour viter l'intoxication, cette approche peut servir
de mmoire tissulaire du mtabolisme du fer dans la priode qui a prcd le moment de l'examen.

AUTRES ANALYSES
turnover du fer in vivo
vitesse d'incorporation du fer dans les globules rouges
Remarques:
1 Chez le chien, un diagnostic de carence en fer qui serait tabli uniquement sur base d'un examen hmatologique n'est pas
valable. En effet, le fer est utilis prfrentiellement par les cellules prcurseurs des GR plutt que par les cellules (hpatiques)
qui synthtisent des cytochromes ou des protines fer. D'o l'examen hmatologique sera normal lorsque la dficience est lgre,
en dpit d'une dficience en cytochromes et en enzymes fer.
2 lors d'inflammation aigu, les protines de l'inflammation augmentent dans le plasma, mais le fer diminue. D'o le dosage du
fer srique et la capacit fixer le fer sont deux tests qui doivent tre coupls la recherche des marqueurs de l'inflammation.
3 lorsqu'un animal est trait au fer dextran (par voie intramusculaire), la sidrmie est haute pendant de nombreux jours en dpit
d'un tat de dficience en fer.
4 l'ge, la thrapie aux corticodes et les tats hypothyrodiens pourront affecter la sidrmie.

LES ANMIES
CLASSIFICATION
Anmie par spoliation sanguine: hmorragies aigus et chroniques (microcytaire et hypochrome), lors
d'intoxications (warfarin); de carence en fer due l'hmorragie, de parasitisme, de gastrite, d'ulcres (porc),
de tumeurs, de dficience de facteurs de coagulation.
A noter que le dosage du lactate sanguin permet chez le porc, de dterminer s'il pourra ou non survivre aprs une hmorragie.
Anmie par hmolyse: destruction des hmaties ou raccourcissement du temps de vie. Parasites sanguins,
(anaplasmose, piroplasmose), infections bactriennes (leptospirose; clostridium hemolyticum), affections
virales (anmie infectieuse du cheval), agents chimiques (cuivre chez le mouton; Plomb ; phnothiazine
chez le cheval; bleu de mthylne et propylne glycol chez le chat). Plantes toxiques (ricin, pousses de
chne, gent, renoncule, colchique, oignon sauvage); Lupus rythmateux; anmie hmolytique immune
(auto- ou non) du chien avec auto-agglutination des hmaties: test de Coombs positif (raction
antiglobulinique directe); affections mtaboliques (hmoglobinurie post-partum de la vache; maladie
hmolytique du nouveau-n),carence nutritionnelle:carence en phosphore de la vache laitire (rfr.C791).
Anmies lors de dficiences rythrocytaires: hmoglobine anormale, dficiences enzymatiques avec ou
sans hmolyse.
Anmie par dpression de la moelle osseuse: gents physiques (rayons X, isotopes radioactifs); agents
chimiques (fougre aigle, arsenicaux organiques, trichlorthylne); secondaire un tat pathologique
( infection chronique, nphrite interstitielle chronique (rythropotine), affections hpatiques chroniques,
insuffisances endocrines (thyrode; hypophyse), parasitisme intestinal, tumeur hmatopotique.
Anmie par carences: primaires: apports insuffisants, ou secondaires: tat pathologique induisant
l'anorexie.
Minraux: fer (porcelet, chien, chaton); cuivre (anmie semblable carence en fer); excs de molybdne:
entrane carence en cuivre; cobalt ou phosphore (ruminants)
Vitamines: B12; ac.folique; niacine; riboflavine; B6 (porc)
protines
BILAN BIOLOGIQUE PRATIQUER FACE UNE ANMIE
L'anmie se dfinit essentiellement par une diminution du taux de l'hmoglobine sanguine. Ds lors, il
faut doser l'hmoglobine l'acide cyanhydrique. Le calcul peut galement se faire comme suit: Hb = %

HCT x 1/3 (ou 2,7)= g/dL. En effet, l'hmoglobine occupe le 1/3 du poids frais des globules chez le
chien. Chez le chat, la bte bovine, les ovins, le cheval commun, et le porc, on peut diviser par 3,5; mais
par 2,7 chez le cheval de sang. En-dessous de 85% de la valeur de rfrence en Hb, il y a anmie!
faire ensuite le reste du CBC et calculer les indices rythrocytaires. On peut alors qualifier l'anmie
Examen sur frottis: vrifier si rgnrative ou argnrative (prsence ou non de rticulocytes).
Attention: le sang de cheval ne rvle jamais une rticulocytose!. La prsence de rticulocytes signifie
que la moelle rpond l'anmie (pas d'aplasie)
autres examens: biochimiques (en fonction des conclusions tires des rsultats obtenus ci-dessus (a
Plan daction:
Si anmie microcytaire hypochrome: dosage du fer.
si hyposidrmie: anmie inflammatoire, carence en fer, saignements chroniques (cancer; ulcres
digestifs;...)
si la sidrmie est normale: troubles de synthse de l'hme (intoxication au Pb; sidrmie parfois
augmente), anomalies de l'hmoglobine, carence en B6, cuivre (porc)
Si anmie argnrative non-microcytaire: (normocytaire ou macrocytaire)
Si normocytaire: insuffisance rnale/hpatique, endocrinopathies, aplasie de la moelle, inflammation
chronique.
Si macrocytaire: carence en folate, B12
Si anmie normochrome rgnrative:
hmorragie aigu (non-extriorise ncessairement: anvrisme rompu du cheval)
anmie hmolytique (augmentation de bilirubine libre):
- origine corpusculaire: hmoglobinopathie, altration de la membrane rythrocytaire, corps de
Heinz (chat)
- origine extra-corpusculaire (frquent en mdecine vtrinaire): agression toxique, mcanique,
trouble immunologique, atteintes virales/bactriennes/parasitaires

TESTS DE CAPACITS LHMOSTASE

GNRALITS
Rcipients propres, non rugueux, silicons si en verre, La prise de sang veineux sera faite en vitant
dintroduire de lair ou des liquides biologiques autres que le sang. Ajouter un anticoagulant convenable
dans la seringue avant la prise de sang. Une fois prlev sous anticoagulant, le sang sera, en fonction des
ncessits, immdiatement centrifug pour obtenir un plasma riche (PRP) ou pauvre en plaquettes
sanguines (PPP). Aprs centrifugation : recueillir dans une seringue en plastic silicon ou dans un tube du
mme type et rpartir en aliquotes de petits volumes. Les tests sont raliser dans les deux heures.
Rgle: Ne pas congeler la plasma sauf si vraiment l'analyse ne peut se faire rapidement
Anticoagulants: varie selon l'tude souhaite.
- comptage des plaquettes -> EDTA >>> Oxalate
- lvolution du caillot -> sans anticoagulants
- les facteurs de coagulation (en milieu citrate 0,38% final)
EVALUATION DES PLAQUETTES: TROUBLES QUANTITATIFS
Numration des plaquettes: effectuer dans les 4 5h, risque de sous-estimation
Mthode directe: Comptage manuel laide dun hmocytomtre. Solution 1% doxalate
dammonium comme diluant, les GR sont lyss aprs 10 min. Laisser sdimenter. La numration se

pratique laide dun objectif en contraste de phase. Ou comptage avec un compteur lectronique de
cellules.
Mthode indirecte sur frottis sanguins colors: permettent destimer une augmentation ou une
diminution du nombre de plaquettes
- < de 3 4 plaquettes/champ (x1000; en immersion)=signe dune thrombocytopnie
- 7 6 plaquettes/champ immersion = 100.000 plaquettes/l
- < 1 plaquette /50 G.R. =thrombocytopnie( vrifier si anmie)
- compter 100 leucocytes ainsi que le nombre de plaquettes par 100 leucocytes; rgle de trois.
Valeurs anormale: plaquettes <100.000/l de plasma
Rtraction du caillot: Test quantitatif et qualitatif. Mesure la quantit de srum apparaissant autour du
caillot dun sang rcolt sans anticoagulants. Si le srum ne se spare pas du caillot, il y a soit
thrombocytopnie, dfection de la fonction plaquettaire, concentration inadquate (trop faible) en
fibrinogne
Temps de saignement: Incision standardise sera ralise avec un appareillage spcifique au niveau de la
peau nue ou dune muqueuse. Temps normal: 1 5 minutes ; ne dpend que des plaquettes. Ce test
permet donc de dtecter une thrombocytopnie ou un dfaut fonctionnel des plaquettes
Examen de frottis colors de la moelle osseuse: Si le nombre de mgacaryocytes est normal ou augment,
alors que le nombre de plaquettes est en diminution; cela signe une destruction acclre des plaquettes
ou une consommation excessive en l'un ou l'autre endroit de l'organisme. Par contre, une diminution du
nombre des mgacaryocytes concomitante de celle des plaquettes explique la thrombocytopnie.
EVALUATION DES PLAQUETTES: TROUBLES QUALITATIFS
Test dagrgation des plaquettes: Sur un PRP (plasma riche en plaquettes) test avec des agents agrgeant
(permet d'apprcier l'attachement des plaquettes entre elles). Ces tests se ralisent laide dun
agrgomtre. Il sagit dun spectrophotomtre qui mesure en cintique lvolution de la turbidit dun
plasma contenant des plaquettes, une longueur donde de 500nm et par rapport un plasma dpourvu
de plaquettes. La mesure consiste soit dterminer, partir de lenregistrement, la vitesse initiale de
lagrgation, soit le pourcentage dagrgation obtenu sur x minutes dessai, par rapport un tmoin
normal, celui-ci atteignant une agrgation maximale (100%) au terme des x minutes du test. Effectu
37C. c).
Prparation de lchantillon: Sil faut vrifier uniquement ltat des plaquettes du patient, le plasma dans
lequel elles sont mises en suspension doit tre vWF+, son origine sera donc connue (il ne proviendra pas
du patient donneur des plaquettes). Sil faut vrifier uniquement la capacit dagrgation plaquettaire
du vWF plasmatique du patient, les plaquettes utilises dans le test seront reconnues comme normales
(issues dun autre donneur), et le plasma dans lequel elles sont mises en suspension sera celui du patient.
Dans les deux cas, lchantillon de plasma citrat recueilli chez le patient subit les oprations suivantes:
comptage des plaquettes, centrifugation, remise en suspension dans du plasma appropri
Activateur ajout au plasma: ADP, collagne, thrombine, adrnaline, acide arachidonique, PAF
Tests de rtention des plaquettes Apprciation de l'adhrence des plaquettes sur une surface anormale. Il
faut faire passer le sang sur une colonne standard contenant des billes de verre. Un dnombrement des
plaquettes est entrepris avant et aprs passage au travers de la colonne; + de 75% des plaquettes doivent
tre retenues sauf si dfection des plaquettes, maladie de Von Willebrand.
Examens morphologiques: Ils se ralisent en mme temps que la numration indirecte sur frottis de sang
color. Normalement, les plaquettes ont 2-4 M de diamtre et sont pour cette raison difficiles voir chez
le chien. Anormales, elles peuvent tre agrandies, ce qui survient lors de thrombocytopnie, suite
maladies dinfiltration de moelle osseuse, destruction ou utilisation excessive.
TESTS GNRAUX DE LA COAGULATION ET DE LA FIBRINOLYSE

Temps de coagulation du sang complet

Test de Lee-White: Mesure du temps de coagulation d'un sang complet incub 37C. Agitation toutes
les 30 secondes pour augmenter le contact entre le sang et la surface de verre, et pour dterminer le
moment de la coagulation. test peu satisfaisant
ACT ou temps de coagulation activ: Des tubes prts lemploi contiennent une substance telle que la
clite, qui augmente le contact et rend le test plus sensible que lors de la mesure du temps de coagulation
dans un tube capillaire, ou encore selon la mthode de Lee-White. Prendre deux tubes et jetter le premier.
45 segonde puis agiter toutes les 5 secondes jusqu ce quun dbut de coagulation soit dtecte: noter le
temps cet instant (=temps ACT)
Un allongement d'ACT signe une dficience de 95% au moins dun facteur, un traitement
lhparine, la prsence dun inhibiteur, une thrombocytopnie
vrification de la qualit du coagulum de fibrine: Normal (ferme et solide, avec un srum clair qui
apparat 1 2 h aprs la collecte); Anormal (friable et mou, se liqufie en 30 60 minutes). Causes:
fibrinolyse excessive;hypofibrinogenmie.
Tests de coagulation du plasma citrat
Tubes spciaux (tubes bouchon bleu): 9 parties de sang complet et 1 partie de citrate de Na.
Centrifuger 4C dans les 30 minutes pour obtenir un plasma pauvre en plaquettes. Aspirer le
surnageant avec une pipette plastique (silicone) ce qui permet d'extraire le plasma citrat. Faire
lanalyse immdiatement.
Temps de prothrombine (PT), OSPT, Test de Quick, Temps de Quick:
Mesure du temps dapparition du coagulum de fibrine dun plasma citrat aprs addition de facteur III,
Plipides, calcium en excs (recalcification)
Exploration des facteurs de la voie extrinsque et commune (VII, V, X, II, XIII, I), l'exception du
facteur tissulaire III (ajout pour raliser le test).
Un allongement est enregistr lors de dficience de 70% d'un des facteurs de la voie commune, du
facteur VII (extrinsque), < 0,5 g/L en fibrinogne.
Temps de thromboplastine partielle PTT, APTT:
Tests des voies intrinsque et commune
PTT: uniquement ajout de phospholipides
APTT: PTT standardis par ajout de kaolin, de clite ou dac. llagique. Se ralise comme le test de
quick. LAPTT est le temps mesur entre le moment daddition du Ca++ et le moment dapparition du
caillot. Allongement d'APTT: dficience > 70%, hypofibrinognmie, hparinisation, Facteurs
dficients. Raccourcissement de l'APTT: maladies inflammatoires.
Temps de thrombine :(Thrombin Clotting Time ou TCT):
Mesure du temps de formation dun caillot de fibrine dun plasma citrat, frais et recalcifi aprs
addition de thrombine et du coup Contrle du fibrinogne.
Un allongement est enregistr lors de <1g/L de fibrinogne, dysfibrinognmie, FDP en excs (> 40g/
mL), Hparinisation
TEST SPCIFIQUES DE LA COAGULATION
Dosage du fibrinogne:
Prcipitation la t de 56C sur tube hparin, mesure au rfractomtre. rcolte du sang sur EDTA, 2
tubes

 Test indirect la reptilase: La reptilase coagule le fibrinogne en 10 min 37C sans modifier les autres
facteurs de coagulation. Doser les protines totales avant et aprs traitement.
TCT: ajout de trombine en exces pour coaguler tout le fibrinogne. Mesure et comparaison du temps
de coagulation.
Dosage Immunologique

hypofibrinogenmie: coagulation intravasculaire diss. Insuffisance hpatique svre, hrditaire

hyperfibrinognmie: lors d'inflammation aigu, de noplasie.

Mesure des produits de dgradation de la fibrine et du fibrinogne (FDP)

Les FDP ne coagulent plus et restent en solution. Ils peuvent donc tre tests partir d'un chantillon de
srum. Les tubes du commerce utiliss pour cette mesure sont spciaux ( bouchon jaune et tiquette
jaune)
Principe: Fibrinogne coagul laide de thrombine, le srum est mis en prsence de particules de latex
charges danticorps antifibrinogne humain ce qui permet la dtection des FDP par agglutination. Ce
test est prvu pour lhomme, mais les ractions croises qui apparaissent sont acceptables pour son
utilisation chez les animaux domestiques.
Augmentation des FDP: diathse hmorragique, hmorragie interne importante, coagulation
intravasculaire dismine (systme fibrinolytique anormalement actif), phagocytose rduite (limination
ralentie des FDP).
Dosage de la fibrine monomre soluble
Anticorps monoclonaux dirigs spcifiquement contrela fibrine monomre) indicateur de coagulation
intravasculaire dissmine chez le porc.
Dosage du vWF
Tubes bouchon bleu (une partie de citrate + 9 parties de sang, centrifugation, aspiration du surnageant,
congeler le plasma -20C et l'envoyer
Immunolectrophorse: si >60%, chien normal; si 40-60%: chien porteur; si <40%: chien dficient; si
<7%: chien homozygote rcessif.
Immunolectrophorse deux dimensions: permet de dtect les 2 formes de vWF.
Test d'agrgation: les plaquettes ne sont pas trates la formaline (les plaquettes peuvent exprimer
toutes leurs potentialits physiologiques)
Test d'agglutination: Plaquettes sont fixes la formaline (elles ont perdu leur intgrit mtabolique et
lagglutination devient indpendante des tapes physiologiques normales qui interviennent dans
lagrgation plaquettaire).
Autres analyses spcifiques:
Test fonctionnel de complmentation: recherche spcifique du facteur incrimin dans la dficience.
Mlange plasma sain dlt pour un facteur choisi/plasma malade.
Tests immunologiques
Analyses spcifiques pour les facteurs VIII, IX et XII existent en laboratoire
Activit antithrombine III: rcolte sur plasma citrat, dfibrination (prcipitation, centrifugation),
dillution, ajout de trombine (raction avec lanti-T), ajout de fibrinogne en quantit fixe, mesure du
temps.

HYPERLIPMIES
hyperlipidmie: terme dsignant un chantillon de plasma trop riche en lipides (terme qui ne dsigne que l'tat de l'chantillon)
hyperlipmie: dfinit le syndrome spcifique dont souffre l'animal qui fait une hyperlipidmie

HYPERLIPMIES PRIMAIRES
Dficience en LPLipase est dcrite chez le chien Schnauzer nain et chez le chat. Dcouverte chez les
animaux, peu dimportance par rapport aux hyperlipmies secondaires.
Schnauzer hyperlipmiques primaires: en bonne sant. Quantits augmente en, VLDL, chylomicrons
souvent et effondrement possible des HDL.
Chat hyperlipmique primaire: hyperchylomicronmie. Cette maladie provoque des lsions au sein des
tissus suite la xanthomatose quelle induit. De nombreuses vacuoles lipidiques apparaissent dans les
hpatocytes, les cellules pithliales des tubules proximaux des reins, et dans les macrophages du foie, de
la rate et des ganglions lymphatiques. Des embolies dues aux chylomicrons surviennent dans les
capillaires glomrulaires et dans les vaisseaux sanguins interlobulaires
HYPERLIPMIES SECONDAIRES
Hypothyrodisme: La cholestrolmie volue inversment avec les taux en hormone thyrodienne (T4):
lors dhyperthyrodisme, la cholestrolmie sera basse, mais elle sera haute lors dhypothyrodisme.
[70% de la fT4 exprime en pmol/l]- cholestrolmie (en mmol/l) <-4 lors dhypothyrodisme.
Lors dhypothyrodie, le cholestrol est moins bien utilis du fait dune diminution de lactivit des
LPLipases. Ceci empche les changes TG/Cholestrol entres les LP riches en TG et les HDL, ce qui
ralentit la voie du transport inverse du cholestrol et son limination de lorganisme.
Chez le chien, le srum est clair avec une cholestrolmie normale modrment augmente, ou
lipmique (lactescent) avec ou sans hyperchylomicronmie, mais avec une hypercholestrolmie nette
(>7500mg/l).
Les animaux dont le plasma est riche en TG et en cholestrol sont susceptibles de faire de
lathrosclrose. Chez le Beagle, on a dcrit une hyperlipmie familiale accompagne dun
dysfonctionnement des thyrodes.
Diabte sucr insulino-dpendant: En labsence dinsuline correcte, le glucose ne pntre plus dans les
cellules cibles carences, il y a lipolyse des TG de rserve, ce qui se marque par: hypertriglycridmie
marque ( chylomicrons et VLDL), lgre augmentation du cholestrol; un profil dlectrophorse de
type I = riche en chylomicron et VLDL.
Leffet antilipolytique de linsuline ne se produisant plus, la mobilisation des graisses devient exagre, et
les FFA se retrouvent en quantits dans la circulation. En atteignant le foie, les FFA y provoquent une
inhibition de la lipogense, la glycolyse, activation de la noglucogense, la ctogense. Mais aussi:
acclration de la synthse hpatique de TG partir des FFA originaires des adipocytes (VLDL ),
rduction concomitante de lactivit des LPLipases priphriques (surtout des tissus adipeux), ce qui
accrot la triglycridmie VLDL- et chylomicron- dpendante; lgre hypercholestrolmie, faute
dchanges normaux entre LP, les VLDL et chylomicrons ne perdant pas leurs TG facilement.
Le srum de chiens diabtiques est souvent lactescent, avec ou sans chylomicrons: lhypertriglycridmie
est modre forte, et lhypercholestrolmie est faible modre.
Llectrophorse des lipoprotines montre une augmentation des pics 2 et au dtriment du pic 1,
suite un accroissement des VLDL (se retrouvent surtout dans le pic plutt que dans le pic 2) et un
diminution des HDL2. Mais laugmentation des VLDL ne sobserve pas toujours et les chylomicrons
peuvent donner lieu une migration en trois zones: la plus importante, entrele site de dpt et le pic ,
le second dans le pic , et le troisime dans le pic 1.
Pancratite aigu
La pancratite aigu peut tre caractrise chez le chien, par un srum clair enrichi en cholestrol
(augmentation lgre modre), ou par un srum lipmique avec ou sans apparition de crme au
sommet du plasma (enrichi en VLDL et en chylomicrons).
La cause de lhyperlipmie lors de pancratite aigu est mal comprise. On pense que lactivit LPLipase
est rduite. Chez le chien, lingestion de repas de graisses prcde frquemment les accs de pancratite
aigu.

 Chez le chat, la pancratite aigu est une maladie qui nest pas rare et dont la symptomatologie est
sensiblement identique celle de la lipidose hpatique. Maladies lies chez le chat.
Lipogense accrue du foie avec ou sans lipidose hpatique
Lorsque les besoins en nergie se font sentir, lanimal utilise dabord le glucose avant de sattaquer ensuite
ses TG de rserve pour les oxyder. Dans ce cas, il mobilise les TG des adipocytes et libre des FFA dans
la circulation gnrale. Une partie de ces FFA sera utilise efficacement par les muscles (cur, et m.
squelettiques), mais une partie sera utilise par le foie pour produire des TG dexportation qui entrent
dans la circulation sous la forme de VLDL.
Deux troubles peuvent se produire: soit le dpassement des capacits des hpatocytes et la lipidose
hpatique en est la consquence (sans hyperlipmie conscutive), soit un excs de production des VLDL
par le foie par rapport aux possibilits dutilisation par les tissus priphriques, et un hyperlipmie
importante en est la consquence.
Lhyperlipmie par excs de production de lipides par le foie sobserve donc: dans des situations
dalimentation inadquate; lors de trouble du mtabolisme des carbohydrates: glycogen storage disease /
diabte, lors dhypercorticisme, lorsque le foie prsente des troubles de cholestase, on observe toujours une
hyperlipmie chez le chien (cause ?: inconnue), mais pas chez le chat.
Syndrome de la lipidose hpatique fline Pathologie acquise qui rsulte dune accumulation de TG dans
les hpatocytes. Chez le chat, cette affection est frquente et est souvent mortelle. Les causes ne sont pas
bien dtermines.
Signes cliniques frquents obsit, hpatomgalie, lthargie, anorexie sont accompagns par les signes
biochimiques de la cholestase hpatique: P.Alc augmente (ALT faiblement augmente),
hyperbilirubinmie avec ictre, augmentation du NH3 si anorexie (car le chat ne peut synthtiser
larginine), dficience en vitamine B12 et en cobalt hpatique, en association des troubles
neurologiques. le diagnostic dfinitif est pos par lexamen de biopsies hpatiques.
Lassociation lipidose hpatique fline et pancratite aigu est frquente malheureusement les aliments
donns lors de pancratite exacerbent la lipidose (rgime pauvre, favorisant une mobilisation des TG
endognes pour couvrir les besoins en nergie), et inversment (rgime riche en nergie, pour viter la
mobilisation endogne et une surcharge hpatique lors de SLHF, ce qui est ngatif pour le pancras lors
de pancratite).
Lhyperlipmie quine transitoire et physiologique (sans lipidose hpatique) Chez les chevaux soumis
des efforts de courte dure, mais rpts et de plus en plus exigeants dun point de vue nergtique, la
mobilisation des triglycrides endognes se produit et accrot les FFA circulants. Il saccompagne dune
augmentation des TG plasmatiques ( des VLDL) durant leffort et aprs leffort, pendant une priode
de 30 60min.
Syndrome de lipidose hpatique quine ou Lipmie quine Facteurs prdisposants principaux: la race
(poney), le sexe femelle, ltat gestant (en fin de gestation), ltat lactant (au tout dbut de la lactation),
lobsit, la restriction alimentaire, et le stress. La cause de laffection rside dans la synthse hpatique
de VLDL suite une mobilisation des TG des adipocytes face des besoins nergtiques accrus, ce qui
sature les enzymes de dgradation (LPLipase). Chez le poney et chez lne, lhyperlipmie est un
dsordre mtabolique quil nest pas rare de rencontrer (avec une hypertriglycridmie >5g/l). Le sang
des animaux atteints est trs lipmique et linfiltration graisseuse des tissus du corps qui laccompagne
conduit laltration des organes et la mort. Les signes cliniques sont peu explicites (anorexie, ataxie,
dpression, dcubitus).
Lipidose hpatique bovine Chez la vache laitire, la lipidose hpatique sinstalle durant le premier mois
de la lactation lorsque les animaux appartiennent au groupe des vaches hautes productrices. Cette
lipidose apparat doffice chez la vache qui fait un dplacement de la caillette. A cette poque, les
besoins en nergie sont difficilement satisfaits pour couvrir la production laitire. Do lanimal mobilise
ses rserves lipidiques, et les FFA qui sont prlevs par le foie sont ensuite rexports sous la forme de
VLDL. Diagnostic: biopsie et dosage des TG, rapport FFA/cholestrol.

 Lipidose hpatique chez la poule et le dindon syndrome du foie gras si elle induit une chute de la
production en oeufs et peu de mortalit, mais syndrome hmorragique du foie gras si elle induit une
haute mortalit sans incidence nette sur les productions. Cette maladie survient chez des poules ges
hautes productrices, et elles meurent en prsentant des hmorragie du foie. Une autre maladie de la
poule qui prsente une infiltration graisseuse du foie, sobserve aussi lors dune carence en biotine. La
carence en biotine conduit au foie graisseux, une infiltration graisseuse des reins, des muscles, et mme
du SNC. Chez le dindon, la maladie prsente des caractristiques similaires avec le syndrome
hmorragique du foie gras dcrit chez la poule. La cause des troubles est dune part une trop grande
diffrence de temprature entre la nuit (froide) et la journe (trop chaude), et dautre part, un rgime
alimentaire carenc en protines (et en mthionine), mais riche en nergie. En consquence, les
animaux se gorgent de nourriture tt le matin, puis restent inactifs pendant les heures chaudes: le bilan
nergtique devient trs positif, les animaux ne dpensant pas lnergie quils consomment par une
recherche de nourriture tale sur toute la journe. Aprs avoir stock cette nergie dans les adipocytes,
ils vont les mobiliser les TG de ces adipocytes pendant la nuit (stress d au froid): les FFA librs sont
excdentaires pour les possibilits mtaboliques du foie (exportation sous forme de VLDL impossible
cause de la carence en mthionine: synthse des apoprotines et des phospholipides impossible). La
lipidose hpatique s'installe.

TESTS DE DTERMINATION DE LA LIPMIE

Prlvement sur tube EDTA aprs 12h de jene, car le plasma peut tre isol plus rapidement que le
srum, ce qui permet dviter la dnaturation des lipoprotines.
TEST DE RFRIGRATION DU PLASMA (EDTA OU HPARINE) OU DU SERUM
Plasma frais: sil apparat lactescent, cela signe la prsence de chylomicrons, de VLDL, ou des deux (seul
les lipoprotines de grande dimension sont visibles).
Plasma rfrigr (4C pendant 4 8 h. Le plasma ne doit pas avoir t congel): Si le plasma est clarifi,
les graisses surnageant au sommet du tube, ce sont des chylomicrons, Si le plasma nest pas clarif et sil
ny a pas daccumulation de graisses au sommet du liquide, ce sont des VLDL. Si le plasma nest pas
clarif et quil ny a aussi accumulation de graisses au sommet du liquide ce sont des VLDL et des
chylomicrons.
Signification clinique: la prsence de chylomicrons indique gnralement que lanimal ntait pas jeun
au moment de la prise dchantillon. La prsence de VLDL indique gnralement une mobilisation des
FFA endognes qui peut saccompagner dune mauvaise rponse dutilisation.
DOSAGE QUANTITATIF DES TRIACYLGLYCROLS PLASMATIQUES OU SRIQUES
Le plasma peut-tre conserv 4C jusqu lanalyse (7 jours maximum), ou -20C pour trois mois, ou
-70C pour plusieurs annes.
Mtode chimique: Extraction des TG plasmatiques laide de solvants des lipides, et prcipitation des
protines. Les PLipides et autres contaminants sont limins de lextrait lipidique par un matriel
adsorbant. Une fois isols, les TG peuvent tre pess ou quantifis par des mthodes enzymatiques ou
chimiques diriges contre le composant de glycrol: celui-ci est libr par saponification (KOH) ou par
transestrification. Il est ensuite oxyd par le priodate de Na en formaldhyde. Celle-ci ragit avec un
milieu ractif faisant apparatre un compos color lu 570 nm. Cette mthode est complique et peu
pratique pour des mesures de routine.
Mtode enzymatique:Srie de ractions couples ncessitant un milieu ractionnel qui contient 4 enzymes
et les substrats ncessaires:

1) TG (lipase) Glycrol + 3 FFA

2) Glycrol +ATP (glycrol kinase) 3-P-glycrol + ADP

3) ADP + PEP (pyruvate kinase) ATP + Pyruvate

4) Pyruvate +NADH + H+ (LDH) Lactate + NAD+
La disparition du NADH est suivie 340nm
3) Glycrol-3-P + O2 (glycrol-P oxydase ) Dihydroxyactone + H2O2
4) H2O2 + 4chlorophnol + 4aminophnazone HCL + 2H2O + 4(p-bq)-phnazone
Le 4-(p-benzoquinoneimino)-phnazone suivit 505nm

La prsence de glycrol libre est une source derreur lors dhypertriglycridmie, lors de mdications
contenant du glycrol, et dans les chantillons non frais.
DOSAGE QUANTITATIF DU CHOLESTROL
Le cholestrol est associ essentiellement aux LDL et aux HDL. On peut doser le cholestrol total, ou le
cholestrol associ lune de ces deux classes de LP (LDL-C, et HDL-C).
Mthodes chimiques: Le cholestrol ragit comme un alcool avec les acides forts. Les produits obtenus
sont des substances colores.
Mthodes enzymatiques: (les plus usuelles). Transformation des cholestryl esters en cholestrol libre; puis
oxydation du cholestrol avec production dH2O2

(1) ester de cholestrol (estrase spcif.) cholestrol libre + FFA

(2) cholestrol + O2 (cholestrol oxydase) cholest-4-ne-3-one + H2O2
On dose en suite soit lO2 consomm, soit lH2O2 produit par spectro grce du NAD(P)H ou un ractif color.

Mtode indirecte: Dosage du cholestrol des LDL (LDL-C) et des HDL (HDL-C)
Cholestrol des LDL: soit par ultracentrifugeuse, soit par calcul: LDL-C = choles. tot - HDL-C - TG/5
Cholestrol des HDL: par prcipitation
DOSAGE DES DIFFRENTES POPULATIONS DE LIPOPROTINES
Mthodes lectrophortiques: Soit sur papier, sur gel dagarose, sur gel de plyacrylamide ou sur amidon,
les deux derniers sparent en fonction de la charge ET de la taille contrairement aux 2 premiers supports.
Si les VLDL sont prsentes, elles se positionnent en avant des LDL lorsque le support est de lagarose ou
du papier, mais lorsque celui-ci est du polyacrylamide ou de lamidon, elles se placent en arrire des
LDL. Les chylomicrons reste sur le point de dpart. Aprs Coloration on obtient le lipoprotinogramme
Interprtation: les fractions (HDL) et (LDL) peuvent tre observes aprs lectrophorse sur gel
dagarose. est la fraction la plus rapide en raison de sa charge (fraction 1 dun protinogramme sur gel
dagarose, tandis que (LDL), plus lente, se situe dans la fraction 2 dun protinogramme). La fraction
des VLDL, appele pr- et positionne entre et (do son nom; sur gel dagarose), napparat
normalement pas sur le lipoprotinogramme dun individu sain et jeun Les chylomicrons restent sur le
lieu de dpt, mais ils napparaissent quen priode postprandiale ou lors de pathologies.
Sparation des lipoprotines par ultracentrifugation: les LP ayant des densits diffrentes, elles seront
spares par des ultracentrifugations prolonges faites diffrentes valeurs de g et diffrentes conditions
de densit du plasma, ou encore par laction combine de lultracentrifugation et de la prcipitation
fractionne. Lultracentrifugation permet disoler les lipoprotines des autres protines plasmatiques.

PATHOLOGIES DU MTABOLISME DES CARBOHYDRATES

PATHOLOGIE DU MTABOLISME DU GLYCOGNE GLYCOGEN STORAGE DISEASES OU GSD.

Troubles provenant soit de lincapacit dgrader le glycogne normalement, soit de lincapacit le

synthtiser: dans le premier cas, le foie devient volumineux et la glycmie se trouve dans la zone
hypo.
Maladie de von Gierke ou GSD1 (chien): dficience en G-6-Pase, do le glycogne saccumule
(hpatomgalie), mais aussi les produits finaux de la glycolyse: pyruvate, lactate. Le lactate qui est utilis
pour la noglucogense donne du G-6-P, lequel saccumule dans le foie. Lhypoglycmie est svre (100
mg/L ou 7 10x moins que la normale).
Tests: test de tolrance au glucagon, test de tolrance lpinphrine, et finalement, analyse de lactivit
G-6-Pase sur une biopsie hpatique.
Maladie de POMPE ou GSD II (vache, chien, caille): dficience en (14)glucosidase (maltase acide), un
enzyme qui ne se trouve ni sur la voie de la synthse ni sur la voie de la dgradation du glycogne. Cette
enzyme est lysosomal (il y dgrade les particules de glycogne) et existe dans tous les organes. Cette
dficience provoque le dpt de particules de glycogne qui diminue les fonctions cellulaires et provoque
une dficience cellulaire gnralise avec mort prcoce: le cur augmente de volume, ainsi que le foie.
Maladie de Cori ou GSD III (chien): Absence de rponse lpinphrine et au glucagon. Dficience en
amylo(16)glucosidase (enzyme dbranchant), do le glycogne saccumule sous la forme de dextrines
volumineuses. Symptmes: foie volumineux, retard de croissance, hypoglycmie.
Diagnostic: diffrentiel GSD I/GSD III: linfusion de galactose permet de corriger la glycmie si maladie
de Cori. Diagnostic spcifique: prlever des fibroblastes sous la peau et y doser lactivit de lenzyme
suspecte.
GSD VII. (chien g): dficience en PFK-1 de type M, ce qui limite la glycolyse musculaire et
rythrocytaire, et donc lutilisation du glycogne musculaire. Symptmes: myopathie, faiblesse musculaire,
hmolyse lors dalcalose leffort.
GSD VIII. (souris,rat): dficience en glycogne phosphorylase kinase, lenzyme qui, aprs avoir t
phosphoryle par la kinase AMPc-dpendante, phosphoryle la glycogne phosphorylase. Provoque une
hypoglycmie.
PATHOLOGIES DU MTABOLISME DU GLUCOSE DORIGINES ENDOCRINIENNES
DIABETE SUCRE (Diabte mellitus)
Le diabte sucr tire son nom de lobservation dune diurse sucre (mellitus). Chez le chien, on le
rencontre surtout chez la femelle ge et obse, tandis que chez le chat, il sagit des mles gs et obses.
Classification: On peut classer les diabtes, chez le chien, par un test de tolrance au glucose qui
sapprcie par la rponse de la glycmie et par la rponse de linsulinmie au test du glucose. Les valeurs
de linsulinmie, en rponse au test de glucose, permettent thoriquement de caractriser le type de
diabte dont souffre le chien. Aprs administration de glucose par voie intraveineuse:
- des taux bas en insuline signent le diabte de type I,
- des taux plus levs que la normale avant et pendant le test signent le diabte de type II,
- des variations normales avec un retard du retour aux valeurs normales: diabte de type III.
on peut tenter dy rattacher les diffrentes pathologies expliquant lapparition dun diabte:
linsuline peut ne pas tre synthtise (de naissance ou acquis lors dune pancratite ou pour une autre
cause (comme le stress chez lhomme, mais non confirm exprimentalement): cest le type I.
linsuline est anormale, soit quelle est immature soit que sa squence en Aa soit altre (ne reconnat
pas le rcepteur): ce serait le type II.

 les rcepteurs sont dficients et sont mal reconnus par lhormone, ce serait le type III; ou ils ne subissent
pas une maturation normale: ce serait le type II ou le type III.
des anticorps apparaissent dans les maladies auto-immunes, et se lient linsuline ou au rcepteur,
empchant la liaison entre le rcepteur et linsuline: ce sont les types II ou III.
Une intolrance au glucose peut rsulter daltration subies par linsuline, par son rcepteur, ou par des
anomalies de lvolution intracellulaire des complexes RI une fois forms. Ds lors, la classification des
diabtes en type I, II, et III est assez artificielle (surtout entre les types II et III), et elle nest daucune
utilit pour dcider du traitement.
En revanche, la recherche du mode de rponse linsuline doit tre une meilleure approche que celle
consistant rechercher le type de diabte telle quelle est encore dcrite pour le chien (recherche du type
I, du type II, et du type III par le test au glucose administr par voie intraveineuse). Comme les causes
molculaires de diabte peuvent tre trs diverses, il est en effet plus important pour le praticien de savoir
si lanimal rpond linsuline lorsque celui-ci souffre dun diabte, que de savoir quel type de diabte est
due lhyperglycmie du patient. Nanmoins, cette classification tant toujours retenue par les auteurs,
nous la dcrirons avec le test au glucose.
Diffrences avec lhomme: les animaux de compagnie et le chien en particulier font plus frquemment un
diabte de type I, mais 2% seulement des chiens ont un diabte juvnile. Ches les chiens et chats, il est
diagnostiqu le plus souvent vers 8-10 ans: les animaux sont en gnral obses, hyperglycmiques (lgers
svres), et ctogniques.
Causes des diabtes: hrditaires ou aquises
Diminution du nombre des cellules ou leur disparition, des infiltrations damylode. Des cas de diabte
peuvent sobserver lors de pancratite chronique menant linsuffisance du pancras exocrine (EPI).
La prsence en excs de certaines hormones normalement anti-insuliniques conduisent au diabte: un
excs de glucocorticodes (stress!), lhyperadrnocorticisme, un excs de catcholamines, de GH, de
glucagon (d un cancer des cellules scrtrices ou une infection bactrienne), de T4-T3, dstrognes
ou de progestrone (spontan ou noplasique; lors de gestation).
Chez le chien plus de 70% des animaux atteints de diabtes ont des anticorps dirigs contre linsuline ou
contre des antignes cytoplasmiques. Une autre cause courante de diabte chez le chien est la destruction
des cellules suite une pancratite ncrosante. Mais on ignore habituellement la cause dapparition dun
diabte lorsque celui-ci est diagnostiqu.
Traitement: Chez le chien et le chat (type I le plus frquent), linjection dinsuline est presque
toujours une ncessit.
Diagnostic biochimique du diabte
Glycmie: BV 450-750mg/L, CT 500-750mg/L, OV 500-800mg/L, CN 650-1180mg/L, CV 750-1115
mg/L, PC 850-1500 mg/L
Il est important dtablir un diagnostic diffrentiel si on se limite cette analyse, car lhyperglycmie peut tre due plusieurs
causes: diabte insulino-dpendant, hypercorticisme, pinphrine (stress, post-exercice, chez le chat), postprandiale (=animal
non jeun), pancratite aigu, tumeur du pancras endocrine (des cellules scrtant le glucagon), mdicamenteuse (diurtiques,
morphine, thylne glycol).
Mtodes:
Recherche du pouvoir rducteur du glucose avec ractif color, plus utilises
Mthodes enzymatiques: aussi bien utilisables avec du srum que de lurine.
Glucose oxydase + peroxydase et colorant (Les bandelettes utilises pour dtecter le glucose dans les
urines font appel au mme principe.)
Hexokinase + NADP+ et G-6-P-dshydrognase, mesure de labsorbance du NADPH.

 Glucose dshydrognase Lenzyme transforme le glucose en gluconolactone en librant une

molcule de NADH + H+.
Test de tolrance au glucose chez le chien (et le cheval)
OGTT (oral glucose tolerance test): Glucose administr per os, sang
prlev toutes les 30 minutes pendant 3 heures. Normalement le retour
la normal se fait dans les 2h chez le chien et 6h chez le cheval, la
glycmie maxximum est dtecte entre 30-60 minutes chez le chien, 2h
chez le cheval.
IVGTT (intravenous glucose tolerance test): le chien est mis jeun
pendant 16 24h. Ici cest linsuline que lon dose. Le premier pic
correspond la libration dinsuline prsynthtise ( 10 minutes), le
2eme la lybration dinsuline nosynthtise ( 30 minutes).
Test de tolrance au glucose chez le chat: Certaines tudes suggrent que le chat peut tre atteint, comme
chez lhomme, de deux formes de diabte (type 1 & 2). le test de stimulation au glucagon permet de les
distinguer clairement.
Mtode: mise jeun pendant 12 heures, doser linsulinmie 24h avant le test au glucagon, administrer 0,5
mg glucagon/chat en 30 secondes, prlever du sang juste avant dadministrer le glucagon (sur tube sec), et
5, 10, 15, 30, 45, et 60 min aprs infusion de lhormone. A 5 min, on vrifie la premire phase de
scrtion, et entre 30 et 60 min, on vrifie la seconde phase de scrtion, doser le glucose et linsuline (par
RIA, avec un kit valid pour le chat).
Interprtation: Le glucagon provoque normalement une hyperglycmie, laquelle induira une scrtion
dinsuline.
a) Rponse de la glycmie (ne permet pas de distinguer entre les deux types de diabtes)
Chat obse, non diabtique: la glycmie basale (870 mg/L) est < celle du chat maigre et bien
portant (1,09 g/L)
Chats diabtiques de type I ou II: la glycmie est toujours beaucoup plus leve que chez les chats
non diabtiques. Lintolrance au glucose est manifeste dans les deux types de diabte.
b) Rponse de linsulinmie (permet de distinguer les deux types de diabtes)
Chat normal: il y a accroissement de linsulinmie, un pic prsentant un maximum entre 10 et 20
minutes aprs infusion du glucagon;
Chat obse, non diabtique: linsulinmie basale (15,2 U/ml) > celle du chat maigre (8,2 U/ml)
Diabtique de type I: la concentration srique basale en insuline est <14,7 U/ml (=valeur du chat
de rfrence moyen + 2 SD), et ne varie jamais au-dessus de cette valeur nimporte quel moment
du test.
Diabtique de type II: linsulinmie basale est = ou > celle du chat moyen normal + 2 SD (=14,7
U/ml), et aprs infusion du glucagon, elle est galement = ou > la valeur basale + 2 SD du chat
moyen de rfrence nimporte quel moment du test.
Dosage de la fructosamine srique (chien) ou Hb glycate: Lintrt de cette approche rside dans le fait
que les symptmes de PU-PD, dhyperglycmie et de glucosurie peuvent non seulement tre des signes de
diabte, mais aussi de stress, dusage dun tranquillisant tel que celui de la xylazine, ou mme dune
atteinte rnale primaire avec glucosurie. De plus, le dosage de la glycmie ne donne quune valeur
ponctuelle, un moment donn, de ltat du malade sans fournir dinformations sur son tat de sant
pendant les jours et les semaines ayant prcd le jour de la prise de sang.
Dosage de la lipmie et de lactonmie: Comme le glucose est mal utilis chez le diabtique, celui-ci va
tenter dutiliser ses graisses

pour satisfaire les besoins en nergie. Do lobservation dune hyperlipmie chylomicrons et VLDL, et
une augmentation des FFA circulants. Il y a galement synthse de corps ctoniques et de cholestrol
partir des FFA.
Acidose mtabolique et modification de la balance des lectrolytes: acidose provoque par lapparition des
corps ctoniques, et fuite du glucose par les urines
Analyse durine:
Glucosurie: indique que le seuil rnal est dpass. Attention: une glucosurie non pathologique peut
sobserver aprs un repas trs riche en carbohydrates (1-2h aprs le repas); un diabte rnal peut en
tre responsable (rare)
Densit urinaire: normale leve, malgr une polyurie.
Protinurie: sobserve chez 1 chien diabtique sur 10.
Ctonurie: peut sobserver en priode de ctoacidose, mais ce nest pas la signature dun diabte car la
ctonurie sobserve aussi lors de jene, et ne sobserve pas lors de diabte lger.
Infection vsicale possible (glucose -> croissance microbienne)
HYPERINSULINMIE OU TUMEUR DU PANCRAS EXOCRINE
La majorit des tumeurs du pancras endocrine scrte des hormones en excs. Les principaux cancers
produisent de linsuline ou de la gastrine en excs. Des cancers productions excessives de glucagon ou de
somatostatine ont t dcrits chez lhomme, mais pas chez les animaux domestiques. Lhyperinsulinisme
est habituellement d un adnome ou un carcinome (cause la plus frquente chez le chien) des cellules ,
mais la symptomatologie dhyperinsulinisme peut avoir une origine extrapancratique. Les animaux
souffrent dune dficience dapport de glucose au SNC, ou ne peuvent librer des catcholamines. Do
lutilisation de loxygne par le cerveau sen trouve rduit: les signes sont donc ceux de lhypoxie.
SIGNES CLINIQUES

crises nerveuses, et convulsions (si glycmie <20 mg/dl),

faiblesse musculaire et incoordination (si glycmie <35 mg/dl),
dpression et modification du comportement (lthargie) (si glycmie <50 mg/dl),
polyphagie, et nause (si glycmie <60 mg/dl), syncope.

Le coma peut apparatre quand lhypoglycmie est forte. Lhypoglycmie persistante entrane la scrtion
des hormones antagonistes (glucagon, pinphrine). Lpinphrine rduit la prise de glucose par les
muscles et les scrtions dinsuline; elle augmente la glycognolyse et la scrtion de glucagon. Le
glucagon corrige lhypoglycmie en stimulant la noglucogense et la glycognolyse hpatique.
hypoglycmie postprandiale ou au cours du jene (<60-50mg/dl) est la marque principale; dans les cas
lgers: la glycmie peut tre normale jeun. Pour la provoquer, agir squentiellement: donner des repas
pauvres en carbohydrates pendant 1 semaine; si pas dhypoglycmie: soumettre lanimal un jene de 24
h; si pas encore dhypoglycmie: faire suivre le jene de 24h par une activit physique lgre. Si
lhypoglycmie apparat lune de ces tapes, prlever du sang pour y doser linsuline: les taux sont
toujours > 30 U/ml lors dhyperinsulinisme.
DIAGNOSTIC

Dosage de la glycmie (hypoglycmie <60-50 mg/dl).

Dosage subsquent de linsulinmie (hyperinsulinmie interprandiale).
Valeurs des rapports: Insuline(U/ml)/glucose (mg/dl); Rapport amend: (I x 100)/G - 30; Glucose
(mg/dl)/Insuline (U/ml)
Dosage de la proinsuline
Dosage du peptide C: Ladministration dinsuline exogne affecte les taux de peptide C en situation
normale, mais pas lors dhyperinsulinisme (chez lhomme).

DIAGNOSTIQUE DIFFRENTIEL

Tumeurs extra-pancratiques
Maladies diffuses du foie
Hypoglycmie des chiens de chasse (chien maigres)
Hypoglycmie favorise par la cachexie (malabsorption) et par une sous-alimentation en phase de
production accrue .
Bactrimies
Insuffisance hypophysaire: production insuffisante en GH et hypoadrnocorticisme qui conduit une
dficience en glucocorticodes
Drogues
Vidange gastrique trop rapide est une cause postprandiale dhypoglycmie

PATHOLOGIES PAR INSUFFISANCE DAPPORTS

Hypoglycmie du porcelet nouveau-n: Les porcelets ne disposent pas de rserves nergtiques la
naissance. Elles se rsument 30 gr dhydrate de carbone (dont 15 g de glycogne par 100 g de foie
humide, ce qui est trs lev), et 10 g de graisses par kg de poids vif.
Agneaux exposs au froid
Sous alimentation du BV
Acidose mtabolique alimentaire (ingestion en excess de glucides fermentiscible trensform en ac lactique
dans le rumen)
Troubles hrditaires

EPREUVES DE FONCTIONNEMENT RNAL

TESTS SANGUINS: MESURE DE L'AZOTMIE
URE SANGUINE: Sur sang total, sur srum, ou sur plasma. Le sang est prlev sans anticoagulant ou sous
anticoagulant dpourvu d'azote en fonction de la mthode utilise (EDTA, Hparine), centrifug, et le
surnageant (plasma) est test par:
Mthode l'urase: dosage de la vitesse de disparition du NADH 340nm
Mthode de condensation au diactyl-monoxime: Donne un compos color virant au rouge. Donne
des colorations galement en prsence d'acides amins basiques ( raliser sur plasma ou srum
dprotinis).
Mthode de Berthelot couple l'urase: Provoquer la libration de NH3, et doser ce dernier par la
mthode de Berthelot (+ ractif de phnol et d'hypochlorite en prsence de nitroprussiate comme
catalyseur: une coloration bleue apparat en prsence de NH3).
Electrode spcifique, ammoniaque-sensible.
Bandelettes ractives: Estimation semi-quantitative permettant destimer grossirement les valeurs du
BUN (10, 20, 40, et 60 mg dazote urique par dl). Cette mthode ne peut remplacer une mthode de
dtermination prcise.
Interprtation:
Chute: apport azot de la ration est trop faible, excrtion accrue de l'ure lors de surhydratation, stade
terminal de la gestation. au stade terminal des grandes insuffisances hpatiques, signe d'une dchance
irrversible de la fonction urognique du foie: shunt portosystmique congnital ou cirrhose hpatique.
Augmentation: syndrome de rtention azote (azotmie) lorsque l'ure dpasse 0,5 g/l. Eliminer les
causes alimentaires, les causes inflammatoires puis penser aux causes prrnale: dshydratation, choc
hypovolmique, insuffisance cardiaque, diminution de la rabsorption du Na: insuffisance corticosurrnalienne; rnale primaire (DU faible), post-rnale: occlusion, rupture.

Note: Le terme urmie est utilis lorsque lazotmie (lvation simultane dure et de cratinine) se manifeste en mme
temps que des signes cliniques dinsuffisance rnale, savoir: anmie, polyurie-polydipsie, vomissement, amaigrissement. Dans
les autres cas, on ne peut parler durmie, mais d augmentation des valeurs de lure sanguine .
CRATININE SANGUIN : Toute la cratinine excrte provient de la cratine endogne. La cratine n'est
pas limine par les reins: sa clairance rnale est NULLE. L'excrtion rnale se fait uniquement par
filtration glomrulaire.
Mthode colorimtrique: la raction de jaff qui est utilise dans tous les laboratoires (la mthode la plus
rpandue) se base sur une raction entre la cratinine et une solution de picrate alcalin. Une coloration
rouge apparat et peut tre estime par colorimtrie. , la lecture d'absorbance doit tre faite en cintique
de coloration, et non en point terminal
Mthode enzymatique: mthode actuellement encore trop coteuse pour un usage en routine
Interprtation:
hypocratininmie: perte significative de la masse musculaire, gestation (dbit cardiaque augment
filtration glomrulaire galement)
hypercratininmie: m^me interprtation que pour lure. Augmente galement en cas dingestion de
viande cuite, myosite aigu et traumatismes musculaires svres.
TEST DE CONCENTRATION DE L'URINE
Polydipsie primaire: elle entrane une polyurie de compensation. Si la prise d'eau est empche, la
polydipsie n'existe plus, et la polyurie s'arrte galement.
Polyurie primaire: elle entrane une polydipsie de compensation. L'arrt de prise d'eau n'empche pas la
polyurie: diabte insipide (rnal ou non), hypercorticisme: la nature de l'aberration tubulaire n'est pas
connue.
On peut aliser un test de concentration urinaire Lorsquun diagnostic prcis ne peut pas tre fait face
la coexistence dune polyurie et dune polydipsie et de la persitance dune urine de basse densit (<1,03
chez le chien, et <1,035 chez le chat) et si lanimal prsente des signes de dshydratation. Lorsque cette
situation existe, une privation d'eau aura pour effet de stimuler la scrtion d'ADH, hormone qui retient
l'eau. Ce test est parfaitement indiqu (spcifique) pour vrifier directement sil y a ou non un diabte
insipide (hypophysaire ou rnal).
Ne pas faire de test de concentration urinaire si lanimal prsente une urmie, et si il est dshydrat.
Dangereux!
Privation abrupte d'eau. prise de sang et doser lure 12h plus tard ou toutes les 2h/h/30min si polyurie.
arrter le test si la densit atteint progressivement des valeurs 1,03 chez le chien et 1,035 chez le chat;
si les valeurs de densit restent identiques deux fois conscutivement; si l'animal pert plus de 5% de son
poids de dpart; si la valeur de lure sanguine atteint des valeurs suprieures celles des valeurs de
rfrence.
Interprtation: Si la densit atteint des valeurs 1,03 (1,035: chat) ou si le rapport urine/plasma vaut 3/1,
lanimal fait un diabte insipide psychogne ou est normal. Si la densit natteint pas les valeurs de 1,03
(1,035), il y a trois possibilits: lADH nest pas libre (=diabte insipide central); dans ce cas, lurine a
souvent une valeur de 1,001-1,006 en densit; les nphrons ne peuvent rpondre lADH (=diabte
nphrogne) les reins nont pu rpondre cause dune maladie rnale (dficience plus de 50%).
Privation graduelle d'eau: Lors que lanimal soufre de PU/PD depuis longtemps, la mdullaire a perdu
son gradient osmotique propre. Et en ralisant une privation graduelle, on russit parfois recrer le
gradient osmotique qui avait disparu. Ralisation identique la procdure de la privation abrupte, mais
en privant l'animal graduellement de son eau pendant 1 2 semaines. Mmes interprtations que en 1),

mais il faut y ajouter les causes de la disparition du gradient osmotique, savoir la polydipsie
psychognique et lhyperadrnocorticisme.
Si lun de ces deux test est positif, il faut faire le test suivant:
Test de concentration par un apport d'ADH exogne: Test de privation abrupte deau mais avec une
injection dADH
Interprtation:
Si la densit 1,03 (1,035), diabte insipide hypophysaire (origine noplasique ou autre)
Si lurine a une densit <1,03 (1,035), faire lpreuve au solut sal hypertonique pour vrifier les
nphrons. Si lurine est de densit 1,001-1,006, on peut penser un diabte nphrognique (nphrons
insensibles lADH cause dune hypercalcmie, hypokalimie, ou hyponatrmie,lhypercorticisme, un
mylome, l'amylodose, la pylonphrite, certaines drogues lors de thrapie, ou congnitale (rcepteur
non reconnu) Si une rponse partielle est observe (densit 1,01-1,016), cela signe une rduction acquise
de la libration centrale dADH associe une nphropathie (insensibilit lADH)
Test au solut hypertonique (Willard) Permet de diffrencier le diabte insipide nphrognique du diabte
insipide hypophysaire compliqu dune disparition du gradient osmotique de la mdullaire, et du diabte
insipide nphrognique compliqu par ce mme trouble. Test peu pratique raliser. La perfusion dune
solution hypertonique de NaCl permet de restaurer le gradient osmotique de la mdullaire, la libration
dADH par lhypophyse tant stimule galement.
Procdure: Administrer de leau avec une sonde gastrique (20ml/kg), et perfuser ensuite une solution sale
(2,5%; 0,25ml/kg/min) pendant 45 min. Mesurer le volume urinaire pendant trois priodes de 15 min
pendant la perfusion, et pendant une priode de 45 min aprs la perfusion.
Interprtation
Si volume durine inchang, administrer de lADH et vrifier. si lurine se concentre: diabte insipide
hypophysaire avec perte du gradient osmotique de lamdullaire; si lurine ne se concentre pas: diabte
insipide nphrognique.
Si Volume diminu (normal chez un sujet souffrant de potomanie avec gradient mdullaire dtruit et
restaur au cours du test): diabte insipide psychogne avec disparition du gradient osmotique de la
mdullaire.
TESTS DE CLAIRANCE ET D'LIMINATION DE COLORANTS
Rapport entre la quantit d'une substance apporte par le plasma au niveau du rein, et la quantit de
cette substance limine par les reins.
Cl= [S]urine . Vol urinaire sur une sec / [S]plasma = S excrt par sec/ [S]plasma
faire boire abondamment le sujet, ce qui amliore la diurse et rduit les erreurs de dosage dans l'urine.
Applications en mdecine vtrinaire
Inuline: La clairance de l'inuline exogne peut tre calcule aprs avoir inject une dose d'attaque (en
IV), et infus ensuite une dose d'entretien pour maintenir constante la concentration plasmatique. Aprs
quilibration, on vide compltement la vessie (rince avec une solution strile de NaCl 0,9%) (=to), et on
recueille ensuite l'urine pendant un temps suffisamment long pour pouvoir calculer la clairance (le
volume urinaire recueilli doit tre suffisant pour limiter les erreurs de calcul.
Cratinine exogne: L'injection de cratinine par voie IV est une mthode qui est parfois prconise
pour viter l'cueil des limites du dosage par la mthode de Jaff: la concentration plasmatique tant
plus importante suite la prsence de cratinine exogne, l'erreur du dosage est plus limite face aux
chromognes non-cratinine.
Cratinine endogne: Les techniques prcdentes tant lourdes raliser, on prfre malgr tout raliser
la clairance de la cratinine endogne. Prlever du sang pour doser la cratininmie, bien vider la vessie
avant de commencer l'opration de rcolte d'urine partir de to (la rincer avec du NaCl 0,9% strile).
Ensuite attendre un certain temps (20 min minimum) et prlever toute l'urine contenue dans la vessie,

en la rinant avec le NaCl 0,9%: tout le liquide recueilli au cours de l'opration reprsente le volume
urinaire de 20min (le NaCl du lavage inclus), ce qui permettra de calculer UV, soit la quantit de
cratinine ayant t excrte durant la priode t choisie (20 min). Il existe de grandes variations d'un
animal l'autre; en d'autres termes la mesure de la clairance de la cratinine permettrait de dmontrer
si la filtration glomrulaire diminue ou non si la valeur de la clairance du patient a t dtermine avant
son tat de maladie, lorqu'il tait encore en bonne sant. Ce qui n'est jamais connu.
Acide para-amino-hippurique exogne (PAH): Ce test est utile pour calculer le flux sanguin rnal ou flux
plasmatique rnal. Le PAH n'est pas mtabolis; il est excrt rapidement par filtration et scrtion
tubulaire. Si la dose injecte est faible (IV), on admet que la totalit du PAH prsent dans le plasma est
pur en un seul passage: la clairance mesurera donc le flux plasmatique rnal et la fraction de filtration.
Test au sulfanilate: Ce test mesure la vitesse de disparition du sulfanilate du plasma (chien et
chat). Le sulfanilate de soude est excrt par filtration glomrulaire : ce serait la seule voie d'excrtion
du colorant. permet de dtecter une nphrectomie unilatrale chez le chien sain, soit une
"altration" de 50% des nphrons (chat)(plus sensible que l'ure et la cratinine)
Test d'excrtion du phnylsulfophtaline (PSP) (chien) Ce colorant est limin par scrtion tubulaire
proximale: comme le flux sanguin tubulaire est faible, c'est le flux du sang aux tubules qui est le facteur
dterminant de la quantit de colorant excrt par les reins et non la capacit de scrtion tubulaire.
Vider la vessie, injecter en IV, dosage par absorbance de lurine aditionne de NAOH et prleve entre
la minute 15 et la minute 20. si % excrt <30%, anormal.
Test de disparition plasmatique du PSP: Mme principe que pour le sulfanilate, mais le PSP tant li
majoritairement aux protines, sa distribution est limite l'espace vasculaire et l'quilibre est atteint
plus rapidement qu'avec le sulfanilate.

PROTEINURIE
GNRALITS:
La protinurie est physiologique en dessous de 20 mg/Kg/J chez le chien, et de 29 mg/Kg/J chez le chat.
Augmentations transitoires:
Protinuries prglomrulaires fonctionnelles: non dcrit chez lanimal (fievre, effort, stress)
Protinuries prglomrulaires par surcharge tubulaire: Chez le nouveau-n (veau), une protinurie peut
se prsenter cause d'une absorption trop importante des protines du colostrum, riche en
immunoglobulines.
CAUSES
Protinurie prrnale:
Surcharge glomrulaire: protines plasmatiques de bas poids molculaire, ces protines tant libres en
excs dans le plasma et passant le filtre glomrulaire ex:gammapathie monoclonale,, hmolyse
intravasculaire excessive, ehrlichiose.
Surcharge tubulaire: protines plasmatiques de bas poids molculaire, ces protines tant libres en
excs dans le plasma: bien quelles passent normalement le filtre glomrulaire (phnomne
physiologique), elles sont trop nombreuses, et les capacits de rabsorption tubulaire ne parviennent pas
corriger le phnomne. Ceci survient par exemple, lors dcrasement musculaire: ce qui gnre une
myoglobinmie en excs conduisant une myoglobinurie
Protinurie rnale
Protinuries glomrulaires: Plus commune et svre. altration des capillaires glomrulaires suite des
dsordres primaires: inflammation, noplasies, maladie de la membrane basale; dsordres secondaires:
dpts de complexes immuns, amylodose, hyperfiltration, hyperadrnocorticisme. L'amylodose et les
glomrulonphrites aigus et chroniques (infectieuses ou toxiques) sont les principales causes des
protinuries glomrulaires chez les animaux: toute protinurie svre constate en absence de globules
rouges ou de globules blancs dans les urines, peut tre interprte comme tant dorigine glomrulaire.
Protinuries post-glomrulaires, ou tubulaires: En gnral, les tubulopathies entranent une protinurie
modre. Elle sont occasionnelles chez le chien. Elles ne peuvent tre dtectes par les mthode semi-

quantitatives habituelles du fait de la faible concentration protique. Causes: cystites, prostatites, lithiase
urinaire, urtrite, pylite, affections vaginales chez la femelle.
Protinuries post-rnales: Passage de protines dans l'urine au-del des tubules (
=passage de sang et
d'exsudat). Causes: cystites, prostatites, lithiase urinaire, urtrite, pylite, affections vaginales chez la
femelle.
MTHODES DE DTECTION (DOSAGES QUALITATIFS) ET DOSAGES QUANTITATIFS
Dosage qualitatif: Avec bandelette dont la couleur change en prsence de protines en solut mais il faut
que le pH soit stabilis.
Faux +: pH alcalin des urines, sdiments urinaires trop riches (sperme), pus, mucoprotnes
Faux - : protnurie globuline; concentration insuffisante en prot, concentrat en sels

Dosage semi-quantitatif:
Faux +: urates, PO4-, drogues
Faux -: urine alcaline
TEST DE HELLER: HNO3 dans un tube lurine reste au dessus. Si lurine est normale, formation dun
anneau color la surface de sparation. Si il y a des mucines, une zone nbuleuse se localise au dessus de
la surface de sparation; Si il y a des Mucines et de lalbumine, une zone nbuleuse et un anneau blanc
sont prsent.
RACTIF DE ROBERT: HNO3 concentr + sulfate de Mg. 2Ce ractif est mis au fond d'un tube, et
reoit en surface l'urine dpose doucement: un anneau blanc apparat l'interface, et l'importance est
fonction de la quantit de protines prsente dans l'urine.
Inconvnients: il faut disposer dune urine limpide: la centrifuger avant analyse est toujours prfrable.
Attendre 2 3 minutes avant la lecture lorsque l'urine contient peu de protines, le temps d'apparition du
prcipit tant allong. l'urine riche en ure donnera un anneau blanc cristallin (=nitrate d'ure), anneau
qui disparat si on dilue l'urine 2x. Mais si lanneau est d lalbumine, il peut disparatre suite cette
dilution si la concentration initiale est trop faible. Rsultat faussement ngatif avec les protines de
Bence-Jones. Celles-ci tant thermosolubles et ne prcipitant pas en milieu acide.
Acide sulfosalicylique: solution 5%: intressant, car donne de bons rsultats mme si lurine est alcaline.
En consquence, ce test est prconis en pratique journalire, et en association avec la recherche
qualitative par bandelette. solution 20% ou comprims.
Dosage quantitatif:
Mthode de Bradford: Bleu de Coornassie se lie aux protnes et dplace absorbance de 465 595 nm.
Rapport protne/cratine urinaire = valeur seuil au-del de laquelle on peut dire que la protnurie nest
plus physiologique mais pathologique. Chien: valeur > 1 mg/l si pertes protques > 20 mg/kg/j. Chat:
valeur > 5 mg/l si pertes protiques > 30 mg/kg/j(CT)
Clairance fractionnelle de lalbumine Permet de suivre lvolution de laffection glomrulaire:
albuminurie/albuminmie x cratinmie/cratinurie.
Analyse fine dune Protnurie:
Electrophorese sur acetate de cellulose apres concentration des urines pour obtenir 30g prot/L
Electrophorse en gel de polyacrylamide: permet de sparer les prot en fonct de leur poids molculR,
donc distingtion des protinuries tubulaires (PM < 50 000) ou glomerulaires (> 50 000)
Immunodiffusion

MARQUEURS PROTIQUES DE LINFLAMMATION

MARQUEURS
Marqueur ngatifs, diminuent avec linflammation: albumine, transferrine, ZN, Fe, Ca, vit A et E
Marqueur positifs, augmentent avec linflammation:
Rgion 1: 1-antitrypsine, orosomucode (1-glycoprotine acide)
Entre les : inter--trypsine inhibiteur.
Rgion 2: cruloplamine, haptoglobine, 2-macroglobuline
Zone : fibrinogne, complment C3
Zone : CRP (protine C-ractive); SAP ou amylode P srique (associ CRP), SAA ou amylode A
srique
Le profil lectrophortique sera trs modifi lorsqu'un phnomne inflammatoire aigu (et chronique
fortiori) se produit. Celui-ci se produit avant les signes cliniques.
Un marqueur est bon si sa concentration varie fortement, il y a 3 groupes de marqueurs:
Rponse modre (+50%): Cruloplasmine
Rponse marqu (+ 250%): 1-glycoprot, 1-anti-trypsine, chymotrypsine, haptoglobine, fibrinogN
Rponse tres marque (+ 1000 x): CRP, SAA
Rem: APP = protene de la phase aige. certaines APP = protene ftale, concentration en APP dpend
de leur vit de production et de dgradation
FIBRINOGNE ET -GLOBULINE
BV: test au glutaraldhyde qui prcipite les globulline. Le temps de coagulation es le reflet de la
concentration en -globuline
CV: (protinmie - fibrinognmie)/ fibrinognmie < 15 signe dune inflammation
CRP
H: scrte par le foie, elle reconnat les tissus lss qui librent toute une srie de substances, les fixe et
active le complment et le systeme immunitaire.
CV: Rle de marqueur de linfl, la concentration varie avec lge et le stade physiologique
CN: Marqueur de linflammation aige ( concentration x 100)
BV, CP, MT: nest pas un marqueur de linflammation
SAA, SAP
responsable de lamylodose. Le dosage du SAA serait intressant pour faire le monitoring de
linflammation chirurgicale, et de lvolution clinique dun animal atteint de lsions tissulaires. Mais seul
des laboratoires spcialiss peuvent le faire actuellement.
CERULOPLASMINE
Rle: oxydation du Cu et du Fe, il sagit du premier mcanisme de dfence en cas dintoxicaton au Cu.
Sa [ ] dans les phnomnes inflamatoires mais aussi dans dautres situations: ge, exercice physique,
gestation, ttm aux oestrognes.
Sa [ ] lors de malnutrition, malabsorption, noplasme, atteinte hpatique grave.
POLYAMINE ET MTHYLHISTIDINE
En cas de traumatisme le catabolisme et lanabolisme sont stimuls mais le catabolisme lemporte sur
lanabolisme. Les muscles dgradent leurs protnes endognes (donnent un substrat aux tissus rparer).

 La Polyamine est marqueur du rapport: anabolisme/catabolisme

Mthylnistidine est marqueur du catabolisme.
PSTI = PANCREATIC SECRETARY TRYPSIN INHIBITOR
lors de processus infectieux, inflammatoires ou cancreux
HYPERLEUCOCYTOSE
Neutrophilie: stress, inflamation, exercice (adrnaline), leucmie
Neutropnie : inflammation aige grave, pathologie de la moelle osseuse, ce nest pas un marqueur
adequat;
CONCLUSION
L Inflammation aige se traduit par de la fievre, une leucocytose parfois transitoire, des variation
protnes de linflammation.
Selon les espces les marqueursdivergent:
CN-CT: CRP, haptoglobine, ceruloplasmine
CV: fibrinogne, fer, ceruloplasmine
RT: SAA et haptoglobine
PC: haptoglobine, CRP

ELECTROPHORESE PAR CAPILLAIRE

Il sagit de lapplication de lelectro-endosmose. Les parois sont charges ngativement (tuyaux de 20
200 m de interne, en silicium fondu). Les ions + se positionnent sur les charges - et forme une couche
immobile.au large des parois, il existe un nuage de charges +. Si on applique une lectrode - au bout du
capillaire, ce nuage central + va se diriger vers elle. Les protines centrales migrent aussi vers - alors
quelles sont - car elles sont emportes par le courant du nuage positif. Il sagit du flux electro-osmotique
(lev pH ). Si pH diminue, les protenes sont moins - et le flux electro-osmotique diminue.
Support: parois capillaire
Couche immobile: potentiel de Stern
Nuage central: couche mobile attire vers cathode, entrane avec elle les protnes

Le flux lectro-osmotiquedpend donc du pH ( qand pH) et soppose la migration lectrophoretique.

Il donne meilleure discrimination des chantillons lectrophorse en agarose. On obtient un profil
inverse

+
Agarose

Capillaire
Albumine, la plus ngative, sera droite

TESTS DE FONCTIONNEMENT DU PANCREAS EXOCRINE

TESTS DE PANCRATITE AIGU AVEC NCROSE TISSULAIRE
ENZYMES SRIQUES:
Amylasmie
L'alpha-amylase coupe les liaisons alpha-1,4 des polysaccharides (amidon ou glycogne) en nimporte quel
endroit de la molcule, en donnant des dissacharides (le maltose), des dextrines (lisomaltose; Gluc(1 6)Gluc(1 4)-Gluc(1 4)-Glucoside), et du glucose. L'amylase circulante est inactive par les reins. Elle est
stable 5C. Chez le chien, elle se compose d'un ensemble de 4 isoenzymes produites par le pancras
(100%), la muqueuse duodnale (1%), et 14 autres tissus (0,05% de l'activit pancratique). Le pancras
est la seule source d'iso-3, le duodnum et le pancras produisent l'iso-4.
Dosage: (avec Ca++)
mesure de la vitesse de disparition de l'amidon (en prsence d'iode: coloration bleue) par la mesure de la
vitesse de dcoloration
mesure de la vitesse d'apparition de sucres rducteurs (maltose et glucose) (inutilisable chez le chien dont
le serum contient une maltase)
fixer un colorant sur un support amylac: l'amylase, en digrant le support, libre le colorant en solution
mesure d'une augmentation d'absorption de la solution (photomtrie).
Interprtation
Origine pancratique: accroissement amylasmie d'un facteur 3-4x lors de pancratite aigu. Les
cellules acineuses dversent leur contenu cellulaire dans les veinules ou dans le sang via la lymphe. Mais
cette atteinte pancratique ne peut tre confirme sans faire le dosage de la lipasmie & une valeur
normale d'amylasmie se rencontre parfois lors de pancratite aigu. ce serait pas drle!!!!
Origine non pancratique: atteinte rnale (l'insuffisance rnale avec urmie peut augmenter
l'amylasmie (2x) car le rein ne peut plus dgrader l'enzyme); obstruction du petit intestin (si l'animal
mange et vomit avec stimulation des scrtions du pancras);traitement aux corticodes.
Lipasmie: Le dosage de la lipase est bas sur la vitesse d'hydrolyse d'une mulsion standard de trioline
(la diminution de la turbidit est mesure dans lUV, 365nm) -> Kit!
Interprtation
Pathologiques si >285 UI/L chez le chien ou si >100 UI/L chez le chat
Origine pancratique: il existe de rares cas de pancratite aigu sans hyperlipasmie
Origine non pancratique: affection rnale, hpatique (cause?), administration de corticodes.
TESTS DE ROUTINE:
Formule leucocytaire:leucocytose, neutrophilie (>50.000), lymphopnie, osinopnie, monocytose
occasionnelle.
Hyperlipmie jeun due l'inactivation de la lipoprotine lipase pancratique
Dshydratation: les dplacements des liquides dus aux hmorragies, ascite, vomissements induisent une
diminution de la volmie: hyperprotinmie apparente et PCV augment.
Azotmie prrnale: l'hypovolmie provoque l'oligurie (et mme l'anurie) urmie cratininmie .
Epanchement pritonal sanguinolent: exsudat aseptique le liquide contient des globules rouges , des
neutrophiles, des gouttelettes de lipides
Hypocalcmie: cause incomprise
Hyperglycmie persistante ou transitoire (1-1,5 g/l ou suprieure 1,75 g/l)

Dosage de la methmalbuminmie: dans la forme hmorragique, l'hmolyse peut induire une

augmentation de la dgradation de l'hmoglobine. Le fer est oxyd en Fe+++ et l'hme porte alors le nom
de methme. Celle-ci se combine l'albumine.
TESTS DE LA PANCRATITE CHRONIQUE ET DE LINSUFFISANCE ENZYMATIQUE
Du tissu fibreux prend la place du tissu scrtoire lors de pancratite chronique, ds lors les enzymes ne
sont plus scrts en quantits suffisantes pour satisfaire les besoins de la digestion enzymatique des
aliments. Des troubles digestifs s'installent: ce sont des troubles de maldigestion. Ces troubles de
maldigestion empchent l'absorption des aliments: ils induisent donc des troubles de malabsorption.
ENZYMES SRIQUES (LIPASMIE, AMYLASMIE)
Pareil que la pancratite aigu (amylase, lipase) pendant les crises de pancratite aigu menant la
pancratite chronique. Par la suite, la maladie progressant, on observe une diminution progressive de leur
activit srique suite la diminution de la masse acineuse fonctionnelle ou l'obstruction des conduits
d'excrtion qui aboutit in fine une atrophie acquise du pancras.
EXAMEN DES MATIRES FCALES
Macroscopique: couleur jaune ple blanches, graisseuses, volumineuses, et souvent de trs mauvaise
odeur
Microscopique
triglycride: coloration au soudant, les globule graisseux deviennent rouge. Cel signe une IPE ou
insuffisance biliaire.
AG libres: ajout dacide actique, apparition de globule orange. Il sagit dune malabsorption
indpendant du pancreas et du foie.
Amidon: Frottis colors l'iode. La prsence d'amidon est signe par la prsence de structures bleunoirtres avec des franges vert-bleues en prsence de lugol. L'abondance de ces structures signe une
pancratite chronique (EPI).
Fibre musculaires strie:Des frottis colors au lugol, au bleu de mthylne, ou non-colors de fces
dilues dans l'eau montrent les fibres musculaires de couleur jaune-clair, aux extrmits mousses et
dont les striations transversales sont nettes. Leur prsence signe une insuffisance pancratique.
Protases fcales: La plupart des protases fcales sont d'origine pancratique (trypsine, chymotrypsine,
lastase, carboxypeptidases,..). Dtectes par un test la glatine: on apprcie l'incapacit de la glatine
se solidifier en prsence de protases.
mthode en tube: Si le contenu est liquide, il y a des protases dans MF, il ne sagit pas dune IPE. Si le
contenu est solide, il ny a pas de protases et lEPI probable
mthode sur film radiographiq: film digr en prsence de protases: pas bon (25% de Faux +)
Graisse fcale totale: CN dans cage mtabolique, alimentation contenant des quantits connues de graisse
et viande. Au dessus dun certain % de graisses ingres, il y a malabsorption si acides gras et maldigestion
si triglycrides CN normal : 95% des graisses sont digre; CN EPI : 40 80 % des graisses sont
dgres.
TESTS D'ABSORPTION ET DE TOLRANCE
Test d'absorption des graisses:
turbidit du plasma: aprs administration d'huile d'arachide per os avec un repas normal prlever le sang
2 3 heures aprs ingestion, et isoler le plasma comparaison de la turbidit avec un chantillon. Le tube
test doit tre plus trouble.
Tests quantitatifs: Mesure de l'absorption de trioline marque l'iode radioactif (131I) ou au 14C.

Test de dtection de l'activit chymotrypsine:

la BT-PABA est cliv par la chymotrypsine en PABA, on dose donc la PABA sanguine et urinaire
Si dans urine < 15 %: IPE
Si dans sang < 4 mg/L aprs 60 : IPE
Faux -: clivage par protases bacteriennes, clivage par protases bordure en brosse
Faux +: Vidange tardive de lestomac; atteinte de la muqueuse intestinale, problme hpatique ou rnal
TEST DE DTECTION DU TRYPSINOGNE SRIQUE: TRYPSIN-LIKE-IMMUNOASSAY
La majorit des scrtions pancratiques sont limines par les conduits pancratiques. Un trs petite
quantit (0,01 0,1%) s'chappe dans le sang, et on y trouve donc comme enzymes ou proenzymes:
l'amylase, la lipase, le trypsinogne ...etc...
Le trypsinogne sanguin a comme seule origine le pancras exogne contrairement la lipase et
l'amylase. D'o, toute diminution du taux en trypsinogne sanguin signe une insuffisance pancratique.
Des anticorps antitrypsine canine reconnaissent le trypsinogne canin, et cette reconnaissance est trs
spcifique: il n'y a aucune raction croise avec la trypsine d'autres espces ni avec le trypsinogne
humain. En consquence la dtection du trypsinogne canin ne peut tre faite l'aide d'un kit humain .
TESTS COMPLMENTAIRES
glycmie : yperglycmie lorsque le pancras endocrine est aussi atteint (avec hypercholestrolmie et
glucosurie);
Tests de coagulation: Quick, APTT allongs avant traitement de plusieurs jours la vitamine K. aprs 2
jours, les tests sont redevenus normaux.

VMISSEMENT & DIARRHE

VOMISSEMENTS AIGUS
Pertes importantes de H+, Cl-, H2O, K+ (carnivores), et Na+ induisant une alcalose mtabolique car
scrtion de H+ par la muqueuse gastrique selon la voie:
CO2+H2O (E) H2CO3 H

+ HCO3-

Les H+ vont dans la lumire gastrique, et HCO3- dans le sang. long terme: les Cl- tant limins par la
bouche, les HCO3- en excs ne seront plus limins par les reins car ils remplacent les Cl- perdus. les
analyses seront faites pour rechercher: une Dshydratation, une Hypochlormie (<90-95 mM), une
Alcalose mtabolique: augmentation de HCO3- du plasma >30mM
NB: une ACIDOSE est possible lorsque les vomissements sont d'origines gastrique et duodnale.
VOMISSEMENTS CHRONIQUES
Mmes pertes que lors de vomissements aigus, mais on observe aussi:
Une hypokalimie (<4 mEq/L) et une perte tissulaire en K+: En effet, cause de la dshydratation (qui
induit lhypovolmie) et des apports alimentaires insuffisants en Na+ (pour maintenir la volmie; car
vomit), laldostrone intervient au niveau rnal. Mais la rabsorption rnale du Na+ quelle provoque
ne peut tre compense par une retenue de Cl- pour assurer l'quilibre des charges. Cet quilibre est
alors obtenu par une sortie de H+ et de K+.
Renforcement de l'alcalose mtabolique
Atteinte rnale grave des tubules, suite la dficience tissulaire en K+ et de l'hypovolmie (chute de
l'irrigation), du coup urmie et cratininmie augmente

Les espces les plus atteintes sont le chien et le chat (le cheval ne peut vomir). Autre cause induisant une
symptomatologie semblable: l'obstruction du pylor ou la torsion de caillette chez les ruminants. On
observe dans ce cas: une hypochlormie, une hypokalimie, une alcalose mtabolique.
DIARRHES AIGUS
Dshydratation en fonction de la svrit de la diarrhe, les pertes en fluide peuvent reprsenter 2-7%
du poids vif et par jour! L'organisme se dshydrate au dtriment du fluide plasmatique, donc des fluides
extracellulaires. En revanche, on peut observer une augmentation du volume des fluides intracellulaires
due l'inhibition des fonctions cellulaires La dshydratation vasculaire se marque par une augmentation
de l'hmatocrite et de la protinmie.
Pertes ioniques: Les matires fcales diarrhiques contiennent de grandes quantits de Na+, Cl-,
HCO3- et, comparativement ces ions, de faibles quantits en K+ bien que les pertes en potassium
soient significativement plus importantes que dans des fces normales Ceci est d au fait que le liquide
perdu est un ultrafiltrat de plasma. En gnral, les modifications de la natrmie sont minimes.
Normonatrmie
Acidose mtabolique par limination excessive des HCO3-, augmentation du mtabolisme
anarobie suite l'hypovolmie, diminution du pouvoir tampon des reins suite l'hypovolmie,
fermentations bactriennes dans l'intestin et production dAGV, hyperkalimie ( normokalimie)
par perturbation des changes intra-extracellulaires. La consquence de l'hyperkalimie pour le
muscle cardiaque sera nfaste:bradycardie et altration de l'ECG: l'onde T est augmente et la
repolarisation ventriculaire est ralentie. L'onde P peut disparatre. Le coeur s'arrte en diastole.
C'est la cause la plus frquente de mortalit chez le veau souffrant de diarrhe aigu. La masse musculaire
tant importante, lacidose est renforce, et les changes H+ K+ sont accrus (comparativement au
nourisson).
DIARRHES CHRONIQUES
Maladie de l'adulte. Les pertes fcales en eau et en ions sont compenses par l'apport alimentaire et
l'intervention active des reins (rgulation de la rabsorption du sodium). Mais si les apports en eau et en
lectrolytes font dfaut, on observera:
- une hyponatrmie (le plasma devient hypotonique >< au plasma de diarrhe aigu)
- une hypokalimie
- une hypovolmie (dshydratation).