OM

Matière : Mycologie Algologie-Virologie

TP 02
Isolement de quelques mycètes à
partir du sol

2023/2024

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 But du TP :
Isoler des champignons filamenteux à partir de leur milieu naturel, le sol.
Pour ce faire, nous utiliserons deux techniques différentes : la méthode des
suspensions-dilutions et la méthode d’inoculation directe.

Introduction :
Les champignons sont des organismes eucaryotes hétérotrophes qui jouent un
rôle important dans le cycle des nutriments et la décomposition de la matière
organique. Ils sont abondants dans les sols, où ils peuvent être trouvés dans
une grande variété de niches écologique.
•La méthode des suspensions-dilutions est permet de séparer les
champignons individuels les uns des autres, ce qui leur permet de se
développer et de se multiplier de manière indépendante.
•La méthode d’inoculation directe est fait pour cultiver des champignons
biologiquement actifs qui peuvent croître et se reproduire dans des conditions
de laboratoire.

1 – Les Equipements et Matériels Utilisés :

•Des boîtes pétri, Vortex, Des tubes à essai + support, Bec Bunsen,
Encemenceur, Pipette pasteur, pompe à crémaillère, Incubateur.
•L’eau distillée stérile, Milieu de culture Sabourand, solution mère, échantillon
du sol.

2 - Mode Opératoire :
•Expérience (1) : « méthode des suspensions-dilutions »
•Nous prenons 1 ml de la solution mère (10-1) et commençons à la diluer dans
4 tubes à essai afin de la mettre dans le premier tube à une concentration
de 10-2 et à bien la mélanger. Ensuite, nous prenons 1 ml du premier tube et
le diluons dans le deuxième tube à une concentration de 10-3 et bien
mélanger.Puis nous complétons le processus avec le reste des tubes pour
atteindre la concentration 10-5.
•On prélève 1 ml du tube à essai avec une concentration de 10-5, on le met
dans une boîte de Pétri vide, et on répète le processus avec le tube 10-4 et
10-3. Puis on verse dessus le milieu de sabouron, et laisse-le sécher .
•On prélève aussi 1 ml du tube à essai avec un concentration de 10-5, on le
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met dans une boîte de Pétri contenant du milieu Sabouraud gélose. On répète
la même étape depuis le tube 10-4
•Placer les boîtes de Pétri à l’incubateur à 25°C pendant 3 jours.
•Experience (2) : « méthode d’inoculation directe »
•On place quelques particules de sol dans une boîte de Pétri contenant du
milieu de culture Sabourand gélose
•Nous le mettons à l'incubateur à 25°C pendant 24 heures Puis on l'observe.

•Les calculs :
Nous avons observé 9 colonies fongiques dans la boîte de Pétri 10-4 a partir
de là, nous calculons :
9×104 = 90000
Et à partir de là, la densité est 90000

3 – Conclusion :
Les deux techniques utilisées dans ce TP ont permis d’isoler des champignons
filamenteux à partir de leur milieu naturel, le sol. La méthode des suspensions
-dilutions est plus efficace pour isoler des souches sporulantes, tandis que la
méthode d’inoculation directe est plus efficace pour isoler des souches
métaboliquement actives.
Les résultats de ce TP ont montré que le sol est un milieu riche en
champignons filamenteux. Ces champignons jouent un rôle important dans le
cycle des nutriments et la décomposition de la matière organique.