Ecole Supérieure de l’éducation et Examen de la session normale de

de la Formation (ESEF) printemps

Université Ibn Tofaîl de Kenitra Durée épreuve : 1h30min
Nom et Prénom de l’étudiant/e : Module : Biologie Moléculaire (M34/S6)

I. Questions à choix multiples (14 points)

Cochez la réponse/les réponses justes
1. les étapes de l’extraction de l’ADN génomique :
a. La déprotéinisation de la solution/précipitation de l’ADN/ la lyse Cellulaire/
traitement de l’ARNase
b. La lyse cellulaire/ deprotéinisation de la solution/ précipitation de l’ARN/ traitement
par l’ADNase
c. La lyse cellulaire/déprotéinisation de la solution/précipitation de l’ADN/traitement
par l’ARNase

2. L’extraction des plasmides se fait par:

a. l’action des enzymes pour éliminer les ADN chromosomiques
b. purification par lyse alcaline
c. la centrifugation en gradient de densité

3. Les étapes de l’extraction de l’ADN des plasmides

a. Lyse des cellules/Neutralisation rapide /Récupération de l’ADN par centrifugation/
Suspension de l’ADN plasmidique dans TE
b. Précipitation de l’ADN Chromosomique/ Récupération de l’ADN par
centrifugation/ Elimination des ARN
c. centrifugation à des grandes vitesses

4. La PCR est une technique de :

a. clonage et séquençage
b. transformation et transduction
c. réplication in vitro

5. Les étapes de la PCR :

a. Initiation/Elongation/Terminaison
b. hybridation/dénaturation/Elongation

1
c. Dénaturation/hybridation/Extension

6. Cocher les informations correctes sur les enzymes de restriction :

a. Clivent les liens phosphodiester internes
b. les endonucléases reconnaissent séquences spécifiques
c. digèrent l’ADN dans des sites non-spécifiques
e. Reconnaissent des séquences palindromes
f. Différentes Extrémités sont Générées : Extrémités franches et protubérantes

7. L’électrophorèse sur gel d’agarose est destinée :

a. séparation des protéines
b. séparation des acides nucléiques
c. séparation des phospholipides membranaire

8. la séparation des molécules à travers l’électrophorèse se fait en fonction de :

a. la nature chimique des macromolécules
b. la présence les alcools, acide phosphorique, et les bases azotées
c. la charge des macromolécules et de leur taille.

9. l’ordre des gènes qui forment l’opéron lactose est :

a. opérateur/promoteur/lacZ lacY lacA
b. promoteur/opérateur/ lacZ lacY lacA
c. promoteur/opérateur/ lacY lacZ lacA

10. l’opéron tryptophane est constitué par des gènes suivants :

a. cinq Gènes de structure, un gène régulateur, un promoteur, et un opérateur
b. un gène régulateur, un promoteur qui inclut l’opérateur et cinq gènes de structure
c. les enzymes de structure, régulateur, promoteur, opérateur

11. La régulation de la transcription chez les eucaryotes est assurée par :

a. le phénomène de « spilicing » ou épissage
b. le promoteur, une séquence avec des boites CAAT et TATAA, reconnu par l’ARN
polymérase
c. l’addition d’une coiffe à l’extrémité 5’, et l’excision-épissage, et l’insertion d’une
longue queue poly A.

12. les différents types ARN chez les eucaryotes :

a. ARNr, ARNm, ARNt
b. ARNr, ARNm prémessager, ARNt
c. ARN nucléolaire, ARN mitochondriale, ARN chloroplastique

2
13. Les principales étapes de Southern-blot.
a. Extraction de l’ARN, séparation par gel d’électrophorèse, dénaturation, transfert sur
membrane de nitrocellulose, autoradiographie.
b. Extraction des protéines, séparation par électrophorèse, dénaturation, transfert sur
membrane de nitrocellulose, autoradiographie.
c. Extraction et lyse d’ADN, séparation par électrophorèse, dénaturation, transfert sur
membrane de nitrocellulose, autoradiographie.

14. Pour les sondes non radioactives (froides), on utilise :

a. Marquage par Random printing (amorçage au hasard)

b. Les marquages à la biotine et à la digixigénine
c. P32

Partie II. Questions de développement : Choisissez une de ces deux

questions
A. Clonage d’un gène topo (6points)
Un fragment d’ADN génomique de levure de 2800 pb, contient la séquence codante
(CDS) d’un gène (topo) codant une topoisomérase. En vue d’exprimer cette enzyme
dans la bactérie E.coli, sa séquence codante est clonée dans le vecteur plasmidique
pBM203.

1. A l’aide des figures ci-dessus, mentionner les endonucléases de restriction permettant

l’insertion du gène topo dans le vecteur plasmidique pBM203? Justifier (2points)

2. Le fragment d’ADN génomique et le vecteur pBM203 digérés sont alors mélangés et mis
en présence de l’ADN ligase du bactériophage T4. Quelle est la molécule obtenue à l’issue de
cette ligation. Schématisez la molécule obtenue. (2points)

3
3. L’ADN plasmidique résultant est purifie et digéré par l’endonucléase HindIII puis soumis à
une électrophorèse sur gel d’agarose. Le gel est ensuite coloré au bromure d’éthidium et l’ADN
visualisé sous rayonnement UV. Le profil de digestion obtenu pour le plasmide recombiné ainsi
que pour le plasmide pBM203 natif est illustré figure 2. (2points)

Figure 2. L’Electrophorèse sur gel d’agarose de l’ADN plasmidique pBM203 native après
digestion par HindIII (piste1), les pistes 2 et 3 correspondent aux plasmides recombinés
digérés par l’endonucléase HindIII.

- Les profils de restriction obtenus, sont-ils ceux attendus pour les plasmides natifs et
recombinants ? Justifier.

B. Situation problème (6points)

Aujourd’hui, pour soigner le diabète, on produit l’insuline par génie génétique. Quelles
sont les étapes à suivre pour ce clonage en appuyant vos réponses par des schémas
convenables.